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Y—STR家系排查法在侦查中应用的思考

更新时间:2009-03-28

Y—STR家系排查法是指侦查人员对收集的男性作案人作案遗留的生物检材进行有效的Y—STR分型后,利用Y染色体单倍体连锁父系遗传特性,在一定地域范围内或Y—STR数据库中排查出作案人所在家系,再利用ABO血型检验、常染色体检测、指纹鉴定等技术手段进而在该家系中精准查找出作案人的一种侦查方法。该侦查方法广泛应用于现场上遗留有男性作案人的血迹、烟头、唾液等生物物证的杀人、故意伤害、强奸、抢劫等类型案件侦破。近年来,全国有多起利用该方法成功侦破多年未破命案积案相关报道,如轰动全国的“甘肃白银高承勇系列强奸杀人案”自1988年7月至2002年2月,甘肃省白银市先后发生了多起系列强奸杀人案。因性质恶劣、后果严重、危害性大,该系列案件被公安部列为部督案件。但由于上世纪90年代西部地区没有视频监控,案发前后也无目击者,案件线索极少,该系列案件长时间未被侦破,被列为“全国十大悬案”之首。2016年6月,作案人高承勇远房堂叔高某某因涉嫌行贿被公安机关监视居住。公安机关依法对其采取血样在违法犯罪人员DNA数据库比对查询时,发现其Y-STR信息与白银市系列强奸杀人案中作案人的Y-STR信息相符,确认白银市系列强奸杀人案的作案人是高氏家族男性成员,随后对高氏家族男性成员血样进行常染色体STR检验。2016年8月26日作案人高承勇落网。至此,长达28年的“世纪悬案”得以侦破。、“浙江湖州刘永彪、汪维明抢劫杀人案”1995年11月29日,浙江省湖州市织里镇某旅馆老板闵某一家三口及旅客于某被害。随即湖州市、区两级公安机关组织力量侦查。受当时侦破条件和科技手段等因素限制,侦查工作长达22年没有实质性进展。2017年8月,公安机关通过基因技术鉴定、物证比对和走访调查,确认作案人成员之一为安徽省南陵县弋江镇刘姓家族男性成员。2017年8月11日作案人刘永彪、汪维明落网。历经22年,浙江省湖州市史上最大的未破命案积案终于被成功侦破。。这是Y—STR技术在刑事侦查破案中应用的全新尝试,也为当前公安机关及时侦破案件提供了新的工作思路。本文在Y—STR家系排查法应用理论依据分析的基础上,对其在案件侦查中应用条件、应用方法和应用时注意的问题进行了深入探讨分析。

一、Y—STR家系排查法在案件侦查中应用理论基础

(一)Y染色体特殊的自身结构

正常人类体细胞染色体数目为46条,其中44条是常染色体,2条是性染色体[1]。女性的性染色体均为X型,男性的性染色体1条为X型,另1条为Y型[2]。在46条染色体中,X染色体和Y染色体是同源染色体。其中,Y染色体为男性体细胞所特有,正常男性拥有一条Y染色体。在所有的染色体中,Y染色体是最小的一条,约含有5.9万kb的DNA。Y染色体的着丝粒位于染色体纵轴的7/8处,属近端着丝粒染色体,由长臂(Yq)和微小的短臂(Yp)两部分组成[3]。它是一个大的线性分子,约占整个基因组的2%,长度大约60Mb[4]。Y染色体分为两个遗传功能不同的区域:拟常染色区和占据其大部分的Y—特异性区[5]。其中,拟常染色区(pseudoautosomal region,PAR)位于Y染色体两端,约占Y染色体的5%。在遗传减数分裂过程中,拟常染色区可与X染色体的相应区段进行交换、重组,参与同X染色体的联会配对。其余95%Y染色体区域为Y—特异性区(male-specific region,MSY,也称“非重组区”non-recombining region,NRY),存在与性别决定有关的基因SRY(sex-determining region Y),在减数分裂过程不发生交换,极少发生重组,由父亲向下传递给儿子,从而保证性别决定的基本功能。

