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九节茶浸膏分离富集前后成分对比研究

更新时间:2016-07-05

九节茶系金粟兰科植物草珊瑚Sarcandra glabra(Thunb.)Nakai的干燥地上部分(肿节风为其全草[1]),夏、秋两季采收,除去杂质,晒干,以江西、福建的草珊瑚自然分布中心区质量较佳[2],是福建省道地优质药材品种之一,具有消炎镇痛等作用。本实验以九节茶浸膏为原料,拟研究开发外用新药—九节茶肿痛宁乳膏,利用高效液相色谱分离能力强、灵敏度高的特点,对九节茶浸膏过柱前后成分变化及含量进行了对比分析,为新药制剂研发提供科学依据。

有研究表明:中药中有效成分不是单一的某一成分或者是某一类成分,因此仅某一成分或某两成分的定量考察,不能反应出药物的整体水平。因此建立一个有效方法对九节茶浸膏分离富集有效部位前后的成分进行对比分析,以此来对分离富集后的产品做出更全面、准确评价十分重要。

1 仪器与试药

1.1 仪器 WatersE2695SeparetiongsModμLeHPLC系统[(沃特世科技(上海)有限公司)];METTLER AE240天平[(梅特勒-托利多(上海)有限公司)];BFX5-320型低速离心机(河北白洋离心机厂);SB4200DT数控超声波清洗器(上海珂淮仪器有限公司)。

由储能电池来平复不平衡功率需要投入额外成本,而电动汽车电池具有较高的电荷电量,将闲置的电动汽车电池作为储能加以利用,可以节约成本。因此,本文将闲置的纯电动汽车作为研究对象,将电动汽车接入光储电站参与调制,以提高母线的电压质量。

1.2 试药 HPD-400型大孔吸附树脂(沧州宝恩吸附材料科技有限公司);迷迭香酸对照品(中国药品生物制品检定所,批号:111871-201001);九节茶浸膏由三明华健生物工程有限公司参照《中华人民共和国药典(一部)》[1]肿节风浸膏制法工艺生产提供,批号:20100301;乙腈为色谱纯;其他试剂均为分析纯(国药集团化学试剂有限公司);液相用水为超纯水;树脂相关用水为蒸馏水。

2 方 法

2.1 供试品溶液的制备 称取九节茶浸膏30 g,加水300 mL,搅拌,超声溶解,以4 000 rpm/min离心15 min,取上清液备用。精密量取上清液1 mL,置10 mL量瓶,加30%乙醇定容至刻度。

相对于分离富集的的清膏,九节茶浸膏在0~6 min内极性较大的成分在分离富集过程中被除去,其他成分均得到保留和富集。根据后期药效学数据[3]可以看出:分离富集后的清膏仍有良好的消炎镇痛的作用,因此推测这些极性较小的成分为其消炎镇痛的主要成分。

回想刚来团场务工的那几年,团场实行的是工资制,夫妻俩人加起来工资不足百元,还要养活三个孩子。心里好似有一团火的孙改会看到团场的男人都热衷开拖拉机,不甘落后的他也不管自己是不是刚落脚,立即向连队积极申请,最终如愿以偿当起了铁牛55拖拉机手。他一边积极地学习犁地、播种技术,一边又和妻子共同承包棉花60亩。

2.2 色谱条件 色谱柱:HypersiL ODS (4.6 μm×250 mm,5 μm);柱温:30℃;检测波长:280 nm;进样量:20 μL;流速:1 mL/min;流动相:A 为乙腈(含0.1%的甲酸),B为0.1%的甲酸水溶液。梯度洗脱:0~25 min,5%~36.5%A;25~30 min,36.5%~36.5%A;30~31 min,36.5%~5%A;31~35 min,5%~5%A。

2.3 方法学考察 为了考察分析方法的可靠性,以色谱图中峰面积最大的特征峰为参比峰(S),其色谱峰的保留时间和峰面积为1,计算其它各峰的相对保留时间和相对峰面积比值。依照2.2项下的方法和条件测定,得九节茶浸膏分离富集后清膏的图谱,根据得到的峰数、峰值(积分值)、峰位(保留时间)等相关参数,共标示出 16个共有特征峰。从指纹图谱中可以看出16号峰(保留时间20.598 min)峰形好、纯度高,故选其作为参照峰,如图1。

