目前医学研究发现，幽门螺杆菌(helicobacter pyloyi,Hp)感染与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌及胃黏膜相关淋巴样组织(MALT)淋巴瘤(mucosa associated lymploid tissue)的发病密切相关[1]。1994年世界卫生组织将其列为胃癌的Ⅰ类致癌原。大量研究证据显示，肠型胃癌和约90%非贲门部胃癌发生与Hp感染相关[2-3]。幽门螺杆菌是世界上感染率最高的细菌之一，故其感染被认为是一个世界性的问题。我国亦属感染率较高的国家，目前我国Hp感染率仍约50%[4]，因而如何通过简单、有效、快速的方法来诊断Hp感染，从而进一步根除Hp变得十分迫切和重要。目前诊断Hp感染的方法分为侵入性和非侵入性两类，侵入性方法依赖胃镜活检，包括快速尿素酶试验(RUT)、胃黏膜直接涂片染色镜检、胃黏膜组织切片染色镜检、细菌培养、基因检测方法(如PCR、寡核苷酸探针杂交、基因芯片检测等)；非侵入方法有13C，14C呼气试验、15N尿氨排泄试验、粪便Hp抗原(HpSA)检测、血清Hp抗体检测。本文通过对493例病例血清学检查(Hp抗体检测)结果进行客观分析，为临床提供诊断、治疗依据。

1 资料与方法

1.1 资料 493例均为2015年9月-2017年8月，在我院消化科门诊及住院就诊，有上消化道症状的患者，其中男295例，女198例，年龄14～88岁。

应用脂质体Lipofectamine-2000对HEK-293细胞与miR-219及对照质粒(miR CTRL)和PRKCI共转染。转染24 h后，用双荧光素酶报告系统(PROMEGA，美国)检测细胞的荧光素酶活性。

1.2 检测方法 受检者空腹抽肘静脉血2 mL，采用免疫印迹法检测血清幽门螺杆菌4项抗体：CagA抗体、VacA抗体、UreB抗体、UreA抗体，试剂为深圳市伯劳特生物制品有限公司产品，严格按试剂盒说明书进行操作。检验原理：本试验先将Hp抗原用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，按分子量大小不同分开，再将其转移至硝酸纤维薄膜上，如果被检血清有相应抗体，应用酶联免疫吸附反应，就会在抗原的相应位置出现显色区带，根据阳性区带的分子量不同即可判断Hp类型。

1.3 Hp抗体分型判断标准 CagA和VacA抗体同时阳性或任意一种阳性，为I型Hp感染，即认为存在产细胞毒素的幽门螺杆菌；UreA和UreB抗体同时阳性或任意一种阳性，未见CagA，VacA抗体，即为Ⅱ型Hp感染，其毒性较弱；未见CagA，VacA，UreA和UreB四种抗体，即为Hp抗体阴性。

1.4 统计学方法 应用SPSS 19.0统计学软件对数据进行处理，Hp感染率及I型感染率用%表示，各组感染率比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

4.孵化器近两年亏损面递减。调查数据显示，在所调查的孵化器企业中，2015年和2016年两年都处于亏损状况的孵化器企业有7家，只是2015年或者2016年亏损的孵化器企业都有10家。有5家没有提供完整数据，不作为统计依据。

2 结果

对患者按不同年龄、性别分组，男、女性别Hp抗体阳性率，男68.81%，女65.15%，差异无统计学意义(P>0.05)。阳性率随年龄增加而增加，以40～，50～年龄组感染率最高；I型Hp感染率男性49.49%高于女性34.85%，2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表1～2。

 

表1 Hp感染与性别及年龄的关系

  

年龄/岁男检查人数 阳性人数 阳性率/%女检查人数 阳性人数 阳性率/%合计检查人数 阳性人数 阳性率/%<203004125.007114.2920～231669.5611763.63342367.6530～594169.49231565.22825668.2940～403382.5403177.5806480.0050～534279.25322784.38856981.1860～533566.04462554.35996060.670～643656.25422354.761065955.66合计29520368.8119812965.1549333267.34

 

表2 HpI型感染与性别的关系

  

例数Hp感染率I型感染率男295203(68.81)146(49.49)女198129(65.15)69(34.85)合计493340(68.97)215(43.61)

注：()内数字为感染率/%。

3 讨论

我国属幽门螺杆菌感染率较高的国家，各地人群检出率差别很大，普通人群的感染率为40%～60%。本资料结果显示本组人群的Hp感染率为67.34%，与文献报道相似。男女感染率差异无统计学意义(P>0.05)，且发现Hp感染随年龄增大而升高，感染率最高为40～，50～年龄组，达80%，81.18%，因Hp感染后常难自愈，一旦感染如不治疗多终身受累，故感染率随年龄增大而增高。但70岁以后感染率又下降，可能与老年人的免疫功能减退和感染后治疗有关。国外研究发现，大约60%的Hp菌株存在CagA基因，CagA基因是Cag致病岛(PAI)中的基因之一，而CagPAI被认为是Hp的主要毒力因子能造成胃上皮细胞损伤、坏死及溃疡，因此与胃、十二指肠溃疡及诱发癌变密切相关；VacA基因是嵌合体，其中VacA m2型Hp感染与胃粘膜重度的炎症和十二指肠溃疡相关[5]。Ⅱ型是低毒力株[ 6 ]，不具有编码CagA的基因，不表达CagA蛋白。这类菌的感染不能侵入胃上皮细胞，感染后一般只引起慢性浅表性胃炎。而产细胞毒素Hp菌株，致病力强的I型Hp感染率，本资料结果显示男性感染率49.49%高于女性34.85%，差异有统计学意义(P<0.05)，与有关报导相似[7]。目前医学研究发现，幽门螺杆菌与消化性溃疡、慢性胃炎、胃癌及MALT淋巴瘤发生密切相关，Hp感染是胃癌的第一致病因素，其分泌的毒力因子如细胞毒素相关蛋白A(CagA)等被证实与胃癌发生密切相关[8]。而绝大多数Hp感染者产生一种可测的抗体，其具有特异性。目前检测幽门螺杆菌抗体方法有多种：胶体金法、酶免疫检测(ELISA方法)、免疫印迹法、生物芯片技术(基因芯片和蛋白芯片检测)，各有优缺点。由于我国亦属感染率较高的国家，因此，准确诊断Hp感染和对Hp感染进行分型尤为重要。笔者采用免疫印迹法能够同时检测血清幽门螺杆菌4种抗体：CagA抗体、VacA抗体、UreB抗体、UreA抗体，可为Hp感染分型。且不需要特殊设备，快速简便，易于操作，特异性强，敏感性高，重复性好，不受药物影响，2小时即可出结果，可以作为临床实验室诊断依据之一推广应用。患者对于采血也比组织检查更容易接受，而且可以判断患者所感染Hp菌株的毒力(包括致病因子CagA和VacA等)，分型检测Hp抗体对临床诊治具有重要的指导意义[9]。对于检测出I型Hp感染的患者，由于I型Hp与胃癌和消化道溃疡密切相关，应进行根除治疗，可预防胃癌的发生。同时该方法也可推广应用于普通人群的普查。

[ 参 考 文 献 ]

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[5] 曹群奋，CHENG JF,车海斌,等.幽门螺杆菌的毒力基因、vacA基因亚型与上消化道疾病关系的研究[J]，中华医院感染学杂志，2007,17(12)：1491-1494.

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[9] 钟宁，周勇妹.幽门螺杆菌治疗失败原因分析及补救措施[J].中华全科医学，2011,9(11)：1782-1783.