子宫颈癌患病率占我国女性生殖系统恶性肿瘤第一位，且大部分为子宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)，确诊时多为晚期，预后较差，5年生存率仅为60%，有远处转移病人的生存率更低[1]。肿瘤转移的过程与上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)过程十分相似[2]。EMT过程中上皮细胞的极性和黏附性丧失、细胞骨架重组、细胞外基质重塑以及变成运动能力更强的梭形，使肿瘤细胞易于浸润和转移[3]。上皮性肿瘤发生EMT往往伴随着同时上皮性表型的相关分子标志物，如细胞角蛋白(cytokeratin,CK)和钙黏蛋白(E-cadherin，N-cadherin)表达逐渐降低或丧失[4-6]。

在多年基层水土保持工程实施过程中，发现土方工程、石方工程、砌石工程、混凝土工程中存在部分定额子目设置不合理、机械设备更新变革等问题。现对《水土保持定额》及《水土保持编制规定》存在的部分定额子目内容进行探讨和分析，以期为基层水土保持工作提供参考与借鉴。

Sox4(SRY-related HMG-box 4)是转录调控分子家族Sox重要成员，在多种肿瘤的发生、发展过程中发挥着重要的作用[7]。研究[8-9]显示，Sox4作为癌基因可以始动、调控EMT。因此，本研究旨在探索Sox4和E-cadherin对CSCC EMT作用及可能的分子机制。

1 材料与方法

1.1 临床资料 选取2010-2011年在蚌埠医学院第一附属医院临床病理科存档的160例CSCC手术根治标本作为观察组，同时选取28例癌旁正常宫颈上皮组织作为对照组。所有病人均有术前及术后明确的病理诊断，病人术前未进行任何放疗、化疗及其他治疗，并排除严重的心肺功能障碍、合并其他的恶性肿瘤及不配合治疗者。经病人及其家属同意，并经蚌埠医学院人体试验伦理道德委员会同意批准。病人年龄为21～79岁。病程1～10个月。160例中年龄≥50岁者71例，<50岁者89例；直径≥4.0 cm者90例，<4.0 cm者70例；分化程度：高分化24例，中分化42例，低分化94例；淋巴结转移45例，未转移115例；有宫旁浸润16例，无浸润144例；FIGO分期：Ⅰ～Ⅱ期63例，Ⅲ～Ⅳ期97例。所有标本的诊断均经3位资深病理医师确认。

从习近平总书记关于党的群众路线的重要论述来看，可以看出习近平的理论贡献在他在遵循和继承马克思主义唯物史观的价值精髓的基础上，吸收了中国传统优秀政治文化的积极因素，创造性的提出了“以人民为中心的发展思想”，并从马克思主义政党同其他政党的本质区别出发论述了党的群众路线的政治意义和实践意义。他提出了“开展党的群众路线教育实践活动，就是要把为民务实清廉的价值追求深深植根于全党同志的思想和行动中”。〔13〕质言之，通过群众路线巩固党执政的基层基础，提升党的创造力、凝聚力、战斗力；通过群众路线构建“共建共治共享”治理过程，增强人民群众的获得感、幸福感和安全感。

2.4 CSCC中Sox4与E-cadherin蛋白的关系 Spearman相关分析显示，CSCC组织中Sox4和E-cadherin蛋白表达呈负相关关系(rs=-0.54，P<0.01)。

2.1 Sox4及E-cadherin在2组组织中的表达 Sox4主要表达在2组组织中的瘤细胞核；E-cadherin主要表达在胞膜，代表性的染色见图1。Sox4在观察组组织阳性率为63.75%，高于对照组的39.29%(P<0.05)，E-cadherin阳性率为35.00%，明显低于对照组的64.29%(P<0.01)(见表1)。

1.4 统计学方法 采用χ2检验和Spearman等级相关分析。

2 结果

1.3 免疫组化染色结果评判 免疫组化积分参考文献[11]，染色结果由2名资深病理医师盲审阅片评定。采用阳性细胞的数量及细胞着色强度进行双评分半定量法记分。阳性细胞数量按照：0(无阳性)、1(≤10%)、2(11%～50%)、3(51%～75%)和4(>75%)进行；细胞着色强度：0 分(不着色)、1分(淡黄色)、2分(棕黄色)和3分(棕褐色)。两者结果相乘，即为综合评分。得分为0～12分，<3分定义为阴性，≥3分为阳性。

