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高良姜-陈皮组方不同配伍比例对胃寒证模型大鼠的影响

更新时间:2009-03-28

现代人常有进食冰凉食品的习惯,阴寒之品入胃,寒邪凝滞,长期以往则发为胃寒证[1]。高良姜是“十大广药”之一,也是药食两用的药材,《本草汇言》将高良姜称为“祛寒湿、温脾胃”的要药,具有温胃散寒、消食止痛的功效[2]。临床中高良姜与陈皮经常配伍应用,陈皮长于理气健脾、燥湿化痰,为脾胃病和外感病的常用药物[3],二者配伍具有温中镇痛、行气健脾、燥湿化痰之功效。《太平圣惠方》中记载的高良姜粥方,高良姜、粳米、陈橘皮,可治遇风寒及吃生冷导致的心腹疼痛。二者在民间也常配伍用作食疗粥方。本实验通过考察不同配伍比例的高良姜-陈皮组方对胃寒证模型大鼠的影响,确定了高良姜-陈皮组方的最佳配比。

1 材料

1.1 动物

SPF级Wistar大鼠80只,雌雄各半,体质量180~220 g,购自广州中医药大学实验动物中心。动物生产许可证号SCXK(粤)2013-0031。

1.2 试药

高良姜、陈皮购自广州清平东药材市场,经广东药科大学潘利明副教授鉴定为姜科植物高良姜(Alpinia officinarum Hance)的干燥根茎及芸香科植物橘(Citrus reticulata Blanco)的干燥成熟果皮,所购药材均符合2015年版《中国药典》标准。高良姜与陈皮按比例1∶5、1∶3、1∶1、3∶1、5∶1提取,醇水双提滤液浓缩至含生药0.1 g/mL,将所得挥发油做包合物与浓缩液混合。理中丸(佛山冯了性药业有限公司,生产批号:Z44023078)。

她丈夫从小跟着父亲在这店铺里学手艺,学成后就接手这店铺,一直做到现在。“早些年村里人多,一天到晚忙不过来,喝口茶的工夫也没有,现在村里人少了,一天挣不了几个钱。”

1.3 试剂与仪器

NaOH(分析纯,天津市致远化学试剂有限公司),NaCl(分析纯,天津市百世化工有限公司),白细胞介素2(IL-2)ELISA检测试剂盒(杭州联科生物技术有限公司;酶标仪(基因有限公司ELx808型)。

2 方法

2.1 动物分组

另一方面,有了好的品质,广告宣传和营销渠道都做好了,是不是就一定没问题呢?最近发生在浙江湖州的一件事给了人们新的思考。不久前,湖州近郊一位居民做红烧肉时,误将一瓶百草枯当做调料,致三人中毒送医,险些酿出人命悲剧。追溯分析这个看似不可能发生的事故的细节,我们会发现,产品包装有时会成为决定性影响因素:从报道资料中看,被误食的百草枯在包装上的确有很多“致命”缺陷。一是瓶子外形、大小与普通常见饮料、调料瓶十分接近,二是瓶子外包装设计,采用火焰等时尚元素,让人很难将农药与饮料、调料一目了然地区别开来。正是这些关键因素,导致误食事件发生。

取大鼠80只,雌雄各半,按体质量随机分成8组,即空白组、模型组包括1∶5组、1∶3组、1∶1组、3∶1组、5∶1组、模型对照组、理中丸组。

2.2 造模与给药

采用SPSS 19. 0统计软件进行统计学处理。数据以表示,组间比较用单因素方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。

2.3 组织病理学检查及IL-2浓度测定

胃寒证在中医上是指脾胃阳气不足,或过食生冷,或寒邪直中所致阴寒凝滞胃腑的病症,寒邪在胃,胃阳被困,故胃脘冷痛。寒则邪更盛,温则寒气散,故遇寒痛增而得温则减,治宜温中散寒。方中高良姜辛热,温胃散寒,消食止痛,既能暖胃降气止呕,又能健脾化湿止泻[2];陈皮辛温,入脾胃二经,既助高良姜温胃散寒,又能健脾止呕、调中和胃[7],还具有燥湿、矫味的功效,二者同用,功能温胃健脾,燥湿止痛。

