砷是一种有毒并致癌的元素，广泛存在于环境、食品中，其中水产品中砷含量较高，也是人体摄入的主要来源[1]。砷主要以毒性大的无机砷如砷酸盐As(Ⅴ)、亚砷酸盐As(Ⅲ)，毒性较小的MMA、DMA，以及通常认为无毒的AsB、AsC和砷糖[2,3]等多种形式存在。由于砷的生物毒性很大程度上取决于其化学形态，因此砷形态分析比总砷的分析更为重要[4]。并且，砷及其化合物已经被国际致癌机构(IARC)确认为致癌物质，其中三价砷毒性远大于五价砷，因此多个国家和地区都对其进行了严格监管，而对砷的卫生学评价均以无机砷为依据[5-7]。中国国家标准GB2762-2012《食品中污染物限量》[8]中规定水产动物及其制品(鱼类及其制品除外)无机砷含量低于0.5 mg/kg，鱼类及其制品不超过0.1 mg/kg。因此，建立适用于检测水产动物及其制品中的无机砷含量的方法非常必要。

目前，国内外对无机砷形态的测定方法主要集中在液相色谱LC分离与不同的检测器联用的方法上。例如与LC-HG-AFS[9-12]、LC-AAS[13]、LC-ICP-MS[14-17]等检测器联用，但是液相色谱与原子吸收光谱法联用检测灵敏度不高，而液相色谱-电感耦合等离子体质谱法操作复杂，价格昂贵。因此，本文采用了液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱法对市售水产动物及其制品中的砷形态进行了测定，该方法具有良好的分离和检测能力，具有操作简便、精密度好、灵敏度和回收率高、线性范围宽，并且仪器设备运行成本低等特点，可以得到普遍应用和推广，为制订更多的行业标准提供参考[9，18]。

在育龄期死亡妇女死亡原因中，肿瘤疾病占有率最高，达57.76%，意外伤害其次，达23.76%。详见表2。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

仪器：液相色谱-原子荧光光谱联用仪(LC-AFS)，由液相色谱仪(包括液相色谱泵和手动进样阀)与原子荧光光谱仪(AFS-933)组成；SA-20形态分析预处理器(北京吉天仪器有限公司)；砷空心阴极灯(北京有色金属研究总院，HAF-2)；Milli-Q Element超纯水系统(美国，Milli-Q系统)；KQ5200DE型超声清洗仪(中国)；EPPENDPRF～5810R型超高速冷冻型离心机(德国)；酸度计(上海雷磁，PHS-3C)；分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司，精度0.001)。

试剂：亚砷酸根As(Ⅲ)、砷酸根As(Ⅴ)、一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)标准溶液，均从国家标准物质中心购买；磷酸二氢铵(分析纯)、氢氧化钠(优级纯)、硼氢化钾(优级纯)、盐酸(优级纯)、氨水(分析纯)，以及50 mL聚四氟乙烯塑料管、15 mL离心管、0.45μm滤膜、C18净化小柱；去离子水均由美国Milli-Q超纯水系统制备；氩气，纯度≥99.99%。

说明：实验所用容器使用前均用25%HNO3溶液浸泡过夜。

1.2 仪器条件

[5] 赵性朋.辣椒无国界[J].食品与生活,2007(3):37-38.

色谱柱：Hamilton PRP-X100型，250×4.1 mm，10 μm；保护柱：PRP-X100型，20×2.0 mm，10 μm，流动相为20 mmol/L磷酸二氢铵溶液(氨水调节pH=6.0)，等度洗脱。泵流速1.0 mL/min，进样量100 μL。

1.2.2 原子荧光检测条件

负高压285 V，砷灯总电流70 mA，辅助电流35 mA，载气流量300 mL/min。

屏蔽气流量500 mL/min；载流：7%HCl溶液；还原剂为2.0%硼氢化钾(溶于0.5%的氢氧化钠溶液)，需当日配制。

1.3 样品前处理

取1.0 g样品(精确至0.001g)，置于50 mL塑料离心管中，加入0.15 mol/L硝酸20 mL，放置过夜。于90℃恒温箱中热浸2.5 h，每隔0.5 h振摇一次。提取完毕，取出冷却至室温，8000 r/min离心15 min。取5 mL上清液置于离心管中，加入10 mL正己烷，振摇2 min后，再8000 r/min离心15 min，弃去上层正己烷，取下层清液，经0.45 μm有机滤膜过滤及C18小柱净化后上机测定。按照同一方法做空白试验。

1.4 标准溶液配制

三价砷As(Ⅲ)、五价砷As(Ⅴ)、一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)标准溶液储备液，精密分别称取四种砷形态的标准品，用超纯水制备成浓度为10 μg/mL(以As计)的标准溶液，避光保存在4℃冰箱中。

