非霍奇金淋巴瘤作为一种恶性肿瘤，主要产生于患者的血液淋巴系统，患者发病后具有多种临床表现，该病具有较复杂的病理类型，对人类的生命安全造成了严重的威胁[1]。微小染色体维持蛋白2(MCM2)是人体中非常关键的DNA复制启动因子，是DNA复制的重要组成部分；细胞间隙连接蛋白43(Cx43)是一种通道蛋白，在细胞间物质和信息交换中发挥着重要的作用，能够有效抑制肿瘤的发生。Ki-67作为核蛋白抗原，是细胞增殖活性的重要反应指标，对于淋巴瘤恶性程度的评估具有重要意义[2]。本次研究针对非霍奇金淋巴瘤患者进行了MCM2和Cx43蛋白的测定，分析其该病中的表达和临床意义，现将结果汇报如下。

兰江比孔老一想象的还要险恶，五月连绵的那几场暴雨，把江面延伸了差不多三倍宽，两岸的农田，现在都成了汪洋。想游过湍急的兰江几乎是不可能的，唯一可以想想办法的就是找一条船。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2015年2月—2017年2月间在周口市中心医院接受治疗的55例非霍奇金淋巴瘤患者作为观察组，另选择35例反应性增生淋巴结患者作为对照组。对照组，男性19例，女性16例，年龄16～78岁，平均年龄(51.36±2.47)岁；观察组，男性34例，女性21例，年龄18～81岁，平均年龄(53.84±2.65)岁，患者中低度恶性肿瘤共12例，中高度恶性肿瘤共43例。两组患者年龄和性别差异无统计学意义(P>0.05)。患者在此之前均未接受过其他治疗，经过影像学检查或病理手术对肿瘤侵犯部位进行准确定位。对观察组患者采用Ann Arbor分期系统进行临床分期。

径流水样品：每次降雨产生径流后，收集每个径流桶的径流水样，将水样储存于4 ℃冰箱内并及时过滤、测定。径流水采集结束后，需将径流桶内水排干并清洗干净，以备下次径流水采集。

1.2 方法

此次研究中所使用的试剂主要包括兔抗人Cx43多克隆抗体和兔抗人MCM2多克隆抗体，两份试剂均由上海康朗生物科技有限公司提供，试剂稀释倍数为1∶50。除此之外，实验二抗所使用的DAB显色试剂盒和快捷型酶标羊抗兔IgG聚合物也同样由上海康朗生物科技有限公司提供。除上述试剂外，此次研究中还使用乙醇、二甲苯、枸缘酸钠、3%H2O2等。本次实验中使用的仪器主要有BA2T显微镜、YD-315切片机和BMJ-A包埋机。

采用SPSS 19.0统计学软件对数据进行处理，计量资料以“±s”表示，采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

黄剑(1992-)，男，硕士研究生，主要研究方向为激光原理与应用等. Email:709008668@qq.com

1.3 观察指标

细胞核是MCM2的主要阳性染色部位，细胞质和细胞膜则是Cx43的主要阳性染色部位。选择染色均匀的区域进行观察，在高倍镜视野下分别观察细胞的上、下、左、右、中5个部位。

将标本用蜡块包埋，并连续切片4 μm，在载玻片上涂抹防脱剂后捞片，以60 ℃的温度进行烤片，随后用二甲苯对标本进行脱蜡程序，采用梯度酒精完成水化程序，并使用微波炉进行抗原修复工作。随后对内源性过氧化物酶进行灭活程序，使用试剂为3%H2O2。随后将标本用山羊血清进行封闭，并加一抗在4 ℃的环境下进行过夜孵育，并用PBS液清晰3次，每次5 min；随后加二抗在37 ℃的环境下进行30 min的孵育工作，并用PBS液清晰3次，每次5 min，用DBA显色试剂盒进行显色约1～5 min，完成后用蒸馏水进行冲洗。随后使用苏木素对胞核进行复染程序，并用盐酸酒精进行分化工作，使用流动自来水进行返蓝程序，并使用梯度酒精进行脱水，二甲苯透明。随后采用中性树胶进行封片处理，再放置显微镜下进行观察，阴性对照选择PBS液代替一抗，阳性对照选择正常淋巴结组织的阳性切片。