2.3.1 精密度考察 取经树脂分离富集后的清膏供试品溶液,按2.2项下的方法,连续进样 6次,各共有峰的相对保留时间RSD均在2%之内,相对峰面积RSD均在2%之内,证明本法精密度良好。

图1 样品HPLC图谱

2.3.2 重现性考察 按2.1项下的方法,制备经树脂分离富集后的清膏供试品溶液6份,按2.2项下的方法进行测定。结果表明:各共有峰的相对保留时间RSD均在2%之内,相对峰面积RSD均在2%之内,证明本法重复性良好。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].2015版.北京:中国医药科技出版社,2015:233,1102.

3 九节茶浸膏分离富集前后图谱成分比较

取九节茶浸膏 4 批(20110706、20110707、2012 0319、20120320),按2.1项下的方法制成4份供试品,按照2.2项下的方法,取九节茶浸膏分离富集前及分离富集后4份样品分别进样。采用中国药典委员会“中药指纹图谱相似度评价系统(2004A)”软件,对九节茶浸膏分离富集前后样品的色谱峰进行整体相似性评价。通过中药指纹图谱相似度软件得出4份九节茶浸膏分离富集后色谱峰与九节茶浸膏的的相似度为分别为 0.830、0.868、0.866、0.872,九节茶浸膏与共有模式的相似度为0.942,分离富集后的4份样品与共有模式的相似度分别为0.963、0.982、0.981、0.975。

九节茶浸膏以九节茶为原料,九节茶原药材因地域、气候及采收时间等因素的影响,实际使用时不能保证药材质量的稳定。同样经分离富集得到的中间体,每个批次在成分含量、成分组成及各成分比例方面都不能保持完全的一致。因此通过该成分研究,可以对九节茶浸膏分离富集后产物的成分进行监控。通过控制中间体的稳定性,从而保证成品在成分含量、组成比例上一致,减少批间差异。

图2 九节茶浸膏分离富集前后色谱图

4 讨论

如图2所示:通过上述相似度评价软件分析,经分离富集后的清膏各成分基本一致,表明分离富集的方法重复性良好;同时与九节茶浸膏比较,成分也较为相近,化学成分基本相同。相对于分离富集的的清膏,九节茶浸膏在0~6 min内极性较大的成分在分离富集过程中被除去,其他成分均得到保留和富集。

取上述九节茶浸膏上清液适量,经HPD-400型大孔吸附树脂进行分离富集,上样体积与树脂体积比为4∶1,水洗1BV,再用70%乙醇洗脱体积3BV,收集该部位洗脱液;将洗脱液浓缩至密度约为1.07 g/mL的清膏,精密量取该清膏2 mL,置100 mL量瓶,加30%乙醇定容至刻度。

第三,农村集体内部的代理问题更加突出。以村集体有限公司为例,即存在多重代理叠加现象:村委会代表农村集体行使集体所有权,村委会作为集体股的股东代理集体行使股权,村委会作为控制股东对农民股东的代理,村委会成员及集体财产的管理者对全体股东的代理,显名集体成员对隐名集体成员的股权代理等[11]。在股权结构多元化的集体公司中,其代理链条更加复杂。

《中药辞海》记载:“肿节风浸膏有消肿散结,清热解毒之功效”,现代广泛用于消炎止痛药、润喉含片、血热紫斑紫癜药,如清热消炎宁胶囊(片剂)、肿节风注射液、血康口服液、肿节风片、复方草珊瑚含片、新癀片、万通炎康片、消炎灵片、三蛇胆川贝液、抗癌平丸和跌打伤科酒等[4-8],此外,在保健品领域也有涉及,如草珊瑚牙膏[9]。本课题所涉及的拟研发新药“九节茶肿痛宁乳膏”,方中九节茶味辛、苦,功专清热解毒,活血散瘀通络,为君药;配以冰片清热消肿止痛[10-11],又能促透皮吸收[12-13]。 二药合用,共奏“活血化瘀、消肿止痛”之功,可用于治疗关节扭伤、肌肉拉伤、韧带损伤等急性软组织损伤。由此可见,九节茶的开发前景巨大,以期此实验研究对其相关中药制剂提供数据支持。

[3] 欧余航,李杰,陈强.九节茶肿痛宁乳膏镇痛抗炎及皮肤刺激性和过敏性研究[J].中国医院药学杂志,2013,33(14):1118-1121.