(二)Y染色体独特的遗传方式

第一,父系遗传。在遗传过程中,Y染色体只能由父亲稳定地传递给儿子,只遗传给男性不遗传给女性。我国姓氏也具有父系传承特点,因Y—STR基因座又被称之为“姓氏基因”。[6]第二,连锁遗传,呈单倍型。与常染色体相较,Y染色体除拟常染色区外,大部分在减数分裂时不与其他染色体发生重组、交换,所有的Y—STR基因座位于一条染色体上,不随机分布,不论它们的物理距离有多远,均是连锁遗传[7]。正常男性每个Y—STR基因座上只会显示单个基因型,图谱显示为一条扩增带。在遗传过程中,Y—STR几乎所有基因座上的基因组合在一起作为一个整体遗传给子代,因此,同一父系的所有男性个体具有相同的Y—STR单倍型。个体识别与父权鉴定相关机率计算不能参照常染色体的累计法,只能以单倍型概率计算。第三, Y—STR基因组结构的相对稳定性。除了如碱基缺失、复制滑脱等原因造成基因突变外,Y染色体的序列结构能够稳定地一代一代呈父系单倍型传递给儿子,同一家族包括祖孙、父子、兄弟叔侄和堂兄弟等男性具有同源的Y染色体。

(三)Y—STR的基因多态性

生物遗传基因在其DNA序列上存在两个或三个碱基连续多次重复的现象,简称为STR(short tandem repeats的简称,也称“简单串联重复序列、短串联重复序列或微卫星DNA”),是目前在法医物证中应用最广泛的长度多态性遗传标记,其主要特点是位点含量丰富、扩增片段短、多态性高。STR基因座的核心重复序列一般为2-6bp[8]。其中Y—STR是广泛存在于高等生物的基因组中一种Y染色体特有的分子标记,重复次数一般为15—30次,核心序列拷贝数目因人而异。早在1976年,Cooke利用Hae III限制性内切酶消化男性基因组,检测到3.4kb(DYZ1)和2.1kb(DYZ2)的Y染色体特异性串联重复序列片段,此后对Y染色体的这一特征进行了深入地研究[9]。20世纪90年代中期以后,越来越多的Y—STR多态性位点不断被发现并被利用,到目前为止,经一系列文献或报道等形式确认并命名的Y—STR位点己有228个,广泛使用的Y—STR位点有30多种[10]。在利用Y—STR检测进行同一认定时,对STR的位点进行联合分析,可以得到相当高的累积识别率和排除率。研究群体中Y染色体非重组部分DNA多态性,不仅可以追溯人类父系进化历史,在法医学个人识别,特别是性犯罪案件中的个人识别及亲子鉴定中有着非常重要作用。

二、Y—STR家系排查法在侦查中的应用条件

(一)获取男性作案人的Y—STR分型

这是Y—STR家系排查法应用的首要条件。只有获取男性作案人的Y—STR分型,才能查找确定作案人所在家系,进而通过常染色体检验等其他手段来发现作案人。获取男性作案人的Y—STR分型的途径,主要是依靠收集男性作案人遗留的生物物证,并对其进DNA提纯、扩增、测序来实现。根据物质交换和信息转移原理随着科学技术的发展,特别是电子技术和证据范围的拓展,传统的物质交换原理难以对电子证据的形成过程作出恰如其分的解释。此外,该原理也无法解释犯罪人犯罪心理痕迹形成、犯罪记忆的形成和测试技术应用等现象。于是在物质交换理论的框架内,又衍生了信息转移理论。依信息转移理论观点,信息是可以分享的的,它以复制的方式进行转移,犯罪过程中发生接触的两个物体中一方获得了对方的信息,对方不会丧失信息,而且这种信息还可能继续转移到其他客体上。信息转移原理是在信息论背景下对物质交换原理的创新发展。,作案人作案过程中会留下物证、书证等实物形式存在的物质痕迹物品和证人证言等抽象印象痕迹。在众多不同形态、性质迵异的痕迹物品中,只有与作案人人身关系密切的生物物证,如血液、精斑、唾(尿)液、烟头、人体组织等,才可以利用其进行Y—STR家系排查,因为这些生物物证中含有作案人DNA信息。在众多生物物证中,只有与男性作案人人身关系密切的生物物证才是Y—STR家系排查法应用的物质基础。如前所述,作为性染色体中的一种,Y染色体是男性所特有的。与常染色体相较,Y染色体不重组、不随机分布,具有呈单倍型、伴性、连锁父系遗传、多态信息含量高特点[11]。这些特点是Y—STR家系排查法应用的理论依据。此外,生物物证能否成功检测出DNA分型信息,还与很多其它因素有关。如收集到男性作案人作案遗留的生物物证,在收集之前因下雨等天气原因被破坏,或在收集、保管过程中遭受化学物质污染损害,就会造成DNA的降解,进行DNA检测时就不能得到有效的STR分型,从而限制Y—STR基因座的应用。