经过对比，MCM2的表达与Cx43的表达没有显著关系(r=-0.06，P>0.05)，分析原因可能是受到此次研究样本数量过少、观察周期较短等因素影响。

经过对比研究，MCM2与Cx45的表达和患者的肿瘤恶性程度存在显著相关性，除此之外，MCM2的表达还与患者肿瘤的临床分期和Ki-67存在显著相关性，见表2、表3。

经过对比研究，观察组患者MCM2的阳性表达率显著高于对照组患者，而观察组的Cx43阳性表达率明显低于对照组(P<0.05)，见表1。

例如在学习《过零丁洋》的时候，学生容易对文天祥产生英雄崇拜的心理。这时，教师可以利用这一心理，吸引学生注意力，增加学习兴趣。在上课之前，教师给学生布置任务，让他们自主收集有关文天祥的资料，通过自己找到的资料了解文天祥所经历过的事情做到课前预习，然后在课堂上让学生自主探讨，分享各自的知识，来讨论中逐渐补充知识。随后，教师可以进行概括总结。在学习“人生自古谁无死，留取丹心照汗青”这一名句时，要做细致分析。课后可以让学生讲讲自己所获的感想，让学生体会到文天祥的爱国精神，积极继承传统文化。

1.4 统计学方法

采用SPSS19.0软件进行统计学分析，计量资料以均数±标准差表示，组间比较采用t检验；计数资料用例数(%)表示，组间比较采用χ2检验,并采用Pearson等级相关性分析对数据相关性进行分析。以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对比两组患者的MCM2和Cx34蛋白表达情况

根据细胞阳性率记分和染色强度记分对结果进行评估，若得分为0分，则代表阴性；若得分在1～2分，则为弱阳性；若得分在3～4分，则为中度阳性；若得分在5～6分，则为强阳性。

党和国家机构职能体系是中国特色社会主义制度的重要组成部分，是我们党治国理政的重要保障。习近平总书记深刻指出，坚持和加强党的全面领导，既是深化党和国家机构改革的内在要求，也是深化党和国家机构改革的重要任务。要坚定贯彻、全面落实中央和省委的改革部署，把坚持和加强党的全面领导作为深化机构改革的首要任务，统筹省市县乡各层级、党政群各领域改革，优化机构设置和职能配置，构建系统完备、科学规范、运行高效、符合江苏实际的机构职能体系，为实现高质量发展走在前列提供坚强有力的体制机制保障。

2.2 非霍奇金淋巴瘤中MCM2和Cx43的表达与病理特征的相关性

根据细胞的染色强度进行记分，若染色为棕褐色，记为3分；若染色为棕黄色，记为2分；若染色为浅棕黄色，记为1分；若未着色，则记为0分。

根据细胞的阳性率进行记分，若超过50%，记为3分；若在25%～50%之间，记为2分；若不足25%，记为1分。

 

表1 两组患者的MCM2和Cx34蛋白表达情况

  

组别MCM2阳性(例)阳性率(%)Cx43阳性(例)阳性率(%)对照组(n=35)925.712262.85观察组(n=55)4887.271221.81χ234.90215.324P<0.05<0.05

 

表2 非霍奇金淋巴瘤中MCM2的表达与病理特征的相关性 例

  

临床特征分组例数MCM2阳性阴性χ2P性别年龄(岁)恶性程度临床分期全身症状Ki-67免疫分型男性34295女性21183>6024213≤6031283惰性1257侵袭性43430Ⅰ+Ⅱ18135Ⅲ+Ⅳ37361A组40337B组15150≥50%40400<50%1596B细胞性50437T细胞性5500.001>0.050.111>0.0528.741<0.057.833<0.053.007>0.0517.959<0.050.802>0.05

 

表3 非霍奇金淋巴瘤中Cx43的表达与病理特征的相关性 例

  