2.4 统计学分析

模型组大鼠每日2次10 ℃水浴20 min,浴后按大鼠体质量给予0 ℃冰水1 mL/100 g,连续4 d后,冰水换为冰0.3 mol/L NaOH,继续灌胃3 d,正常组按大鼠体质量给予生理盐水7 d,每天2次,每次1 mL/100 g [1,4]。7 d后,1∶5组、1∶3组、1∶1组、3∶1组、5∶1组按体质量给予相应比例的药液3 d,理中丸组按体质量给予理中丸药液0.16 mL/100 g 3 d,空白组、模型组按大鼠体质量给予生理盐水1 mL/100 g,期间记录每日的体质量、摄食量、饮水量、粪便量。

模型组大鼠造模3 d后大便稀溏、 沾染肛门,气味酸臭,3 d后大便部分成形呈黄色湿润状态,质地较软,正常组大鼠粪便呈黑色干硬状态;大鼠在灌胃后体质量与饮食量、饮水量在3 d后皆有下降,2 d后体质量较空白组缓慢增长,模型组摄食量、饮水量均下降。所有模型组出现舌色、爪趾、耳廓颜色变淡等胃寒特征。

3 结果

3.1 造模期间各组大鼠体征变化

笔者受唐先生观点的启发,草成此文,试图进一步揭示东晋南朝时期,敦煌与岭南之间以僧人为主体的密切联系,以及岭南在佛教东渐中所扮演的重要角色。

3.2 给药后各组大鼠的体征变化

结果见表1。药后不同配伍组与理中丸组的摄食量与饮水量皆有升高,与模型组对比,1∶5组、1∶1组、3∶1组的饮水量差异均具统计学意义(P<0.05,P<0.01);1∶5组、1∶1组、3∶1组摄食量与模型组比较差异均具统计学意义(P<0.05)。停止造模后,统计各组粪便量差异无统计学意义(P>0.05)。

3.3 各组大鼠胃组织中IL-2的含量与胃组织病理改变的分级评分结果

结果见表2。给药组IL-2的含量都较模型组低,且差异均有统计学意义(P<0.01)。与空白组、1∶1组相比,模型组大鼠胃黏膜有炎症细胞浸润,见图1。从病理改变评分结果可以看出,1∶3组、1∶1组、3∶1组差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。

3 讨论

第4天后禁食不禁水,末次给药1 h后各组随机抽取8只大鼠,麻醉后处死取胃,将部分胃体浸泡于10%甲醛溶液,24 h后常规石蜡包埋切片HE染色后进行组织学检查,其余胃体进行匀浆后离心,用于酶联免疫吸附试验,测定各组大鼠胃黏膜 IL-2 含量并进行比较,操作按照试剂盒说明书进行。光镜下观察黏膜水肿、坏死及炎症反应程度,评分参考相关文献[5-6],即炎症细胞浸润的程度,单核细胞在黏膜下层浸润的程度(0~3)。在每一项参数中,0为无,1为轻度,2为中度,3为重度。

 

1 给药后各组大鼠的体征变化比较

 

Table 1 Changes of physical signs in rats after different proportions of Alpinia officinarum Hance and dried tangerine peel treatment

  

组别饮水量/mL摄食量/g粪便量/粒空白组32.75±5.32∗∗22.76±2.76∗42.22±7.231∶5组29.44±3.61∗20.19±1.21∗29.50±3.691∶3组29.22±0.7920.35±2.04∗35.56±3.461∶1组28.25±0.35∗∗21.57±0.73∗38.75±4.993∶1组26.09±3.08∗21.84±1.8345.33±14.385∶1组26.94±2.9018.61±2.1733.64±5.93模型组27.72±3.6914.80±3.3433.97±1.22理中丸组30.63±3.95∗21.27±2.33∗39.56±4.30

与模型组比较:*P<0.05;**P<0.01。

 