(二)有相对明确的作案人家系排查范围

这是Y—STR家系排查法应用的范围条件。作案人家系在运用Y—STR家系排查法排查的范围内,不在排查范围内则运用Y—STR家系排查法就失去了意义。首先,这种范围可以表现为有形、相对封闭的地域范围。传统上, Y—STR家系排查法被认为应在相对封闭的人员流动性小的地域使用,最好是案发地周围居民以姓氏宗族为核心聚居且人群遗传关系相对稳定的地域[12]。受传统文化和生活习性影响,我国内地特别是相对偏僻地区农村居民生活半径相对较小,习惯以姓氏宗族为核心聚居,婚姻关系也较为稳定,形成相对稳定的遗传关系。对于在这些地区发生的如杀人、强奸等刑事案件,这种相对稳定的遗传关系为公安机关利用Y—STR家系排查法在案发地域周围进行广泛排查创造有利条件。其次,这种范围还可表现为无形、相对开放的数据库。随着违法犯罪人员DNA数据库特别是Y—STR数据库的逐步建立完善,为公安机关更广泛范围更深层次排查作案人家系提供了便利条件。全国有多起利用Y—STR数据库来破获陈年积案的报道,如甘肃白银高承勇系列强奸杀人案件中,作案人高承勇的最终落网得益于日臻完善的DNA数据库,公安机关将其同姓氏的远房堂叔DNA信息在违法犯罪人员DNA数据库进行查询比对,发现其远房堂叔与其在多起案发现场遗留生物物证的Y染色体信息相符,确定作案人是高氏家族成员并成功将其抓获。再次,无论是有形的地域范围,还是无形的DNA/Y—STR数据库,家系排查范围大小应相对明确。在有形的地域范围内,家系排查范围过大,则需要大量的警力、物力,不符合侦查经济原则。在无形的数据库内,只有在范围相对准确时才能入库对比,任何无条件扩大范围比对或使用Y库来定范围都会将专案侦查工作引入误区[13]

(三)有完整、清晰的作案人家系树状图谱结构

这是Y—STR家系排查法应用的核心条件。在相对明确的作案人家系排查范围内,能否及时、精准地查找出作案人,较大程度上取决于作案人家系树状图谱结构是否清晰、完整。作案人家系树状图谱结构清晰是指起源于同一祖先的男性作案人家系中,作案人家系子代遗传关系、分(旁)支结构明了清晰。在作案人家系树状图谱结构中,家系男性成员之间生物学意义上的曾祖、祖、父、子、孙直系以及伯(叔)、兄弟、堂兄弟旁系等彼此之间血缘关系清楚,脉络清晰。作案人家系树状图谱结构完整是指起源于同一祖先的男性作案人家系中,男性成员结构完整,不存在因抱养、入赘、离婚、迁徙等原因出现家系部分男性成员缺失现象,个人年龄、家庭住址等信息齐全。在我国广大农村地区,男性社会成员家系树状图谱结构相对完整、清晰。受强烈血统传递传统文化和血统关系的家族理念影响,我国农村地区部分家族有修订族谱的传统,而族谱全面记载了家族起源、家族男性成员结构分布以家庭成员迁徙变化等内容,真实反映了家族族人之间的血缘关系,这为公安机关案发后依作案人族谱来排查作案人提供了有利条件。在浙江湖州刘永彪、汪维明抢劫杀人案中,公安机关正是利用安徽省芜湖市南陵县刘姓家族族谱成功排查出作案人刘永彪。

柑橘生产过程中存在的土壤酸化严重,瘠薄果园面积大,农户用肥量差异较大,肥料用量和配比、施肥时期和方法不合理,钙、镁、硼、锌、铁等中、微量元素缺乏现象普遍,果园水土流失严重,忽视有机肥施用,肥料利用率低等等这一系列问题,都会导致柑橘缺素的情况发生。《中国农资》从本期开始,陆续推出“柑橘缺素如何解决”系列讲堂,尽请关注。