混合标准溶液：分别取适量As(Ⅲ)、As(Ⅴ)、MMA、DMA四种砷标准储备液，用超纯水逐级稀释成浓度为不同梯度的砷多形态混合标准系列溶液，浓度分别为0、10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL、80 ng/mL、100 ng/mL，现用现配。

2 结果与分析

2.1 色谱条件的优化

2.1.1 流动相pH值的选择

目前砷形态分离多采用离子交换机理，不同形态的砷之所以能够被离子交换分离的主要原因在于多数砷的化合物在选定的分离条件下多以离子型化合物形式存在[14]。考虑到水产动物及其制品中可能同时存在无机砷和有机砷等多种形态，本文同时考察了DMA、MMA、As(Ⅲ)、As(Ⅴ)等四种常见的砷形态的分离及测定。流动相的pH值对上述砷形态的出峰效果影响比较大，配制相同浓度20 mmol/L不同pH的磷酸二氢铵溶液进样测定，当pH值为6.0时四种砷形态的分离效果如图1(a)，可以很好地进行分离；当pH值为8.02时，As(Ⅴ)不能正常地出峰，其余三种砷形态也未能完全基线分离如图1(b)，从而准确定量，因此经过比较选择pH=6.0的流动相。

  

(a)

  

(b)图1 流动相pH值对四种砷形态保留时间的影响

2.1.2 流速的优化

将流速分别设置为0.2 mL/min、0.4 mL/min、0.5 mL/min、0.8 mL/min、1.0 mL/min、1.2 mL/min，若流速太小，则出峰时间较长，不利于检测；流速过大时柱压较高，不利于维持色谱柱的寿命，因此实验设置1.0 mL/min进行分析测定。

以上文章并非写出履历的事实，而是从“追求真理”的角度整理自己的思想问题。而从书名可知，为使佛教相关人士注意，此文章包含偏差及强调。叙述自诞生至开始修习洋学的前半部分相当于长冈时期的事，后半部分则相当于东京大学时期的事。

2.2 氢化物生成条件的优化

2.2.1 硼氢化钾(KHB4)浓度的选择

硼氢化钾作为氢化物生成的还原剂，对氢化物的生成具有重要作用。浓度过小时不能将砷还原彻底，浓度过高时荧光强度会由于气流过大导致荧光强度有所下降，实验配制了2%～35%范围内的浓度进行检测，结果如图2。KHB4浓度为20%时，荧光强度较强，仪器稳定性与灵敏度均有所提升。

2.2.2 载流(盐酸)浓度的选择

[2] 王婧,党献民,潘静,等.液相色谱-原子荧光光谱法测定大米中无机砷形[J].粮食与饲料工业,2017(2):61-64.

  

图2 硼氢化钾对荧光强度的影响

2.3 砷形态分离图谱

按照前面所设置的仪器条件对四种形态的砷混合标准溶液(100 ng/mL)进行分离检测，分离效果如图4。可以看出，四种砷形态在16 min内完全分离，并且分离效果十分理想，As(Ⅲ)、DMA、MMA、As(Ⅴ)的保留时间分别为2.79min、4.24min、6.23min和15.68min。

  

图3 盐酸浓度对荧光值的影响

  

图4 四种形态砷的分离图谱(100 ng/mL)

2.4 标准图谱与线性方程

试验配制的标准曲线浓度分别为0、10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml、80ng/ml、100ng/mL，吸取标准系列溶液100 μL注入液相色谱-原子荧光光谱联用仪进行分析，以保留时间定性。以标准系列溶液中目标化合物的浓度为横坐标，色谱面积为纵坐标绘制标准曲线，标准曲线、检出限和定量限见表1，外标校正图谱如图5。

 

表1 4种形态砷的标准曲线

  

砷形态线性范围(ng/mL)回归方程相关系数检出限(ng/mL)定量限(ng/mL)As(Ⅲ)0～100Y=5104．0X-8313．10．99960．0900．300MMA0～100Y=4672．7X-8195．80．99950．1770．590DMA0～100Y=3512．3X-86196．10．99900．1640．547As(Ⅴ)0～100Y=3288．5X-5962．60．99950．5251．750

注：线性方程中X表示标准溶液的质量浓度，ng/mL。检出限按3倍信噪比计算，定量限按10倍信噪比计算。

2.5 精密度试验结果

由于在实际产品中不容易找到同时存在4种砷形态化合物的样品，所以本实验是对砷的混合标准溶液(100 ng/mL)用LC-AFS平行测定7次，以峰面积来计算相对标准偏差(RSD)，由表2可知，4种砷形态都具有良好的稳定性，其RSD均小于5%。精密度实验图如图6，结果显示，在所选取的试验条件下进样重复性较好。