表1 2组组织中Sox4与E-cadherin蛋白的阳性表达[n；百分率(%)]

分组nSox4+E⁃cadherin+对照组2811(39．28)18(64．29)观察组160102(63．75)56(35．00)合计188112(59．57)74(39．36)χ2— 5．95 8．56P— <0．05 <0．01

EMT是指上皮细胞在某些特定生理或病理情况下向间充质细胞转化的现象[2]，在胚胎发育和创伤恢复等正常生理过程中起着关键作用，同时也被认为与癌症的发生相关[2]。上皮性肿瘤发生EMT往往伴随着同时上皮性表型的相关分子标志物如CK、E-cadherin表达逐渐降低或丧失，而间充质表型的相关分子标志物如Slug、N-cadherin、α-SMA、Snail和vimentin等表达增高[11]。E-cadherin蛋白是钙依赖性细胞黏附分子的1种，相对分子质量为1 207 000，定位于细胞间彼此连接的细胞膜处，其功能为介导同种亲和性细胞之间的黏附[22]。E-cadherin介导的黏附反应与癌细胞的侵袭、转移密切相关，表达降低可减弱细胞间的黏附，更易发生EMT，使癌细胞易于脱落而发生癌转移[23]。

Sox4是相对分子质量为47 000的蛋白质，包含3个特征性结构域，即高速泳动DNA集合区域(DBD)，甘氨酸富集区和丝氨酸富集区[12-13]。DBD与TCF/LEF转录因子家族有关，最近发现该区域有促进细胞死亡的新功能[13-15]。Sox4与含有7个碱基对AACAAAG的靶基因结合，从转录水平激活靶基因[16]。研究[17]显示，Sox4主要控制细胞的命运和分化，在一些发育中的器官高表达，但是出生后表达受限。由于Sox4过表达出现的异常转化、增殖和转移能力，使Sox4表现出癌基因的潜能[17-21]。最近的研究[8-9]发现，Sox4作为癌基因可以始动、调控EMT。

表2 Sox4蛋白与CSCC临床病理参数之间的关系[n;百分率(%)]

临床病理参数nSox4+χ2P年龄/岁 ≥50 <50718942(59．15)60(67．42)1．16>0．05肿瘤直径/cm ≥4．0 <4．0907073(81．11)29(41．43)26．83<0．01病理分级 高分化2412(50．00) 中分化4224(57．14)4．33∗<0．05 低分化9466(70．21)淋巴结转移 有 无4511539(86．67)63(54．78)14．23<0．01宫旁浸润 有 无1614415(93．75)87(60．42)6．92<0．01FIGO分期 Ⅲ～Ⅳ期 Ⅰ～Ⅱ期976377(79．38)25(39．68)26．05<0．01

*示线性趋势χ2检验

1.2 免疫组织化学染色方法 免疫组织化学染色步骤按照文献[10]进行。实验所有石蜡包埋组织均采用10%甲醛固定，每例组织连续4 μm厚切片数张，烤干，置于二甲苯溶液及不同浓度的乙醇中脱蜡，用磷酸缓冲盐溶液(PBS，pH7.2)清洗。用含3% H2O2的甲醇封闭内源性过氧化物酶活性，室温下放置10 min；95 ℃孵育10 min修复抗原，PBS冲洗；山羊血清室温下封闭20 min；Sox4兔多克隆抗体(稀释比例1∶100，货号：ab52043,abcam,USA)和E-cadherin兔多克隆抗体(稀释比例1∶100，货号：ab15148,abcam,USA) 4 ℃过夜，PBS冲洗，羊抗鼠二抗室温孵育30 min。

表3 E-cadherin蛋白与CSCC临床病理参数之间的关系[n；百分率(%)]

