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松阳花鳖和日本鳖存活率、体重增重和酶活性的比较

更新时间:2009-03-28

中华鳖(Pelodiscus sinensis)肉质鲜嫩,营养丰富,富含人体必需氨基酸、矿物质元素和脂肪酸,具有强身健体、提高免疫、延年益寿、防癌抗癌等多种功效,是一种良好的药食同源佳品[1-5]。中华鳖作为我国著名的“名特优”水产养殖对象,20世纪80年代,中华鳖的繁殖和养殖技术取得突破,养殖业迅猛发展,目前年产超过4.0×105t。浙江是中国龟鳖产业第一大省,养殖中华鳖产量占全国近50%。据不完全统计,全省各地有养殖场760多家,养殖面积30多万亩,主要分布在萧山、余杭、丽水、诸暨、海宁等地[6-7]

松阳花鳖属中华鳖的一个地方种群,产自浙江松阳县,具有肉质好、韧劲足、口感好等优点。松阳县自20世纪80年代中期就开始进行松阳花鳖人工养殖,在1995—1998年达到养殖高峰,有近200家养殖户,养殖面积达1500余亩,形成了上河村与大石村两个比较集中的松阳花鳖养殖村[8]。日本鳖是我国第一个联合选育的中华鳖新品种(品种登记证号GS03-001-2007),具有厚实宽大、肉质丰满、低脂肪和高胶原蛋白的特点,存在着生长快、温驯、品相好看、抗病力强的优势,在国内中华鳖水产市场中具有很好的养殖前景[9-10]。目前松阳县主养的甲鱼品种有松阳花鳖和日本鳖,对于“松阳花鳖和日本鳖哪一个品种生长性能更好,养殖效益更高”一直是松阳县中华鳖养殖的一个热门话题。因此本文比较松阳花鳖和日本鳖的存活率、体重增长以及肝脏抗氧化酶和磷酸酶活性的差异,旨在评估松阳花鳖和日本鳖的养殖前景。

1 材料与方法

1.1 实验动物及其管理

松阳花鳖和日本鳖均采自浙江省丽水市松阳县大石村中华鳖养殖场,规格20 g左右,数量分别为30只,选取活力强、体质健康、无缺损的个体。使用长宽高分别为60、40和35 cm的塑料箱进行中华鳖养殖,养殖箱底部铺设一层5 cm左右高的细沙,将池塘中的天然水体和经除氯、暴晒的自来水以1:1的比例加入到养殖箱中,水高大概到养殖箱的2/3处,并在其水面边沿上固定一块塑料平板方便饲料投喂及供鳖休息。每个养殖箱养殖5只松阳花鳖或日本鳖,养殖期间水温为25~32℃,每5 d换水一次,每次更换一半的养殖水体,每日投喂饵料为鱼和虾,投喂量为鳖体重的5%,投喂时间为下午四五点。

1.2 试验设计

松阳花鳖和日本鳖分别设置为5只一组,设置6个重复。养殖期间每日记录松阳花鳖和日本鳖的存活率并观察行为表现,及时清除死亡个体和残余的饲料,养殖第0、20、40和60 d随机抽取每个群体10只鳖进行体重测量,其中3只鳖进行解剖取样,提取肝脏于-70℃超低温冰箱保存,余下7只鳖放回原先的养殖箱中。

1.3 组织匀浆和酶活测定

将肝脏用手术剪剪成碎末,然后将组织碎末放入2 mL玻璃匀浆器,加入1 mL 0.65%生理盐水进行冰浴匀浆15次。匀浆后,倒入1.5 mL的离心管中,然后在4℃,3 000 g条件下离心10 min。离心后,吸取0.8 mL上清液于另一1.5 mL离心管中,最后将分装好的上清液置于-20℃冰箱待测。

采用邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性[11],反应体系为:0.05MK3PO4(pH=8.2),0.1 mM邻苯三酚,反应温度为25℃,反应时间为1 min,325 nm测吸光值的变化,酶活单位为U(反应溶液中1 min抑制邻苯三酚自氧化率50%的酶量定为1个活力单位)每克组织湿重。采用过氧化氢法测定过氧化氢酶(CAT)活性[12],反应体系为:10 mmol/L K3PO4(pH=7.0),10 mmol/L H2O2,反应温度为25℃,反应时间为4 min,240 nm测吸光值的变化,单位为U(1 min内转化1 μmol过氧化氢)每克组织湿重。磷酸酶活性的测定采用对硝基苯磷酸二钠法[13-14],酸性磷酸酶(ACP)或碱性磷酸酶(AKP) 的 反 应 体 系 为 :5.5 mM PNPP,0.1 M HAc-NaAc (pH=5) 或 0.1 M Na2CO3-NaHCO3(pH=10),反应10 min后加入2 mL 0.2MNaOH终止反应,405 nm测吸光值的变化。磷酸酶活性的测定温度为25℃,单位为U(1 min内转化1 μmol底物)每克组织湿重。