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(四)有成熟的Y—STR检测技术

在准确筛查出作案人所在家系后,在其家系内部纵向采血或收集其他生物物证,综合运用ITO法、分析常染色体STR亲缘关系或ABO血型检验、指纹比对等手段最终查获作案人。对于在DNA/Y-STR数据库中通过比对筛查确定的作案人家系的,往往缺少作案人家系树状族谱,需要对比中对象家系进行深入实地调查,查清所在家系成年男性成员谱系分支情况。对于在划定排查家系地域范围基础上收集的检测样本确定作案人家系的,由于这些地域相对封闭、人员流动性小,案发地周围居民以姓氏宗族为核心聚居且人群遗传关系相对稳定,多有修订族谱的传统,可以依作案人家系族谱树状图谱结构,结合通过对被害人调查访问等方法模拟画像分析出来的作案人年龄、身高、体态等特征,逐一实地提取划定人员范围内的男性成员血样、毛发、烟头等生物物证或指纹,综合运用ITO法、分析常染色体STR亲缘关系或ABO血型检验、指纹比对等手段最终查获作案人。在确定的作案人家系纵向筛查查找作案人时,应不遗漏所有适龄的男性成员。需要注意的是,Y—STR家系排查法并不能实现个体识别,对作案人最终的排查和认定还应综合运用ABO血型、ITO法或者常染色STR检测等多种方法进行,Y—STR 家系排查法是上述方法使用的前提和基础。

三、Y—STR家系排查法在侦查中应用方法

(一)通过现场勘查广泛收集作案人作案遗留的各种生物物证

广泛收集作案人作案遗留的各种生物物证,为成功运用Y—STR家系排查法提供前提条件。犯罪现场是犯罪的“遗迹”,是犯罪信息的发生地和留存地[18]。刑事案件中大部分证据来源于犯罪现场。对作案人作案后的犯罪现场进行勘查,是公安机关收集犯罪证据的重要措施,当然也是收集作案人遗留生物物证的重要措施。在寻找发现、收集各种生物物证时,应注意做好以下几方面工作:首先确定收集作案人遗留的各种生物物证的重点场所。现场中心和主体现场是作案人进行犯罪活动的主要场所和地点,作案人大部分犯罪活动集中于此,大量与犯罪有关的生物物证会遗留在现场中心部位和主体现场,因此现场中心部位和和主体现场是收集作案人的生物物证的主要场所和地点。其次,应确定收集作案人遗留生物物证的重点部位。被侵害对象是作案人犯罪行为侵犯的目标,现场进出口是作案人进出现场的必经路线,这些部位是作案人遗留生物物证的重点部位,也是寻找、收集作案人生物物证的重点部位。再次,应全面收集作案人作案遗留的各种生物物证。现场外围和关联现场尽管不是作案人主要活动的场所和地点,但也是作案人活动场所和地点,也会留下与其人身关系密切的各种生物物证,特别是现场中心部位和主体现场上的生物物证因各种原因破坏严重的情况下,对现场外围部位和关联现场的各种生物物证的收集尤其必要。在上述场所和地点收集生物物证时,不仅要注意收集宏观、新鲜的生物物证,如血迹、粪便等,也要注意收集作案人遗留的各种微量、陈旧生物物证,如毛发、精斑、尿液等。最后,为保证收集的各种生物物证的质量,在现场勘查过程中,应采取各种有效措施,防止现场上的生物物证受到污染、破坏。接到报案后,应及时赶赴现场,减少因赶赴现场不及时现场发生变动的可能性。在勘查过程中,加强现场保护,防止因自然和人为因素导致现场上的各种生物物证受到破坏、变动。在寻找、发现各种生物物证后,依《刑事案件现场勘验检查规则》规定的程序与规则采用正确的方法提取、保管各种生物物证。

