双斑长跗萤叶甲Monolepta hieroglyphica (Motschulsky)又名双斑萤叶甲，属鞘翅目Coleoptera叶甲总科Chrysomeloidea叶甲科Chrysomelidae萤叶甲亚科Galerucinae，是一种我国分布很广的多食性害虫(陈静等, 2007)，以成虫取食叶片，大发生时常造成棉花蕾铃大量脱落，给棉花生产造成巨大损失(聂强，2009)，主要为害棉花、玉米、水稻、高粱、谷子等粮食作物，大豆、苏子、向日葵等经济作物，筒篙、胡萝卜等十字花科蔬菜，同时还取食多作杂草、果树及园林植物(陈静等, 2007; 杜爱华, 2013; 张永强等, 2013)。

对于农业植保工作而言，其核心目的为防治病虫害，而病虫害基础状况的把控则是防治工作开展的重点。对此，无人机技术的融合，可对病虫害发展情况进行全方位把控，在此基础上拟定有效的防治措施。特别是针对人工难以检测的区域，可通过无人机技术的使用，精准把控病虫害发生规律，做好相应的预防、控制措施，还可绘制相应的病虫害发生趋势图，且将其定义为农业生产核心数据，辅之长期观测操作，将各项数据实时传递给农户，以便保证农业生产的安全性。

对2017年3－5月我院住院药房药品调剂流程现状进行调查和分析。首先，要求病区和住院药房填写“住院药房药品调剂现状调查表”，调查内容包括病区护士对住院药房药品调剂的满意度及住院药房对病区领药情况的满意度，并分析药品调剂及领药过程中存在的问题，如领药流程是否合理、领药时间是否恰当等；同时，结合定期自查，并召开药品调剂相关科室协调会，总结和讨论目前工作中存在的问题。最终得出目前住院药房药品调剂过程中存在的主要问题为领药次数过多、领药时间过长。

翻译课堂中翻译工作坊的开展，是在以PBL为基础的教学策略上，将其中的“问题”（Problem）变为“项目”（Project），以翻译项目为驱动组织教学活动，使学生通过翻译工作坊中的“项目驱动”，促进学生自主学习和翻译实践能力的提升。翻译工作坊以翻译公司中的翻译岗位设置为导向，将学生随机分组，旨在打破学生之间的固有熟悉模式，培养学生团队的协调与合作能力。每组设置项目经理、译员、术语提取与归纳、校审、PPT制作等角色。具体流程为翻译材料选取、翻译工作坊具体实施、翻译工作坊的反馈与反思。

温度是影响昆虫发育、存活和繁殖的重要生态因子，环境温度的变化会对其种群动态产生重要影响(Marnett et al., 2003; 李定旭等, 2014)。高温条件下，昆虫蛋白含量增加，且蛋白含量与昆虫抗氧化能力密切相关(刘缠民等, 2006; 乔利等, 2015)，昆虫体内具有很强氧化能力的超氧阴离子自由基和过氧化氢会增加，对生物分子产生破坏，形成生物氧毒害。昆虫与其他动植物一样，在其体内存在着一个清除自由基的保护酶系，如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶，能有效地清除自由基和过氧化氢(李周直等, 1994; Kashiwagi et al., 1997; Acar et al., 2001)。目前仅对新疆北疆大发生的双斑长跗萤叶甲不同虫态及整个世代的发育起点温度和有效积温进行了研究，双斑长跗萤叶甲的发生动态受温度的变化及虫源数量等因素影响较大，可能使害虫的始见日和盛发期有所变动(李广伟等, 2008；袁海滨等, 2015)。在新疆特殊的高温、干旱的气候条件下，双斑长跗萤叶甲适应环境是否会改变体内蛋白含量和保护酶活性，需要进一步研究才能证明。