1.4 数据处理

采用SPSS 17.0软件根据T检验分析同一时间松阳花鳖与日本鳖体重或酶活的差异,单因素方差分析及LSD多重比较分析养殖第0、20、40和60 d松阳花鳖和日本鳖体重或酶活的变化,显著和极显著水平分别设置为P<0.05和P<0.01。

2 实验结果

2.1 松阳花鳖和日本鳖存活率和体重增重的比较

[6]崔文妹.中华鳖成鳖的生态养殖技术[J].水产养殖,2017(3):28.

养殖第 0 d,松阳花鳖(19.04±4.41g)与日本鳖(20.72±3.35g)体重无显著差异。每养殖20 d,松阳花鳖和日本鳖体重均显著增加(P<0.05),与第0 d相比,养殖第60 d松阳花鳖(50.84±7.24 g)和日本鳖(47.14±9.57 g)体重分别增加了166.97%和127.55%,但养殖第20、40和60 d松阳花鳖与日本鳖的体重均无显著差异(图2)。

The mean crystallite size of the line broadening of the(101) plane was evaluated by using the Scherrer formula[17],

  

图1 松阳花鳖与日本鳖存活率的比较

  

图2 松阳花鳖与日本鳖体重增重的比较

2.2 松阳花鳖和日本鳖肝抗氧化酶活性的比较

随着养殖时间的延长,日本鳖肝SOD活性缓慢上升,其中养殖第40 d酶活性(159.41±11.47 U/g)显著高于(P<0.05)养殖第 0 d(135.24±13.12 U/g),养殖第60 d酶活性(177.59±16.79 U/g)显著高于养殖第 0 和 20 d(144.72±7.71 U/g);养殖第 60 d松阳花鳖肝SOD活性(158.87±26.06 U/g)显著高于(P<0.05)养殖第 0 d(125.30±18.60 U/g),其余任意两个时间点的比较均未达到显著差异水平(图3)。养殖第0、20、40和60 d松阳花鳖与日本鳖肝SOD活性的比较均未达到显著差异水平(P>0.05)(图 3)。

在60 d的养殖过程中,无论是松阳花鳖还是日本鳖,肝CAT活性均无显著变化(P>0.05),养殖第0、20、40和60 d任意一个时间点松阳花鳖与日本鳖肝CAT活性的比较也都未达到显著差异水平(P>0.05)(图 4)。

治疗组:予益肾补髓化瘀涤痰汤,每袋质量是150 mL。方式是口服,一天则是吃两次,时间也是180天。(益肾补髓化瘀涤痰方药组成:水蛭5 g,桃仁10 g,生大黄5 g(后下),生蒲黄15 g(包煎),瓜蒌20 g,三七5 g(冲服),石菖蒲15 g,熟地15 g,山萸肉10 g加减:①痰热腑实,加芒硝,枳实,厚朴。②有意识障碍,加服安宫牛黄丸,服3~5天。③大便稀,去大黄。④气虚,加黄芪。

  

图3 松阳花鳖与日本鳖肝SOD活性的比较

  

图4 松阳花鳖与日本鳖肝CAT活性的比较

2.3 松阳花鳖和日本鳖肝磷酸酶活性的比较

养殖第60 d日本鳖肝ACP活性显著高于第0和20 d,其余任意两个时间点的比较均未达到显著差异水平;养殖第60 d松阳花鳖肝ACP活性显著高于(P<0.05)第 0、20 和 40 d,第 0、20 和 40 d的比较均未达到显著差异水平。在整个养殖过程中松阳花鳖与日本鳖肝ACP活性的差异均未达到显著性水平(P>0.05)(图 5)。

养殖第40和60 d日本鳖肝AKP活性显著高于(P<0.05)第0和20 d,其余任意两个时间点的比较均未达到显著差异水平;养殖第40 d松阳花鳖肝AKP活性显著高于(P<0.05)第0和20 d,养殖第60 d AKP活性进一步增加并显著高于(P<0.05)第0、20和40 d。除了养殖第60 d松阳花鳖肝 AKP活性(6.4801±0.8142 U/g)显著高于(P<0.05)日本鳖(4.025 6±0.682 9 U/g),养殖第 0、20和40 d两个群体的比较均未达到显著差异水平(图 6)。

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图5 松阳花鳖与日本鳖肝ACP活性的比较

  