(二)进行Y—STR基因座多态性分析获取作案人DNA基因分型

在寻找发现作案人作案遗留的生物物证后,使用Chelex—100提取法、磁珠或硅珠法和差异裂解等方法将作案人DNA从细胞中提取出来并与细胞其他成分相分离,再采用商品化试剂盒进行复合扩增,用基因分析软件对复核扩增产物进行基因分析,检测出作案人DNA基因分型[19]。由于构成单倍型的Y—STR不能采用概率乘积方法提高分析效能,个体识别能力有限,因此,要发挥Y—STR在家系排查中的作用,重要方法是联合检测出多个Y—STR基因座获得更多STR分型。近年来,随着更多的Y—STR基因座分型被发现,但DYS19、DYS385a/b、DYS389I、DYS389II、DYS390、DYS391、DYS392、DYS393等9个核心基因座和DSY438、DSY439两个扩展单倍型基因座是Y—STR分型的核心基因座[20]。在进行联合检测时,应以这些核心基因座为主。在强奸案件中,在现场经常会收集到男/女混合(斑)物。若男性因各种原因在作案时没有遗留精子或精斑,仅有男性上皮细胞,由于女性阴道内女性上皮细胞数量明显多于男性上皮细胞数量,如果采用直接的常染色体STR检测分析法或差异裂解法,容易导致常染色体STR分型失败。但Y染色体特异的STR基因座多态性分析方法不受女性成份影响,即使是较大量的女性DNA成分也不抑制Y特异的STR等位基因的扩增,从混合斑中微量的男性DNA成分能获得完整的STR信息。由于Y染色体部分位点引物序列与X染色体具有高度相似性和同源性,采用Genome Date Bank设计的引物扩增,在对如DYS391和DYS393等YSTR基因座分型时,在X染色体上也能检出扩增产物。为此,Gusmao设计了DYS391新的引物序列,提高了Y特异性,且降低了PCR扩增产物的长度。[21]此外,由于Y—STR是单倍体,对男/男混合斑进行Y—STR技术检测,不仅可以确定男性生物检材的来源,而且也可以确证男性人数混合结果。如在多个Y—STR基因座中均检测出2条片段,则说明至少是2名以上男性的混合样品[22]

(三)在准确划定排查家系地域范围基础上依各家族分布全面收集检测样本

首先,要准确划定有形的、相对封闭的排查家系地域范围。在划定地域范围时,须结合现场访问和现场勘验的材料,如从作案人对作案时间选择、作案地点选择、作案路线选择、作案目标选择、作案人口音等条件来综合判断确定排查地域范围。排查地域范围划定要准确、范围恰当。其次,在准确划定的排查家系地域范围的基础上,根据案发地及附近居民居住情况,通过深入调查访问等途径查清该地域范围内所有家族总数及其分布,以行政村(组)、社区为单位为绘制各家系分布图,为下一步依各家系分布图采集检测样本奠定基础。在确定排查家系时,须做到全面、不遗漏,不能忽视小家系,即使某姓氏仅有一人也要列出排查。再次,依据查清的各家系分布图,一个家系按两个年龄段采集血样或收集其他生物物证。在采集样本时,根据模拟画像分析确定的作案人年龄,使被采集对象在该家系中能够与作案人形成父子或兄弟关系,尽量避免成为祖孙或更远的关系。对于人数较多的大家系,应以五代为一个单元采集检材样本。在取样时,要注意核对家谱,结合调查走访进行。家系代表依“五非”原则采样:非入赘随母姓、非随母改嫁易姓、非异姓过继、非抱养、非私生。对于随母姓、过继、收养和私生子等情况,单独列出其家系遗传图谱,加以排除或进一步肯定。对于无法确定男性人员家系,一律采集血样或收集其他生物物证送检。

(四)横向筛查比对确定作案人家系

将作案人Y—STR信息与在划定排查家系地域范围基础上收集的检测样本或DNA/Y-STR数据库内进行横向筛查,比对确定作案人家系。为了达到快速、大规模、高通量的分析生物信息目的,上世纪80年代末基因芯片检测技术应用而生。相比传统的Northern Blot杂交或点杂交方法,以及以电泳为基础的基因表达、序列测定、多态性分析等研究方法,基因芯片技术具有灵敏度和准确性高、操作快速简便、能提供大量信息量等优点[23]。根据当前的研究,无关个体可能具有相同的基因型,因此为了提高比对的有效性和准确率,无论是对划定排查家系地域范围基础上收集的检测样本,还是在DNA/Y-STR数据库内进行筛查,检测的基因座的数量不能过少。在排查中,当发现同一家系不同分支族人的Y—STR分型与现场遗留的男性作案人Y—STR分型存在1个或2个Y—STR分型不同时,就存在Y—STR家系溯源的问题;当发现3个或3个以上Y—STR分型差异时,才能排除父系遗传关系[24]。若比中不同姓氏家系太多,在排查范围中没有明显缩小时,应当增加检测的基因座数目,对比中的家系进行再次比对,排除“假比中”的家系。

