正确的血型鉴定和进一步的抗体筛选、交叉配血是保证临床输血安全的关键。有文献报道，由供受者血型鉴定错误所致的ABO血型不相合输注可高达45%～55%[1]。由于献血者的复杂性和个体差异，如一些献血者有输血史、妊娠史等，可能会引起血型鉴定困难；对这些血液做进一步鉴定分析后，再决定血液可否用于临床输血，对输血安全性尤其重要。笔者对2008年1月～2015年12月健康献血者血液中ABO正反定型不合的鉴定结果进行回顾性分析，报道如下。

材料与方法

1 材料 本站2008年1月～2015年12月采集的符合献血者健康检查标准的适龄自愿无偿献血者血液标本285 282例，男性152 910例，女性132 372例，年龄18～55岁。

“我们每个月都要跟中西药房的负责人去沟通，反馈患者排队数据变化，寻找数字变化背后的原因，看看他们有什么需求，哪些地方还可以改进。”

2 试剂与仪器 抗-A、抗-B血型定型试剂，人ABO血型反定型用红细胞试剂盒，Rh（IgM）血型定型试剂，抗-I、抗-HI、抗-H、抗-A1、抗-AB、抗-IgG+C3d(多特异性），抗-S、抗-s、抗-M、抗-N、抗-P1均由上海血液生物医药有限公司提供，进口试剂（16人份谱细胞，荷兰Sanquin ）、抗-Lea、抗-Leb由Seraclone提供，所有试剂均在有效期内使用。免疫血液学用离心机（日本久保田，型号：KA-2200），电子恒温水浴箱（中兴，型号：SHH.W21）。

3 方法 所有操作均严格按照文献[2]方法进行。

2 375例ABO正反定型不合原因分析 本次实验结果显示，375例献血者ABO正反定型不合的发生主要由特异性不规则抗体（78.7%）、冷凝素干扰（7.5%）、非特异性抗体（5.6%）、抗体减弱（3.7%）、自身抗体（1.8%）、结合补体（1.1%）及缗钱状凝集（1.6%）七大原因引起，其中特异性不规则抗体是引起ABO正反定型不合的最主要原因，见表2。

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3.1 血型鉴定：采用96孔微孔板盐水凝集法进行ABO正反定型和RhD血型检测，ABO正反定型不合的血样标本（均采用试管法复检以排除人为因素干扰），送血型参比实验室做进一步鉴定。

3 295例特异性抗体分析 引起ABO正反定型不合的特异性不规则抗体中，抗-M（26.1%）、冷抗体（23.4%）及ABO亚型（20.7%）是最常见的三大原因，其次为抗-Leb（9.8%）、抗-s（8.1%）、抗-N（6.1%）等，而抗-P1、抗-S等较少见。其中抗-Leb联合抗-HI1例，抗-S联合抗-Lea1例。MNSs系统抗体（41.0%）、冷抗体（23.4%）及ABO系统（20.7%）是最常见的三大系统，其次为Lewis系统（12.5%），而P系统则较少见。见表3。

1 献血者ABO正反定型不合发生的阳性率 在285 282例血液标本中，共检出ABO血型正反定型不合375例，阳性率0.131%，其中男性阳性率0.104%，低于女性阳性率（0.163%），差异有统计学意义（P＜0.01），见表1。

结 果

4 统计学处理 应用SPSS17.0统计软件，计数资料采用χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

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表1 献血者ABO正反定型不合发生的阳性率比较

  

注：χ2=18.94，P＜0.01

 

性别 阳性例数 阴性例数 合计 阳性率（%）男性159152 751152 9100.104女性216132 156132 3720.163合计375284 907285 2820.131

3.2 抗体鉴定：应用盐水法及抗人球蛋白法（包括经典试管法和微柱凝胶Diana卡法）进行不规则抗体鉴定，用10人份和16人份谱细胞进行抗体特异性鉴定并加自身细胞对照试验。当受检者血浆内有2种或以上同种抗体时，应采用吸收放散实验证实或排除。

4 61例ABO亚型分布情况 引起ABO正反定型不合的亚型中，AB型中的 AxB亚型（27.9%）最常见，其次为A2B亚型（13.1%）和B型中的B3亚型（11.5%）等，其他亚型则较少见。见表4。

 

表2 375例ABO正反定型不合原因分析

  

例数（n） 构成比（%）特异性抗体29578.7冷凝集素干扰28 7.5非特异性抗体21 5.6抗体减弱14 3.7自身抗体7 1.8缗钱状凝集6 1.6结合补体4 1.1

 

表3 295例特异性抗体分布情况

  

抗体特异性 例数 构成比（%）抗-M7726.1抗-N186.1抗-s248.1抗-S20.7冷抗体（23.4%）MNSs系统（41.0%）抗-I3712.6抗-HI299.8抗-H31.0 ABO系统（20.7%）ABO亚型6120.7 Lewis系统（12.5%）抗-Leb299.8抗-Lea82.7 Rh系统（4.7%）抗-D134.1抗-C20.6 P系统（2.4%） 抗-P172.4

讨 论

本地区献血者ABO正反定型不合的发生率为0.131%，高于华洪葳报道的4.71/万[3]，显示出地区和人群的差异，女性献血者ABO正反定型不合的发生率高于男性（P＜0.01），可能由于女性相比于男性不仅受到输血而且还受到妊娠等免疫刺激[4]，使女性ABO正反定型不合发生率高于男性。影响血型鉴定的因素很多，包括抗原减弱、抗体减弱、ABO亚型、冷凝素干扰及ABO血型变异等[5]。从本实验可以看出，在血型鉴定工作中遇到的ABO正反定型不合主要是由于不规则抗体引起的，与王宏法报道一致[6]，引起ABO正反定型不合的不规则抗体可以由多次、大量输血或妊娠等免疫产生，而且其分布具有多态性和复杂性特点[7]。本实验中引起ABO正反定型不合的21例非特异性不规则抗体是由于实验本身及试剂的局限性等原因，导致检测到不规则抗体而抗体特异性鉴定困难的一类抗体。