图6 松阳花鳖与日本鳖肝AKP活性的比较

3 讨论

陈献稿等[15]比较日本鳖、太湖花鳖、黄河鳖、平阳鳖、杂交鳖等稚鳖的生长性能,结果表明5个中华鳖群体越冬成活率都很高,其中孵化率最高为日本鳖和杂交鳖,存活率和饵料利用率最高均为杂交鳖。陈献稿等[9]等进一步比较黄河鳖、日本鳖和平阳鳖雌雄幼鳖的生长性能,结果显示生长速度快慢为:雄性日本鳖>雄性黄河鳖>雌性黄河鳖>雌性日本鳖>雄性平阳鳖>雌性平阳鳖。由此可看出中华鳖不同群体在存活率、生长速度和饲料利用等方面存在一定的差异。本文的测定结果表明松阳花鳖在存活率和体重增重方面稍高于日本鳖,但两个群体的差异并不是很明显,这可能是由于养殖的时间不够久,又或者实验样品数量较少所致。

[11]曲敏,秦丽楠,刘羽佳,等.两种检测SOD酶活性方法的比较[J].食品安全质量检测学报,2014,5(10):3318.

SOD是生物体内重要的抗氧化酶,广泛分布于各种生物体内,如动物、植物和微生物等。SOD具有特殊的生理活性,是生物体内清除自由基的首要物质,其在生物体内的水平高低是生物体衰老与死亡的直观指标。CAT催化过氧化氢分解成氧气和水,是过氧化物酶体的标志酶。CAT存在于所有已知动物的各个组织中,其在肝脏的浓度最高。SOD和CAT这两种抗氧化酶在机体的防御反应和活性氧的清除中发挥着重要的作用,同时在农业、生物制药、医学诊断等领域也应用广泛[16-17]。在60 d的养殖过程中,松阳花鳖和日本鳖肝SOD和CAT活性均无显著差异,这可能是由于松阳花鳖和日本鳖均属同一物种——中华鳖(Pelodiscus sinensis),在代谢水平上具有某些程度的同源性。

[9]陈献稿,林修喜.中华鳖三群体幼鳖阶段养殖性能的比较[J].浙江农业科学,2013(2):211.

从直觉、经验走向理性是数学教育的追求。教学中,我们要从具体直觉和经验出发,对问题进行诊断、分析、抽象、综合,进而走向理性思维的问题概括,要将学生的注意力由具体知识引向知识背后的思想方法。而数学内容问题化是实现这一目标十分有效的手段或途径。

参考文献:

比如,在讲授 “胶体的性质及应用”这一章的内容时,教师可以点一根烟,学生自然就会感觉难以理解,老师为什么会在教室抽烟,注意力也会集中过来.这时,教师可以拿出准备好的激光笔,让光束通过烟雾,引导学生观察激光光线的通路.这是学生就会认识到教师所为也是教学内容的一部分,而不是违反学校规定.在这基础上,教师就可以解释这一现象,向学生讲解气溶胶丁达尔现象,让学生对这一现象的产生的原因进行探讨,激发学生探究谜底的兴趣,提高教学效果.

[2]崔文妹.中华鳖全生态养殖技术及效益分析[J].当代水产,2017(2):92.

[1]孙阳,吴勃岩,车艳新,等.鳖甲煎丸诱导肝癌细胞凋亡及对STAT信号通路的影响[J].时珍国医国药,2016,27(4):849.

[3]葛仲显,赵小合,姬翔.温棚鳖不同生长阶段肌肉和裙边营养成分比较研究[J].畜牧兽医杂志,2017,36(1):15.

[10]余开.日本鳖养殖技术[J].科学养鱼,2016(4):28

[5]TANG J,WANG A L,MIAO Y T,et al.Protein-sparing effects and LPL gene expressions of dietary lipids in the juvenile soft-shelled turtle,Pelodiscus sinensis [J].Aquaculture Research,2016,47(2):579.

怀远县大部分地区种植石榴是以家庭为单位,基本保留的是以前留下来的土地。并且种植园就在住房的旁边。这导致了怀远县的一大部分地区仍然是分散种植,没有形成规模化种植,不利于集中管理。

在60 d的养殖过程中,养殖前期松阳花鳖和日本鳖都出现些许的死亡现象,随着养殖时间的延长,鳖死亡情况很少发生,松阳花鳖和日本鳖存活率都逐渐趋于稳定(图1)。养殖第18 d,松阳花鳖和日本鳖存活率差异最大,分别为86.67%和73.33%。养殖第60 d,松阳花鳖存活率仅高于日本鳖6.66%,其存活率分别为73.33%和66.67%。

[7]何中央,张海琪,周凡,等.中华鳖“浙新花鳖”[J].中国水产,2017(3):80.