(五)纵向筛查精准查找出作案人

这是Y—STR家系排查法应用的技术条件。在对收集的生物物证进行DNA基因分型测序来获取男性作案人的Y—STR分型以及和各家系成员生物样本进行比对时,都需要以成熟的Y—STR检测技术提供技术保障和支持。1984年英国莱斯特大学遗传学家Alec Jeffreys用人肌红蛋白基因中的一段33bp×4的多聚体从人的基因文库中筛选出几种小卫星DNA探针,发明了多基因RFLP探针技术,建立了DNA指纹技术,并成功运用于个人识别和亲子鉴定。其后,美国科学家Karry Mullis发明了多聚酶链反应,建立PCR技术方法[14]。PCR技术是一种快速的体外扩增特异DNA序列片段的的技术,能在短时间内复印成百上千的目标DNA序列,能从生物体的整个基因组DNA中获取足够量的特异性片段,以供DNA的进一步分析[15]。在1990年以后PCR技术便逐渐取代了限制性片段长度多态性分析技术,形成了PCR—STR分型技术,已经成为第二代法医学DNA分型技术。20世纪90年代中期以后,对Y染色体特有的STR序列及多态性进行了较深入研究,越来越多的Y—STR多态性位点不断被发现并被利用,新的检测方法也在不断地改进和创新。1996年,美国加州金山Aymetix公司的Steven、Fodor等人结合照相平印刷、计算机、激光共聚焦扫描、寡核甘酸DNA合成荧光标记探针杂交等技术,创造了世界上第一块DNA芯片,使核酸杂交技术实现集成化,可以一次性对样品大量序列进行实时、灵敏、准确的检测和分析[16]。2013年上海市公安局法医物证学现场应用技术公安部重点实验室联合无锡中德美联生物科技有限公司就Y染色体STR基因座联合检测进行了研究,并开发了Expressmarker16+18Y荧光检测试剂盒,以适合法医实际检测的需求[17]。这些日臻成熟的检测技术的为Y—STR家系排查法在案件侦破中成功应用提供了技术上支持和保障。

四、Y—STR家系排查法在侦查中应用应注意的问题

(一)Y—STR 家系排查中强制采集血样缺少刑事法律上依据

在侦查实践中,公安机关无论是在横向筛查比对确定作案人家系,还是在纵向筛查精准查找作案人时,多是通过大范围大规模强制采集血样方式来获取比对样本。这种大范围大规模强制采集血样做法在当前我国刑事法律上面临一定障碍,缺少刑事诉讼法律上依据。尽管2012年新修订的《刑事诉讼法》第一百三十条第一款规定:“为了确定被害人、犯罪嫌疑人的某些特征、伤害情况或者生理状态,可以对人身进行检查,可以提取指纹信息,采集血液、尿液等生物样本。”该规定授权公安机关有权提取生物样本,但采集样本的对象是犯罪嫌疑人和被害人,在对犯罪嫌疑人提取其指纹信息,采集血液、尿液等生物样本时,无须征得其同意,可以强制进行,而对被害人提取生物样本前须征得被害人同意。无论是在横向筛查还是纵向筛查中,大范围大规模强制取样对象既不是犯罪嫌疑人又不是刑事被害人,而是一般无犯罪嫌疑的普通民众。就其性质而言,强制采集血样无疑是一种强制性侦查措施,涉及到公民隐私、身体健康等个人权利。对于强制性侦查措施的适用,现代法治国家无一不遵循“法无授权即禁止”这一格言。因其无刑事法律上依据,大范围大规模强制采集血样这种强制性措施在学界一直广受质疑和遭受诟病。因此,在采集血样时应做好采集对象思想工作,取得其理解和支持,征得其同意基础上进行取样,不宜采取强制方法来进行。

Find five peanuts(花生),nine sunflower seeds(葵瓜子),nine pine nuts(松子),and four walnuts(核桃).They are healthy to eat.