第二天晚上，好友如约而来，女人也做好了拌面，并加了几道精致的小菜，还开了一瓶红酒。两人喝得兴起时，女人跟好友说不是白情你吃饭啊，你得帮我办件事。好友放下筷子拿纸巾擦着嘴角说，真是应了那句话了，天下没有白吃的宴席，既然吃了喝了就还真得答应你，谁让吃人家嘴短呢？

2.6 加标回收实验

参考文献:

  

图5 外标校正图谱

 

表2 方法精密度结果(n=7)

 

单位：mv

  

砷形态As(Ⅲ)MMADMAAs(Ⅴ)1519235．8299363．8260213．4117289．12536432．8304242．4260978．1118147．73540009．5308617．9263463．6119084．64544706．0312046．4264515．3120717．05548874．1320391．9264711．5124738．96556369．5324522．4269477．3127060．77562069．3325761．4273974．9128686．9平均值543956．7143313563．7429265333．4429122246．4143标准偏差14084．2613810253．35914857．685784556．685374RSD(%)2．63．31．83．7

  

图6 精密度实验图

2.7 标准物质检测

用本文建立的方法对标准物质(金枪鱼肉组织BCR627)进行检测以验证方法的准确性，实验结果如表4，标准物质图谱如图7。结果表明，测定值在标准值范围内，与标准值吻合，进一步验证了本方法的可靠性。

2.8 实际样品测定

实验采用高效液相色谱-氢化物发生原子荧光联用技术 (HPLC-HG-AFS)对水产动物及其制品中砷形态的检测进行了研究。实验通过优化色谱条件和原子荧光工作条件，建立了 HPLC-HG-AFS联用技术检测水产动物及其制品中无机砷含量的方法。样品经过酸提取再通过阴离子色谱柱分离后，目标化合物在酸性条件下与硼氢化钾发生反应，生成的砷化氢进入原子化器，由原子荧光分光光度计测定，按样品加标的保留时间定性，外标法定量。通过加标回收实验和精密度实验等对该方法进行验证，确认该方法有效、准确，适用于检测水产动物及其制品中的无机砷含量。

[7] 张琳琳,汤璐,刘芳芳,等.HPLC-ICP-MS联用技术测定深圳市售果汁中无机砷含量[J].农产品加工,2015(10):50-51，54.

 

表3 样品中4种砷形态的加标回收率

  

样品基质砷形态本底值(ng/mL)加标量(ng/mL)测定值(ng/mL)回收率(%)虾As(Ⅲ)N．D54．0380．62522．489．68066．783．4MMAN．D54．5691．32523．192．48073．291．5DMA0．10854．6490．62524．095．78074．693．2As(Ⅴ)N．D54．0681．32521．786．88070．788．4鱿鱼丝As(Ⅲ)N．D54．2685．12522．288．88065．581．9MMAN．D54．1482．72524．899．48072．490．6DMA0．47054．7284．92525．499．78072．189．6As(Ⅴ)N．D54．2184．22523．9595．88070．187．6

 

表4 标准物质BCR627检测结果 单位：mg/kg

  

标准物质As(Ⅲ)MMADMAAs(Ⅴ)标准值无无0．15±0．02无测定值N．DN．D0．150N．DN．DN．D0．149N．D

  

图7 标准物质BCR627色谱图

 

表5 水产及其制品检测结果

 

单位：mg/kg

  

样品名称砷形态As(Ⅲ)MMADMAAs(Ⅴ)虾红0．0054N．D0．25N．D海苔0．063N．D0．23N．D芝士鱼肠0．0073N．D0．014N．D墨鱼红0．0112N．D0．019N．D鱼肉肠0．0024N．D0．080N．D秋刀鱼0．069N．D0．051N．D鲳鱼0．043N．D0．043N．D紫菜0．0150．0120．036N．D

注：表中所填写数值为测量平均值。

3 结论

用该方法对市场上出售的部分水产动物及其制品中砷形态含量进行检测，结果见表5。结果表明，大部分市场上所售水产动物及其制品的砷形态为有机砷，无机砷含量较低，均可以满足国家标准。

选取市售活水产及其制品虾、鱿鱼丝两种样品为基质，分别向其中添加三种不同浓度梯度(分别为5 ng/mL、25 ng/mL、80 ng/mL)的4种砷混合标准溶液，用LC-AFS进行测定，结果见表3。由表3可知，四种砷形态的在不同水平的加标回收率分别为80.6%～88.8%、82.7%～99.4%、84.9%～99.7%、81.3%～95.8%不同范围内均满足要求。

这样教语文，也许几节课，几十节课都无法看到孩子的语文能力有所提升，（我一向认为上一节语文课就希望能看见孩子的语文能力有较大提升，就好比让孩子吃一顿饭就希望能看见他长高一样不切实际。）但是一年、两年、三年……

[1] 李智明.HPLC-ICP-MS测定水产品中五种砷形态[J].科技创新与应用,2016(30):43-44.