本研究在实验室条件下采用不同高温、不同时间处理，研究了短时高温暴露条件下双斑长跗萤叶甲成虫体内总蛋白和两种保护酶的变化，其结果有助于明确双斑长跗萤叶甲对高温胁迫的适应能力，对解析其耐热性及夏季田间种群数量动态，制定适宜的生防策略具有重要意义，为进一步研究高温对双斑长跗萤叶甲影响的生理机制奠定基础。

1 材料和方法

1.1 材料

利用SPSS 20.0 统计软件进行数据处理，采用Duncan 法进行差异显著性检验。

供试试剂及仪器：总蛋白含量、CAT活性、POD活性的测定试剂盒购于南京建成生物科技有限公司。供试的试验用品和仪器有：试管、微量移液器、离心机(TGL-16gR)、轨道式摇床(MYC-10)和可见分光光度计(UV-1800)等。

1.2 方法

我为你找到一份工作，好像很牛气的样子。其实我可怜你就是可怜我自己。当初我也是为找一份工作百般挣扎，如果有一份像样的工作，我就不会是今天这个样子了。我是为了一份工作，才迫不得已出卖了自己的贞操啊。

取健壮的双斑长跗萤叶甲成虫分别置于26℃(CK)、33℃、37℃、41℃、45℃下处理，每温度处理下设置的处理时间分别为0.5 h、1.5 h、2.5 h、6 h、12 h。每温度处理取30头活虫供试，每处理重复3次。

1.2.2 酶液提取

726 Separation and purification of extracellular vesicles in tissue microenvironment and its physiochemical characteristics

准确称取待测组织的重量，按重量(g)：体积(mL)=1 ∶9的比例加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件机械匀浆，2500转/min，离心10 min，取上清液用生理盐水按1 ∶9稀释成1%组织匀浆，或用生理盐水按1 ∶4稀释成2%组织匀浆，待测。

Du AH.Monolepta hieroglyphica damage characteristics and control strategy of greenhouse vegetable seedlings [J]. China Plant Protection, 2013, 23 (1): 33-36. [杜爱华. 双斑长跗萤叶甲为害棚室蔬菜幼苗特点及防治策略[J]. 中国植保导刊, 2013, 23 (1): 33-36]

总蛋白质含量测定：取0.05 mL样品于离心管中，加入3.0 mL考马斯亮蓝法显色剂混匀，静置10 min，于595 nm处，1 cm光径，蒸馏水调零，测各管OD值。以蒸馏水作对照。计算公式：

蛋白浓度标准浓度(0.563g/L)

POD活性测定：取试剂盒中试剂1应用液 2.4 mL，试剂2应用液 0.3 mL，试剂3应用液 0.2 mL加入离心管，再加入样品0.1 mL，37℃水浴准确反应30 min后，加入试剂4应用液 1.0 mL，混匀后，3500转/ min离心10 min，取上清420 nm处，1 cm光径，双蒸水调零测定OD值。(以双蒸水作对照)。计算公式:

POD活动÷反应时间(30 min)÷待测样本蛋白浓度(mgprot)×100

参考文献(References)

 

1.3 统计方法

供试虫源：双斑长跗萤叶甲成虫采自新疆玛纳斯兰州湾跗近玉米田及田边杂草，用棉花叶片饲养于自制的养虫盒(10 cm×6 cm×6 cm)内，放入PXZ型智能人工气候箱(温度26℃±1℃，光周期16 h ∶8 h (L ∶D)，相对湿度(RH) 80%±5%)，饲养备用。

2 结果与分析

2.1 总蛋白测定结果

同一时间处理条件下，随处理温度逐渐升高，双斑长跗萤叶甲成虫总蛋白含量呈现逐渐上升的趋势。随处理时间延长，双斑长跗萤叶甲成虫总蛋白含量达到最高点所需要的温度逐渐降低。在处理0.5 h 时45℃总蛋白含量达到最高，在处理1.5 h、2.5 h、6 h 总蛋白含量都在41℃达到最高，在处理12 h 时37℃总蛋白含量达到最高( 图1) 。