将平均粒径18 μm碳酸钙粉末在一定温度下煅烧4 h后获得生石灰,将生石灰和石英粉按n(CaO):n(SiO2 )=11,添加剂氧氯化锆按n(ZrOCl2·8H2 O)n(CaO+SiO2)=0.05加入高压釜,并按水固比401加入水。以2 ℃/min的升温速率升温至220 ℃,搅拌转速分为三阶段:25~150 ℃采用450 r/min转速,150~220 ℃采用350 r/min转速,220 ℃保温阶段采用250 r/min转速,在220 ℃条件下保温7 h后自然冷却,将产物取出在110 ℃鼓风烘干至恒重,即可获得硬硅钙石纤维产品。

艾考夫不仅有极具创造力的精湛俎技,还出版过许多反映法国食俎文化的书籍和菜谱。法国美食的发展与法国文化的质感取向有关,对法国美食谈得特别起劲的是巴尔扎克、雨果、莫伯桑、大仲马、福楼拜和左拉,这对艾考夫的影响很深,从而激励他以聪颖、刻苦和对文化无师自通的精神,孜孜以求,塑造出自己的儒厨形象。他把平素的文化积累沉淀在俎技中,再经日常生态去反刍文化,这种温馨的循环圈令人陶醉。一位十分富有的大出版商慧眼识珠,将自己的女儿嫁给了艾考夫。可见,艾考夫的身份巳与他的岳父门当户对。

(二)Y—STR 存在突变情形

有遗传就有变异,变异是生物界普遍现象[25]。同样Y-STR在遗传过程中,受重复序列的结构、重复次数、重复基序的碱基排列和长度、重复区毗邻的不可变序列及孩子出生时父亲的年龄等因素影响,Y—STR与常染色体一样产生突变现象[26]。Y—STR的主要突变是指在DNA复制过程中,DNA聚合酶发生滑脱,从而导致重复序列中核心序列重复次数的改变。据报道,在中国汉族人群的782对父子关系中,发现41次突变,平均突变率约为 2.8×〖10〗^(-3)[27]。在利用Y—STR进行家系排查时,Y—STR的突变既可能出现在作案人自身,也可能出现在划定的地域范围内或DNA/Y—STR数据库内其他排查人员中。无论是哪种突变情形,都会造成在应用 Y—STR 分型进行家系排查时不能准确锁定作案人家系。因此,为了避免Y—STR突变对作案人家系排查造成干扰,在纵向采集生物样本时,应选择划定地域范围内各家系依年龄最长者采用“五代采样法”原则进行采样。在检测时,应选用那些已被科学验证突变率低或接近常染色体STR平均突变率的基因座,如 DYS392、DYS448、DYS643、DYS443、DYS531、DYS593和DYS596等,作为亲缘关系鉴定的首选,那些被科学验证突变率较高的基因座,如 DYS576、DYS449、DYS630、DYS713等基因突变率超过10%,不宜于用于亲缘关系鉴定。此外,德国亲子鉴定专家证人协会认为Y—STR判断标准与常染色体STR判断标准一样,即要3个以上基因座不同才能排除亲权。因此,当多个Y—STR基因型一致情况下出现1~2个差异遗传标记时,应增加该家系检测样本数量和Y—STR基因座数量以确定是否存在Y—STR突变情形。

(三)进一步提升Y-STR 检测系统识别率

随着Y—STR家系排查法的深度应用,除了国外一些大品牌公司的试剂盒外,现在国内一些生物试剂公司已经开发出18位点甚至32位点的Y—STR试剂盒,如无锡中德美联公司的DATA Y24试剂盒和Y24PLUS试剂盒,北京基点公司的27Y试剂盒等,已能基本满足公安工作的需要。但这些现有的商业化试剂盒,很多位点依然是按照欧洲人群统计选择的基因座位点,其中不少基因座的多态性在中国人群中比较低,加之基因座数量少,造成了系统整体个体识别能力低,在实际应用中有时效率不高,尤其是随着DNA/ Y—STR 数据库的逐步完善和比对样本基数的剧增,Y—STR 作为家系排查的主要比对指标,现有 Y—STR 检测系统识别率不足的缺点日益突出,影响了DNA/Y—STR数据库比对效能,出现了如作案人Y—STR 比中多个不同家系,增加了排查难度,或者由于 Y—STR 突变,造成家系排查法比对时无法确定或误判的情形。现阶段我国已有大量的关于Y-filer群体遗传学数据,但是其他基因座的单倍型数据有限,至今学术界尚无公认的更适合中国人群的基因座及试剂盒。因此,有必要在研究构建适合中国人群的 Y—STR 检测体系时,加大对我国各地区人群Y—STR位点基因频率的调查,广泛收集样本和数据,寻找出适合中国人群的个体识别能力强的Y-STR新基因座,开发适合中国人群的Y—STR检测试剂盒。