2.3.3 稳定性考察 按2.1项下的方法,新制经树脂分离富集后的清膏供试品溶液1份,按2.2项下的方法分别于 0、2、4、8、12、24 h 进行测定。 结果表明:各共有峰的相对保留时间RSD均在2%之内,相对峰面积RSD均在2%之内,供试品溶液在24 h内稳定,证明本法稳定性良好。

[6] 徐卫国.血康口服液的临床应用[J].中国药业,2005,14(4):79-80.

参考文献:

RSM是通过简化实验数量和建立合理模型进行操作实验的一种方法[9-11].本实验选择引发剂用量、乳化剂用量和电流大小三个因素作为RSM的研究变量,分别以分子量和分子量分布作为响应值,取值范围如表1所示.

[4] 杨权生,杨光钦.清热消炎宁胶囊治疗急性咽炎152例[J].中国中医药信息杂志,2003,10(2):4.

[5] 蒋伟哲,孔晓龙,黄仁彬,等.肿节风片的抗菌和抗炎作用研究[J].广西中医学院学报,2000,17(1):50-52.

假设某小组提出了“紫杉醇的提取方法有哪些,各有什么优缺点?”这一问题。接下来该小组就需要对该问题进行分析、界定,并提出更为具体化的问题。例如,紫杉醇是什么?什么叫提取?常见的提取方法有哪些?迄今为止,紫杉醇的提取方法有哪些?不同的提取方法各有哪些优缺点?该选取哪些检索词?该使用何种搜索引擎和数据库?问题细化之后,小组工作目标也就明确了。在此过程中,教师可以教学生使用思维导图等工具去思考和分析问题。

[2] 闵芳,斯金平,黄文华,等.不同种源肿节分反丁烯二酸和异嗪皮啶含量研究[J].中国中药杂志,2008,33(15):21-23.

[7] 杨勇.肿节风注射液治疗急性上呼吸道感染的临床研究[J].实用心脑肺血管病杂志,2011,19(12):2139.

[8] 王钢力,陈道峰,林瑞超.肿节风的化学成分及其制剂质量控制研究进展[J].中草药,2003,34(8):12-14.

加热对于农药的影响可能比数字显示的更加复杂。比如说,有些农药在高温下会分解,而分解的产物有些无毒,有些却可能更具毒性。所以,在不清楚农药特性的前提下,通过烹饪前处理来去除果蔬上的农药残留,无疑是更好的方案。

基于以上结论,得到以下几点政策建议:一,加大对农民培训力度,提高农户文化水平及技术素质,适应市场变化,促进土地流转。二,政策在宣传推进过程中要尊重农民,保障农民的各项权益。三,大力发展第二三产业,增强其吸收农村剩余劳动力能力,鼓励农民创业或进城务工,提高农民收入。

[9] 潘慧敏,姜保平,肖伟,等.九节茶的研究进展[J].中国现代中药,2013,15(7):614-619.

[10]夏忠玉,何庆,李诚秀,等.天然冰片胶囊的药效学实验分析[J].贵州医药,2006,30(4):361-362.

二是要尽快解决县镇学校大班额问题。据统计,目前贫困地区小学、初中的大班额分别占13.9%和37.1%。各地要严格按照已备案的农村义务教育学校布局专项规划,科学调整学校布局,合理配置教育资源,避免因撤并过快导致学生向县镇过度集中。要疏堵结合,一方面对大班额现象严重的学校,要限制招生人数;另一方面要采取新建、扩建、改建以及学校联盟等措施,挖掘学校潜力,扩大优质教育资源,合理分流学生。

[11]候桂芝,廖仁德,孟如松,等.冰片对激光烧伤创面的镇痛及抗炎作用[J].中国药学杂志,1995,30(9):532-534.

[12]许碧莲,王晖,许卫铭,等.冰片对盐酸川芎嗪促透作用的比较[J].中成药,2001,23(12):864-867.

[13]宇克莉,孙建华.几种透皮吸收促进剂的作用机理探讨[J].山东医药,2007,47(11):30-31.

欧余航,吴文杰
《福建中医药》 2018年第02期
《福建中医药》2018年第02期文献

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