⑯E.H.Gombrich,Symbolic Images,Phaidon Press Limited.1994,pp.139-42.(中译本见范景中、杨思梁主编,贡布里希著《象征的图像》,南宁:广西美术出版社,2015年,第188-89页。)

[8]陆君,黄富友.瓯江松荫溪松阳花鳖增殖放流研究[J].渔业现代化,2007,34(2):40.

ACP和AKP广泛存在于动植物及微生物体内,参与机体的各种代谢过程,如分子渗透性、细胞分化和发育,同时也是动植物体内解毒体系的重要组成部分。研究表明植物诱导并分泌ACP是其应对低磷环境的重要适应性反应之一,而在动物饲养和疾病诊断方面,AKP是反映成骨细胞活性、骨生成状况和钙、磷代谢的重要生化指标[18-19]。本实验ACP的测定结果与SOD的测定结果较为相似,在60 d的养殖过程中,无论是松阳花鳖还是日本鳖,肝ACP和SOD活性的变化均较小。与养殖第0和20 d相比,养殖第40和60 d两个群体肝AKP活性都大幅度的提高,且养殖第60 d松阳花鳖肝AKP活性显著高于日本鳖,这与体重的测定结果相呼应。由此可看出,经选育出的日本鳖虽具有生长快的特点,但松阳花鳖作为浙江省松阳县的土著养殖品种,世代适应当地独特的地理环境,在生长速度上似乎比外来养殖品种——日本鳖更具优势。

[4]ZHOU F,DING X,HE F,et al.The dietary protein requirement ofa newJapanese strain ofjuvenile Chinese soft shell turtle,Pelodiscus sinensis [J].Aquaculture,2013,412/413(6):74.

存在问题 目前,石河子大学机械电气工程学院电气工程及其自动化专业2017级之前的学生采用2014版人才培养方案,2017级学生采用2017版培养方案,这两版人才培养方案对于运动控制系统课程的定位和开课时间基本没有变化,说明目前人才培养方案对于运动控制系统课程的培养方式并没有做出大的改动。电气工程及其自动化专业教学大纲中设定的基础课和专业基础课程大多关注课程本身的知识重点、难点和深度,较少关注各门课程之间的关联关系,因此使得每门课程之间的知识点容易出现相互脱节的现象。

[12]廖丹,杨烨,李青耘,等.测定过氧化氢酶活性的分光光度法的建立及验证[J].中国生物制品学杂志,2015,28(4):418.

[13]SHAW G,READ D J.The biology of mycorrhiza in the Ericaceae.XIV.Effects ofiron and aluminium on the activity ofacid phosphatase in the ericoid endophyte Hymenoscyphus ericae(Read)Korfand Kernan[J].NewPhytologist,2010,113(4):529.

[14]MODARESZADEH M R,DI F P,TIPTON D A,et al.Cytotoxicity and alkaline phosphatase activity evaluation of endosequence rootrepairmaterial [J].Journalof Endodontics,2012,38(8):1101.

脱水工序的配药系统(絮凝剂制备系统)常因为进口脉冲水表故障而导致系统停运,严重影响生产的正常运行。本文通过阐述进口脉冲水表的工作原理,通过技改创新,将国产水表与电磁流相结合,解决了进口远程脉冲水表的问题。

[15]陈献稿,林玲,林修喜.中华鳖5群体稚鳖阶段养殖性能比较[J].浙江农业科学,2012(5):747.

对锻炼的预备党员和发展对象,通过“城建局正式党员+市直单位预备党员+市直单位发展对象”这种“传帮带”的模式进行培养教育。在管理上,采取纪实管理办法。锻炼对象,每天撰写工作纪实,锻炼期满后,由帮带的正式党员和驿站流动党支部出具综合评定意见,反馈给所在党支部,作为预备党员转正、发展对象吸收为预备党员的重要参考依据。

[16]董亮,何永志,王远亮,等.超氧化物歧化酶的应用研究进展[J].中国农业科技导报,2013,15(5):53.

[17]于德玲,王昌留.过氧化氢酶的研究进展[J].中国组织化学与细胞化学杂志,2016,25(2):189.

[18]黄秀芳,朱义红,曹汴川,等.利福喷丁对大鼠IFN-γ、IL-12、溶菌酶及酸性磷酸酶活性的影响[J].中国抗生素杂志,2015,40(6):464.

[19]夏芳,王莉.碱性磷酸酶在慢性肾脏病中作用的研究进展[J].临床肾脏病杂志,2016,16(4):254.

 
蔡宛君,吕耀平,刘子明,陈跃军,金晶,黄思思,谢万林,朱玲媛
《丽水学院学报》 2018年第02期
《丽水学院学报》2018年第02期文献

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