 

表4 61例ABO亚型分布情况

  

血型 亚型种类 例数 构成比（%）AB型AxB1727.9 A2B813.1 A3B58.2 ABx46.6 B（A）11.6 B型B3711.5 Bx46.6 Bm46.6 Bel11.6 A型Ax34.9 A234.9 Ael23.3 Aend11.6 Aint11.6

在本次实验引起ABO正反定型不合的295例特异性不规则抗体中，以抗-M、ABO亚型、抗-N、抗-s及抗-Leb等较常见且临床意义较大，而抗-P1较少见，一方面这些抗体会导致血型正反定型不合和后续的交叉配血困难，另一方面在临床新鲜冰冻血浆输注中一般不做交叉配血实验，因此输入含有不规则抗体的血浆可能会发生迟发型输血反应。冷抗体是指抗体筛查时与所有谱细胞凝集，且凝集反应在4℃增加、37℃减弱的一类抗体，该类抗体一般在人体内不会导致溶血反应，但会在实验环境温度较低尤其是冬季，易导致血型鉴定困难和交叉配血不合。因此为了输血安全性，不建议将含有冷抗体的血液制品输给受血者进行输血治疗。本次实验中引起ABO正反定型不合的61例ABO亚型主要是根据血清学定型方法判定，ABO亚型是一种弱A/弱B的表现型[8]，较少见，但会导致血型鉴定困难，若这些血液用于临床输血可能会因血型不合而引起严重的溶血性输血反应。

临床因供受者ABO血型不合产生的输血反应已很少见，但由不规则抗体导致的输血反应已经成为临床输血无效及溶血的主要原因[9]。为保证输血安全和有效，凡血型鉴定中判定为ABO正反定型不合的血液中检出不规则抗体（包括特异性、非特异性、自身抗体或结合补体及冷抗体等）、高效价冷凝集素，以及血型鉴定中出现缗钱状凝集，则该份血液非红细胞制品应废弃，红细胞三洗后可用于临床；检测出亚型的血液红细胞和非红细胞制品均应废弃。同时，为减少血液浪费，建议：①将含有不规则抗体的血液制剂制备成抗体血清用于稀有血型检测；②根据供血者血型正反不合所检测出的不规则抗体，再结合受血者不规则抗体筛查结果为电子交叉配血建立基础[10]；③经允许将这些血液用于科研使用。供血者血液常规抗体筛查目前已在发达国家实施[11]，其优点是可以防止含有不规则抗体的血液输注给受血者，避免由供血者血液中产生的不规则抗体引起受血者红细胞被破坏而引起溶血性输血反应，提高输血安全性，但同时也有成本高、工作量大等缺点，目前国内还没有常规开展，一是主要通过对血型鉴定中出现ABO正反定型不合等疑难血型的献血者血液做进一步抗体筛查和鉴定分析，但缺点是可能有一定的漏检率；二是对受血者进行常规抗体筛查，根据筛查结果为受血者提供合适的血液。为进一步提高ABO正反定型不合等疑难血型检测的准确度，避免由于方法学上的局限性而导致血型鉴定错误（如ABO亚型未检出），进而导致严重的溶血性输血反应，建议血型参比实验室增加分子生物学检测方法如基因分型法，尽可能减少对疑难血型的漏检率及检测出更多有临床意义的不规则抗体，保障临床输血的安全和有效。

参 考 文 献

1 Fujii Y，Shibata Y，Miyata S，et al. Consecutive national surveys of ABO-incompatible blood transfusion in Japan[J]. Vox Sang，2009，97（3）： 240-246.

2 中华人民共和国卫生部医政司.全国血型血清学检查.全国临床检验操作规范[M].南京：东南大学出版社，2006：246-264.

3 华洪葳，宿军，杨春晴，等.54例无偿献血者ABO疑难血型检测结果分析[J].中国输血杂志，2015，28（12）：1509-1511.

4 程晓文，刑志芳，闻才李，等.7500例患者不规则抗体检测的结果分析[J].中国输血杂志，2013，26（9）：859-861.

5 Garvatty G.Autoantibodies induced by blood transfusion[J]. Transfusion，2004，44（1）：5-9.

6 王宏法.63例献血者ABO血型检测正反定型不符的原因分析[J].河南医学研究，2013，22（3）：453-455．

7 宋任浩，何路军，常缨.献血人群红细胞血型意外抗体检出率及分布情况[J].检验医学与临床，2014，11（2）：186-187，190.

8 何华庆，韩玲，熊莉，等.献血者正反定型不符原因分析[J]. 实验与检验医学，2015，33（4）：518-520.

9 Pahuja S，Kushwaha S，Sethi N，et al.Screening of blood donors for erythrocyte alloantibodies[J].Hematology，2012，17（5）：113-120.

10 曾杰，黄朴，肖瑞卿，等.血型血清学与电子交叉配血试验的比较研究[J].中国输血杂志，2013，26（2）：113-116.

11 郑小凡，祝宏，吴亚玲，等.应用Olympus PK7200血型仪筛查献血者意外体[J].中国输血杂志，2009，22（1）：48-49.