临床病理参数 nE⁃cadherin+χ2P年龄/岁 ≥50 <50718923(32．39)33(37．08)0．38>0．05肿瘤直径/cm ≥4．0 <4．0907020(22．22)36(51．43)14．76<0．01病理分级 高分化2410(41．67) 中分化4220(47．62)5．64>0．05 低分化9426(27．66)淋巴结转移 有 无451157(15．56)49(42．61)11．11<0．01宫旁浸润 有 无161441(6．25)55(38．19)6．46<0．05FIGO分期 Ⅲ～Ⅳ期 Ⅰ～Ⅱ期976319(19．59)37(58．73)25．72<0．01

3 讨论

2.3 E-cadherin与CSCC病人临床病理因素之间的关系 E-cadherin表达水平与肿瘤直径、淋巴结转移、宫旁浸润和FIGO分期有关(P<0.05～P<0.01)。E-cadherin蛋白在肿瘤直径≥4.0 cm阳性率22.22%，低于<4.0 cm组阳性率 51.43%(P<0.01);在淋巴结转移组阳性率15.56%，低于未转移组阳性率42.61%(P<0.01);有宫旁浸润阳性率6.25%，低于无浸润的阳性率38.19%(P<0.05);FIGO分期为Ⅲ～Ⅳ期阳性率19.59%，低于Ⅰ～Ⅱ期的阳性率58.73%(P<0.01)。E-cadherin蛋白的表达与年龄和肿瘤的分化程度无明显相关性(P>0.05)(见表3)。

2.2 Sox4与CSCC病人临床病理因素之间的关系 Sox4表达水平与肿瘤直径、病理分级、淋巴结转移、宫旁浸润和FIGO分期有相关性(P<0.05～P<0.01)。Sox4蛋白在肿瘤直径≥4.0 cm的表达阳性率81.11%，高于<4.0 cm组阳性率41.43%(P<0.01)；病理分级越低阳性表达率越高(P<0.05)，在淋巴结转移组阳性率86.67%，高于未转移组阳性率54.78%(P<0.01)；在有宫旁浸润的阳性率93.75%，高于无浸润的阳性率60.42%(P<0.01)；在FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期阳性率79.38%，高于Ⅰ～Ⅱ期的阳性率39.68%(P<0.01)；Sox4蛋白的表达与年龄无明显相关性(P>0.05)(见表2)。

为载流导体的厚度，m；RT为热阻系数，m2·K/W；ΔT为热传递双方的温差，K。热通道中热量传递与电路中电流回路类似，热量传递时的等值热通道模型遵守类似于电路中的基尔霍夫定律。计算时首先由热电比拟理论按各传热环节的热传递方式，求取热传导、热辐射、热对流对应的热导系数等参数，建立基于热通道的热点温度计算模型，再将热源热量代入该模型求解出断路器内部热点温度。

本研究结果显示，与正常子宫颈组织比较，Sox4在CSCC中异常高表达，且随着肿瘤直径的增加表达增高，且Sox4高表达的病人更容易发生淋巴结转移和宫旁浸润，有更高的FIGO分期。而E-cadherin蛋白高表达的病人不容易发生淋巴结转移和宫旁浸润，肿瘤直径较小，且FIGO分期较早，且E-cadherin蛋白的表达与Sox4呈负相关关系，提示Sox4可能通过下调E-cadherin的表达促进CSCC的EMT形成，促进肿瘤侵袭和转移，预后较差。

从生源来看，大多数中职学生的基础较弱、学习兴趣不浓，而会计专业课程又很抽象，专业术语比较难理解，教师应改进教学方法，采用先进的教学方法进行教学。在教学过程中，教师应该充分利用多媒体，促使学生加深对会计知识的理解，对凭证账簿报表制作课件进行演练，使学生掌握数据的来龙去脉和填写的位置和顺序，步骤清晰，容易操作。这样以学生的需求为动力，激发了学生的学习兴趣，调动了学生的主动性和积极性，有效提高了实践性教学的效率与质量。

综上所述，本研究证实Sox4在CSCC的进展中起着重要作用，它通过直接或间接的方式下调E-cadherin表达，即Sox4和E-cadherin一起调控CSCC的EMT形成、细胞的增殖和转移，其是否和CSCC预后有关，将是我们接下来要研究的内容。联合检测Sox4和E-cadherin在一定程度上可以反映CSCC的生物学行为，为临床的分子生物学靶向治疗提供指导。

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