这是因为单体浓度过高时，聚合过程中释放大量的热导致引发剂分解产生过量的自由基，合成共聚物分子量变小，缓凝性能下降。

3）国家文物局官网htt p://www.sach.gov.cn/col/col 1660/index.ht ml；

分别配置1%～10%的盐酸浓度进行试验选择，结果如图3可知盐酸浓度为7%时，荧光强度较高，仪器响应较好。

[3] 净锦飞,徐焰,骆文静,等.亚慢性砷暴露对大鼠肾脏功能和形态的影响[J].实用预防医学,2011,18(2):198-198.

[4] 林立,陈光,陈玉红.液相色谱-电感耦合等离子体质谱法联用测定动物性海产品中的无机砷[J].环境化学,2009(1):149-152.

1.2.1 色谱条件

[6] 吴谋成.食品分析与感官评定[M].北京:中国农业出版社,2002:93-94.

灯谜摊主赶忙把紫丁儿搂在怀里，解释道：“紫丁儿别怕，这些都是没有通过喵星飞鼠大使验收的机器人，被我们秘密存放在这个洞穴里了。所有洞穴里的壁画、机关都出自他们之手呢！”灯谜摊主一副很自豪的样子。

[8] GB2762-2012.食品安全国家标准食品中污染物限量[S].

[9] 尚德荣,宁劲松,赵艳芳,等.高效液相色谱氢化物发生原子荧光(HPLC-HG-AFS)联用技术检测海藻食品中无机砷[J].水产学报,2010(1):132-138.

这池塘不是她家的，里面有没有麦麸，关她什么事！青蛙叫不叫，关她什么事！这深更半夜的，她一个人在池塘里捞麦麸，简直是疯子！

[10] 曹峰.微波辅助萃取-原子荧光光谱法测定虾酱中的无机砷[J].中国调味品,2016(1):128-131.

激励教育的应用符合新时期的课程改革要求，符合小学生的成长规律，让学生能够主动学习，激发了学生的学习兴趣，引导学生走向光明的未来。

[11] 胡容,张颖,徐全金,等.液相色谱-原子荧光联用法测定大米中无机砷含量[J].贵州科学,2017(1):87-89.

总之，“风俗”这一中国古代概念从其时空、人、地物的整体性出发，理解特定环境内群体的身体性、共享性与物质性，它与实践理论的取向相近似。但“风俗”不是“惯习”，它既是正式制度与日常生活的结合，也强调主体反思、社会规则与情感欲望，可以有力地推动和挑战实践理论的现有框架，这正是本文在最后一部分提出从“民俗研究”转入“风俗研究”的根本原因。

人文主义精神是一种普遍的人类自我关怀，表现为对人的尊严、价值、命运的维护、追求和关切[4]。受市场经济等因素影响，我国医疗卫生事业中部分医务人员道德素质下降，医患关系日益紧张，对医学生自身发展和病人健康造成冲击，医学的人性光芒日趋黯淡，医学的人文主义精神衰落，同样也对整个社会的伦理道德产生严重冲击。为此，加强医学生人文主义教育成为高等医学院校思想政治教育的主要任务，具体内容及实施路径见图1。

[12] 马晓凤.微波萃取LC-AFS法研究海产品中不同形态砷[J].现代食品,2017(2):77-79.

[13] 张华,王英锋,施燕支,等.高效液相色谱及联用技术在砷形态分析中的应用[J].光谱学与光谱分析,2007,27(2):386-390.

[14] 林立,陈光,陈玉红.液相色谱-电感耦合等离子体质谱法联用测定白酒中的无机砷[J].环境化学,2008(6):853-855.

结合《刑事诉讼法》第八十条的规定，公安机关对于现行犯或者重大嫌疑分子，如果被害人或者在场亲眼看见的人指认犯罪的，可以先行拘留；《公安机关适用继续盘问规定》第八条规定被害人、证人控告或者指认其有犯罪行为的可以适用继续盘问；结合二者规定相比之下，这两种情形极为相似。对于刑事诉讼法所规定的情形是指既可以先行拘留也可以适用继续盘问，并非不得适用继续盘问；而对于继续盘问规定所规定的情形，是指对于被害人、证人控告或者指认的相对人，人民警察当场盘问、检查后，符合适用规定的可以对其适用继续盘问。

[15] 刘锋,石志芳,姜霞,等.HPLC-ICP-MS法分析太湖沉积物中砷的形态及分布特征[J].质谱学报,2011,32(3):170-175.

[16] 岛津LC-ICPMS分析白米.糙米中的砷元素形态[J].质谱学报,2017(1):145.

[17] 史潜玉,刘立,倪志尧,等.高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定大米中无机砷[J].食品安全质量检测学报,2017(2):569-573.

[18] 陈财珍.海藻中无机砷检测方法的研究进展[J].福建水产,2007(3):62-64.