同一温度处理条件下，随处理时间延长，双斑长跗萤叶甲成虫总蛋白含量逐渐增加。在33℃处理中，总蛋白含量在处理2.5 h 时与对照相比有显著的上升，持续上升到12 h; 在37℃ 处理中，在6 h 时总蛋白含量显著增高; 在41℃ 处理中，0.5 h 时总蛋白含量就有显著的增高，且持续显著增高至6 h，在12 h 有不显著的下降; 在45℃处理中，总蛋白含量虽然有升高，但是变化不显著(图1) 。

丁酸钠（批号20171204，规格10 mg），购自美国Sigma公司；戊巴比妥钠注射液（批号20171122，规格0.25 g），购自上海新亚药业有限公司；FITC荧光标记的葡聚糖（批号20171211），购自杭州新乔生物科技有限公司；二胺氧化酶（DAO）ELISA检测试剂盒（批号20180112），购自南京建成科技有限公司；一氧化氮（NO）ELISA检测试剂盒（批号20180111），北京碧云天生物试剂公司。

2.2 POD 活性测定结果

同一时间处理条件下，随处理温度逐渐升高，双斑长跗萤叶甲成虫POD 活性呈现先上升后下降的变化趋势。在处理0.5 h、1.5 h 时POD 活性有变化，但无显著性差异，均在37℃的POD 活性达到最高，但与对照相比无显著性差异; 在处理2.5 h、6 h、12 h 时POD 活性有明显的先升高后降低的变化，差异显著，均在33℃时POD 活性达到最高，与对照相比有显著性差异( 图2) 。

同一温度处理条件下，随处理时间延长双斑长跗萤叶甲POD 活性随时间增加先升高后降低。在处理33℃时，POD 活性在6 h 时达到最高，在处理37℃时，POD 活性在2.5 h 时达到最高，在处理41℃、45℃时，POD 活性在0.5 h 时达到最高。在33℃，2.5 h POD 活性显著升高，12 h POD有不显著的下降趋势; 在37℃、41℃、45℃，0.5 h POD 活性有显著的升高，12 h POD 活性下降到最低，且显著低于对照( 图2) 。

  

图1 不同温度和时间处理后双斑长跗萤叶甲成虫总蛋白含量变化Fig.1 Contents of total protein in adult Monolepta hieroglyphica exposed to different temperatures and time注：图中大写字母表示同一温度不同处理时间的显著性差异，小写字母表示同一时间不同处理温度的显著性差异，两处理显著水平P<0.05。下图同。Note：The capital letters in the figure represent significant differences in the processing time of the same temperature, Lowercase letters represent significant differences in different temperature at the same time. P<0.05.The same below.

  

图2 不同温度和时间处理后双斑长跗萤叶甲成虫POD活性变化Fig.2 Changes of POD activity in adult Monolepta hieroglyphica after different temperatures and time

2.3 CAT活性测定结果

同一时间处理条件下，随处理温度逐渐升高CAT活性呈下降-上升-下降的趋势均在33℃时CAT活性有显著的下降，37℃时CAT活性达到最高。在41℃时显著下降，在处理0.5 h和1.5 h、45℃时CAT活性达到最低，在处理6 h和12 h、41℃时CAT活性达到最低(图3)。

于2017年5月，选取胸径为6 ～ 8 cm的降香黄檀为材料，选择向南坡、地形平整、长势健康一致的林分，每木检尺。实验设5个处理：(1)去冠移(修掉树冠的1/2枝叶 + 移植)；(2)全冠移(不修枝 + 移植)；(3)断根；(4)去冠(修掉树冠的1/2枝叶)；(5)对照(CK)。每处理15棵，共75棵树。