(四)大力加强我国Y—STR 数据库建设

对于人口流动频繁的大中城市发生的杀人、强奸等刑事案件,现阶段直接使用Y—STR家系排查法查找作案人往往并不能取得良好效果,原因在于我国并没有建立起完善成熟的Y-STR数据库。Y—STR数据库的完善程度直接影响了Y—STR家系排查法的使用效果。我国自2002年起开始建立违法犯罪人员DNA数据库,该数据库在案件侦查中也发挥着一定积极作用,但由于该数据库覆盖面小,仅有违法犯罪人员DNA数据,相对于全国人口而言,数据库总量不足,覆盖率低。此外,DNA数据库中只有违法犯罪人员的常染色体STR基因座,是一种传统的“点对点”的比对模式,依靠个体之间的匹配比对成功来查找作案人困难较大,造成了“点对面”的新比对模式Y—STR 应用于侦查破案没有完全发挥其优势。因此,建立和完善Y—STR 数据库势在必行。河南省郑州市公安局于2007年开始建设Y—STR数据库,是全国最早建立Y—STR数据库的公安机关,并已取得良好成效。此外,内蒙古赤峰、河南郸城等地公安机关也启动了Y—STR数据库的建设工作。为了充分发挥Y—STR家系排查法在侦查破案中的作用,应加强Y—STR数据库在全国的建设工作,树立全国“一盘棋”思想,打破地方格局,由公安部牵头,统筹规划,强化顶层设计。在总结部分公安机关成功经验的基础上,明确建库的原则、方针和内容,制订建库的国家标准,开发功能强大、准确高效的软件平台,最大程度地实现数据共享,逐步建设覆盖全国的Y—STR数据库,进而充分发挥Y—STR家系排查法在及时打击犯罪方面的功效。

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2012年以来,广东陆续已经建设了一批国家级试点绿色矿山,如大宝山矿、大顶铁矿、瑶岭钨矿、梅子窝矿等。大顶铁矿资源综合利用,使用废石筑坝,提高废石的综合利用;综合回收低品位矿,提高采矿回采率;以自动控制、集中控制取代传统分散的人工控制,改善现场作业人员的工作环境。瑶岭钨矿创新利用井下采矿的坑道水净化后用于发电,选矿尾水净化后用于选矿,最终三废达标,达到环保目的。

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系统为保证功能的完备性和使用的可靠性与便捷性,应具备战场作战对抗的基本要素仿真,并满足作战训练组织与实施的基本需求。由此设计的系统功能模块组成如图 2所示[3]。

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对此,康师傅控股执行长韦俊贤说,康师傅创立至今已有26年,跟随着中国改革开放的步伐,获得了许多人口红利和经济成长带来的发展机遇,最终有了今天覆盖中国9亿多消费者,年收益近600亿元的规模。今天的康师傅能够在方便面、即饮茶、可乐饮料等市场占有第一的市场份额,且每年销售的方便面超过120亿包,茶饮料超过100亿瓶,这都是得益于国家各项政策带来的市场持续开放、经济稳步成长,得益于中国超过10亿人的巨大市场。

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欧洲央行成立伊始便有争议,特别是近几年来欧债危机以及欧元区经济持续低迷,欧洲央行不可避免地成为众多批评者的指责的对象。一些批评者质疑欧洲央行的货币一体化,因为,欧元区各国的经济基础、主导产业和经济发展水平并不统一,而货币一体化仅仅是欧元区各国让渡了一部分主权和经济权利而形成的,并没有形成一种包含财政政策、税收体系等在内的整体经济系统作为货币支撑,是导致债务危机的主要原因之一。

山东地区气候温和,属于暖温带季风气候,四季分明,年平均降水量为600~750 mm,雨量集中。每年7—8月份葡萄果实成熟,却大量降雨,造成葡萄病害发生严重,裂果、烂果率高[5]。笔者对不同模式避雨棚搭建成本进行分析,筛选出低成本、寿命长的避雨棚搭建模式,以期为葡萄避雨栽培生产提供理论依据。

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奥林巴斯和松下都有非常完备的M4/3镜头群,同在一个系统内的两台参评相机是可以互用镜头的。不过,相比使用原厂镜头,使用第三方镜头时,机身的性能可能无法得到最完全地释放。

在国家图书馆、首都体育学院图书馆查阅传统武术、社团传承等相关书籍资料,在中国知网等多种数据库分别以“通背拳的社团传承”“传统武术社团传承”“体育社团传承”等为主题词搜索期刊文献.

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裴煜
《湖南警察学院学报》2018年第01期文献

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