2 各组大鼠胃组织中IL-2的含量与胃组织病理改变的分级评分比较

 

Table 2 Content of gastric tissue IL-2 and grading score of gastric tissue pathology in rats

  

组别w(IL⁃2)/(ng·g-1)病理改变评分空白组38.33±7.05∗∗2.38±0.70∗∗1∶5组54.18±8.33∗∗4.00±0.711∶3组54.55±8.61∗∗3.75±0.43∗1∶1组32.99±8.66∗∗3.00±0.71∗∗3∶1组56.75±5.30∗∗4.25±1.30∗5∶1组64.26±13.48∗∗4.25±0.83模型组102.98±11.464.63±0.87理中丸组45.33±5.69∗∗4.25±0.66

与模型组比较:*P<0.05,**P<0.01。

  

注:A.空白组; B.模型组; C.高良姜与陈皮组方的配比1∶1组。

 

图1 胃黏膜病理切片Figure 1 Pathological changes of gastric tissues(400×)

胃黏膜炎症时,通过受损黏膜进入机体的多种抗原物质可以刺激活化黏膜固有层的T 细胞,通过释放出一些选择性的淋巴因子参与变态反应性炎症反应。IL-2可以促进淋巴细胞生长及淋巴细胞增殖、分化和合成抗体,并增强细胞的杀伤作用,活化巨噬细胞,诱导杀伤细胞,产生多种细胞因子,协同的增炎效应,损害细胞,加重胃黏膜炎性改变[8]

国土资源网络舆情监测与应对处置探析(路雄英) ........................................................................................5-31

从实验结果可以看出,1∶5组、1∶1组、3∶1组的饮水量与模型组相比差异有统计学意义,可以提高大鼠的摄食量,其中1∶1组的效果好于理中丸;在饮水方面,1∶5组、1∶3组、1∶1组均有影响,与理中丸的作用效果相差不大;因为大鼠之间的个体差异,大鼠的粪便也呈现大小不一的颗粒状,所以统计后并无明显的统计学意义。随着组方的比例不同,对大鼠胃组织的IL-2的含量也有不同的影响,其中1∶1对IL-2的含量的影响最大;从评分结果来看,1∶3组、1∶1组、3∶1组对胃黏膜的炎症与水肿情况都有改善作用,所以高良姜、陈皮组方的最佳配比为1∶1。

参考文献:

[1] 杨万斌,文彬,张凌杭,等.大鼠胃寒证模型造模方法探索[J]. 中国中药杂志,2015,40(20):4031-4036.

[2] 刘静,傅杰,丁舸. 略论高良姜在方剂中的配伍意义[J]. 新中医,2012,44(2):124-125.

[3] 吴嘉瑞,郭位先,张冰,等. 基于数据挖掘的国医大师颜正华含陈皮处方用药规律研究[J]. 中国中药杂志,2014,39(4):618-622.

[4] 陈艳芬,陈蔚文,李茹柳,等. 左金丸与反左金对寒热型胃黏膜损伤炎症因子和保护因子的影响[J]. 中国中西医结合消化杂志,2003,11(3):133-135.

[5] 中华医学会消化病学分会,房静远,刘文忠,等. 中国慢性胃炎共识意见(2012年,上海)[J]. 中华消化杂志,2013,33(1):58-63.

[6] RAUWS E A,LANGENBERG W,HOUTHOFF H J,et al. Campylobacter pyloridis-associated chronic active antral gastritis. A prospective study of its prevalence and the effects of antibacterial and antiulcer treatment[J]. Gastroenterology,1988,94(1):33.

[7] 冯永辉,冯娟. 浅谈陈皮常见药对的配伍应用[J]. 陕西中医,2011,32(7):906-907.

[8]成映霞,段永强,朱立鸣,等. 益气健脾活血中药对萎缩性胃炎TNF-α、IL-2和EGF表达的影响[J]. 中国老年学,2013,33(15):3649-3651.

 
孙继燕,张鑫,杨全,程轩轩,潘利明
《广东药科大学学报》2018年第02期文献

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