同一温度处理条件下，随处理时间延长CAT活性呈现显著下降(与对照差异显著)后逐渐升高的变化趋势。在33℃ 0.5 h时CAT活性最低；在37℃、41℃时，POD活性呈先显著升高后显著降低，分别在1.5 h、2.5 h时CAT活性达到最高；41℃，6 h时CAT活性就显著低于对照，12 h CAT活性达到最低；在45℃时，CAT活性呈显著的下降趋势(图3)。

  

图3 不同温度和时间处理后双斑长跗萤叶甲成虫CAT活性变化Fig.3 Changes of CAT activity in adult Monolepta hieroglyphica after different temperature and time

3 结论与讨论

研究表明，昆虫总蛋白含量越高抗氧化能力越强(乔利等, 2015)。双斑长跗萤叶甲成虫总蛋白含量随时间和温度的增加逐渐升高，这与茶小绿叶蝉Empoasca onukii成虫(乔利等, 2015)的研究结果相同，说明在蛋白含量升高过程中双斑长跗萤叶甲的抗氧化能力也逐渐升高。在12 h、37℃处理时总蛋白含量最高，此时抗氧化能力最强，在41℃处理12 h有下降趋势，在45℃处理时该虫总蛋白含量依然升高，且高于对照，表明该虫的抗氧化能力较强。

当昆虫受到温度胁迫时，虫体内SOD活性升高以降低超氧自由基含量，必然产生大量的H2O2，需要POD和CAT来清除(Park et al., 2009; 宋月芹等, 2009)。双斑长跗萤叶甲的POD活性随温度的升高表现为先升高后降低的变化，这与高温胁迫对双齿多刺蚁和梨小食心虫的影响结果一致(刘缠民, 2007; 刘彦飞, 2013)。POD活性升高表明双斑长跗萤叶甲在受到高温胁迫时能及时产生POD，用来分解SOD分解自由基产生的大量H2O2，对自身起到保护作用。然而在时间和温度处理组合12 h、41℃和1.5 h、45℃时POD活性显著降低，并低于对照水平，说明在较长处理时间和较高温度条件下抑制了双斑长跗萤叶甲体内酶活性，甚至导致酶活性丧失，最终导致昆虫死亡。双斑长跗萤叶甲的CAT活性随温度的升高先降低-后升高-再降低的变化，这与温度对莲草直胸跳甲Agasides hygophila、西花蓟马Frankliniella occidentalis和茶淡黄刺蛾Darna trima的影响研究结果相同(曹雪, 2014; 郑玉涛, 2015; 李品武等, 2016)。在处理33℃时，CAT活性低于对照，随着处理时间的延长，CAT活性逐渐升高，可能是33℃刚开始抑制了CAT活性，但随着时间的延长，双斑长跗萤叶甲的CAT活性接近恢复到正常，说明该虫适应了33℃处理对它的影响；在37℃时CAT活性达到最高，在CAT活性升高的过程中，其作用原理与POD相同，用来清除SOD分解自由基产生的大量H2O2。在41℃处理2.5 h后CAT活性被抑制后不能恢复，不能起到原有的保护作用，在处理45℃时CAT活性一直处于下降趋势，并且在41℃，6 h处理中就已经显著低于对照，说明在41℃6 h时CAT受到抑制且无法恢复到对照。

双斑长跗萤叶甲的高温耐受性与蛋白含量和保护酶活性有直接的关系，在高温下总蛋白含量、POD、CAT活性差异显著。总蛋白含量在41℃时普遍高于其他处理；POD活性在33℃、2.5-12 h和37℃、0.5-2.5 h处理时高于其他处理；CAT活性在37℃普遍高于其他处理,推测在高温胁迫33℃、37℃时双斑长跗萤叶甲体内产生的H2O2较多，由POD和CAT共同清除H2O2。综上所述，双斑长跗萤叶甲在33℃、2.5 h和41℃、12 h处理之间体内都有直接或间接的保护作用。表明在高温胁迫下，双斑长跗萤叶甲通过不断积累体内总蛋白和保护酶，以提高自身的耐热能力。此研究在实验室进行，与大田情况存在差异，需进一步探索双斑长跗萤叶甲在室外高温条件下，体内生化物质的变化情况，为该虫预测预报提供必要的理论依据。