临床特征分组例数MCM2阳性阴性χ2P性别男性34628女性21516年龄(岁)>6024618≤6031427恶性程度惰性1275侵袭性43340临床分期Ⅰ+Ⅱ18216Ⅲ+Ⅳ37928全身症状A组40733B组15312Ki-67≥50%40931<50%15213免疫分型B细胞性501139T细胞性5050.308>0.051.331>0.0516.633<0.051.321>0.050.045>0.050.572>0.051.375>0.05

3 讨论

[1] 卿蕊,范自力,黄泽智,等.MCM2与Cx43蛋白在非霍奇金淋巴瘤中的表达和临床意义[J].湖南中医药大学学报,2015,35(5):24-26.

Cx43异常表达和不同肿瘤细胞的转化和恶性增殖存在一定的联系，因此，恶性肿瘤中Cx43的表达水平呈下降趋势[7-8]。本次研究中，观察组患者的Cx表达水平明显低于对照组患者，且和肿瘤恶性程度呈负相关关系，由此可见，非霍奇金淋巴瘤的产生可以借助Cx43的降低进行评估预测。

综上所述，通过对MCM2和Cx43蛋白水平的测定，能够有效预测非霍奇金淋巴瘤的发生和发展，具有重要的临床价值。

参 考 文 献

细胞异常增殖是肿瘤细胞发展的中心环节，而细胞周期是影响细胞增殖的决定因素，DNA复制则是由细胞周期调控，所以，通过有效评估DNA复制起始的相关蛋白能够对肿瘤的发生和发展进行有效的预测[3]。MCM2对细胞增殖活性程度有较好的反映价值，若细胞处于分化成熟期或静止期，则MCM2的含量相对较少；而若细胞处于增殖或转化时期，则MCM2的含量会持续增加，一直到细胞G1末期和S早期以达到峰值，同时，MCM2会与染色质进行结合，形成MCMC2，随后在G2期和M期其含量会有所下降[4-5]。根据相关研究表明[6]，MCM2在不同的肿瘤细胞中都存在较高的表达。本次研究中，观察组MCM2的表达阳性率显著高于对照组，并且与患者肿瘤分期、恶性程度及Ki-67存在正相关关系，由此可见，非霍奇金淋巴瘤的产生可以借助MCM2的升高进行评估预测。

[2] 齐彦,廖斌,杨丽英,等.非霍奇金淋巴瘤中MCM2、Cx43、Skp2蛋白的表达[J].现代肿瘤医学,2016,24(6):958-961.

[3] 姜铭,高鸣.2项指标在非霍奇金淋巴瘤和白血病中的临床意义[J].检验医学与临床,2015,12(8):1131-1132.

[4] 张坤.Pim-3蛋白对比P-gp、Bcl-2蛋白在非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义[D].遵义：遵义医学院,2016.

[5] 葛建娟,杨书云,宋诸臣,等.耐药相关基因在复发难治性非霍奇金淋巴瘤中的表达及临床意义[J].江苏医药,2016,42(15):1669-1671.

[6] 姬云翔.磷酸化Cx43蛋白在人胶质瘤细胞中表达及其与肿瘤细胞增殖相关性研究[D].石河子大学,2015.

式中： DLS为狗腿严重度，(°)/30 m；L为两测点弯曲段长度，m；α1为第一个测点顶角，(°)；α2为第2个测点顶角，(°)；θ1为第一个测点方位角，(°)；θ2为第二个测点方位角，(°)。

[7] 陈妍,陈加华.联合测定非霍奇金淋巴瘤患者血清乳酸脱氢酶及β2-微球蛋白的临床意义[J].安徽医学,2015,36(11):1393-1395.

[8] Eleanor Kane,Debra Howell,Alexandra Smith,Simon Crouch,Cathy Burton,Eve Roman,Russell Patmore.Emergency admission and survival from aggressive non-Hodgkin lymphoma:A report from the UK’s population-based Haematological Malignancy Research Network[J].European Journal of Cancer,2017,78(78):53-60.