CAT活性测定：取试剂1应用液 1.0 mL(37℃预热)，取试剂2应用液 0.1 mL(37℃预热)，加入1%组织匀浆液0.05 mL，混匀，37℃准确反应1 min后，再加入试剂3应用液 1.0 mL、试剂4应用液 0.1 mL，混匀，0.5 cm光径，405 nm水调零测各管吸光度(对照在加入试剂4后加入1%组织匀浆0.05 mL，混匀，0.5 cm光径，405 nm水调零测各管吸光度。)计算公式：

Acar O, Türkan I, Özdemir F. Superoxide dismutase and peroxidase activities in drought sensitive and resistant barley (Hordem vlgare L.) varieties [J]. Acta Physiologiae Plantarum, 2001, 23 (3): 351-356.

Liu CM, Ma JQ. Correlation analysis between survival rate and protection enzymes of Polyrhachis vicina under low tempera-tures [J]. Journal of Northwest Forestry University, 2006, 21 (6): 136-138. [刘缠民, 马捷琼. 低温对大黑蚁存活率和保护酶影响的相关分析[J]. 西北林学院学报, 2006, 21 (6): 136-138]

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1.2.3 蛋白含量和酶活性测定

Kashiwagi A, Takase M, Hanada H, et al. Comparison of catalase in diploid and haploid Rana rugosa using heat and chemical inactivation techniques [J]. Comparative Biochemistry and Physiolog-Part B: Biochemistry & Molecular Biology, 1997, 118 (3): 499-503.

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传统的教学方法是学生被动接受知识，缺乏主观能动性，学生也无心向学，教师忽视学生自主性学习能力的培养。而财务人员职业特点决定了要不断学习新知识，其一，国家财务政策法规不断更新；其二，信息技术高速发展，财务软件日新月异；其三，财务人员要不断参加各种会计职称技能考试，提升自己知识水平和职务职称，因此，培养学生的自主学习能力至关重要。

1.2.1 样品处理

Li PW, Fu XL, Chen SC,et al. Effect of temperature stress on four protective enzymes and overall antioxidant capacity in Darna trima (Moore) [J]. Chinese Journal of Applied Entomology, 2016, 53 (4): 809-816. [李品武, 付雪莲, 陈世春, 等. 温度胁迫对茶淡黄刺蛾四种保护酶活力和总抗氧化力的影响[J]. 应用昆虫学报, 2016, 53 (4): 809-816]

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综合奉新县在南昌大都市区域规划中所处的空间层次，结合上述实际情况分析，奉新县在经济再发展中要注重人与自然的关系，寻求经济社会发展诉求点、自然资源的承载点、区域功能要求的契合点，综合三点考虑，发展社会经济，构建绿色生态产业，引导城镇共同发展。同时由于县内文化资源丰富，可以大力构建新的旅游产业发展模式——全域旅游。

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回想高一时的我，不思进取，迷茫困顿，要别人狠狠皱着眉头思索才能想起来是谁，是男生中晦涩隐秘的存在。我的高中生活漫长又无望，唯一的乐趣，就是和同桌沐子合资在班上开的“小卖部”。说直白些，也就是两个牛皮纸箱，里面塞满了我们淘来的辣条、卤蛋、泡面等零食，出售给大家赚取差价。

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a“.主调+级音”两节型过腔。如“昆南”阴平声字“因”的唱调（《牡丹亭·拾画》【颜子乐】“因何蝴蝶门儿落合”，715），该单字唱调的过腔是其中的是第一节主调性过腔，是第二节级音性过腔①亦可解作同一主调音势在不同音位上的表现，即所谓的“移位”。，由此构成的即“主调+级音”两节型过腔。

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