结直肠癌(CRC)是世界第二大高致死率肿瘤，在我国的发病率位于恶性肿瘤的第五位，且其发病率呈逐年上升的趋势[1-3]。结肠息肉是一种常见的结肠疾病，分为肿瘤性息肉和非肿瘤性息肉，与结肠癌的发生、发展密切相关。增生性息肉属于常见的非肿瘤性息肉，是一种结肠黏膜不活跃的增生状态，有研究报道，增生性息肉也有癌变的可能[4-5]。而腺瘤性息肉属于肿瘤性息肉，其癌变可能性极高。有研究报道，腺瘤性息肉是结肠息肉发生率最高的病理类型(76.5%)，且也有报道，50%～70%的结肠癌来源于腺瘤，其癌变率为2.9%～9.4%[6]。黏蛋白(MUC)是由胃、肠、卵巢、气管、支气管等多种器官的上皮细胞产生的黏液中的主要成分，是一类相对分子质量较高的糖蛋白，对黏膜上皮起保护和润滑作用，在肿瘤组织中呈异常表达。也有黏蛋白在胃癌、结直肠癌、乳腺子宫颈导管癌、恶性子宫颈病变中的研究，而在结肠息肉中的研究尚未见报道。本研究主要目的是根据免疫组织化学确定MUC1、MUC2、MUC5AC、MUC6在不同结肠息肉病理组织中的表达情况，评估黏蛋白的表达对结肠息肉转化的临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择本院2013年1月至2015年1月于手术的结肠息肉患者120例，年龄16～80岁，平均(58.1±12.3)岁。息肉患者入选标准根据内镜下诊断[7]及病理诊断[8]。根据组织病理诊断分为3组：增生性息肉组患者40例，管状腺瘤组患者40例，绒毛状腺瘤组患者40例。另外选取20例正常结肠黏膜作为正常对照组。

1.2 样本收集 息肉组织标本留取通过Olympus XQ 260肠镜检查发现息肉者，取息肉组织3块，息肉旁组织3块，正常对照组取距肛门20 cm处黏膜3块，置于装有0.1%福尔马林溶液的标本瓶后，送病理科标本统一常规脱水，石蜡包埋，连续切片(4 μm)，行病理检查。病理检查剩余标本蜡块，常温留存待检。

1.3 免疫组织化学 将组织切片(4 μm)在二甲苯中脱蜡，使用分级乙醇系列水合。将样品在0.01 mol/L枸橼酸钠(pH6.0)中孵育20 min进行抗原恢复，3%过氧化氢中孵育10 min以阻断内源性过氧化物酶活性，10%正常山羊血清中孵育30 min以阻断非特异性染色。使用MUC1、MUC2、MUC5AC、MUC6的一抗(Abcom，UK)将切片在4 ℃孵育过夜。用磷酸盐缓冲溶液(PBS)孵育的切片作为阴性对照。将切片与生物素化的二抗孵育30 min，然后用链霉亲和素过氧化物酶孵育15 min。每个孵育步骤均在37 ℃下进行，然后用PBS洗涤3次，每次5 min。除去PBS，加入100 μL DAB溶液，于显微镜下观察，直到显色。自来水冲洗后，用苏木精进行复染后用自来水冲洗，显微镜下观察，胞浆和核膜出现黄色或棕黄色颗粒，即为阳性表达。

综上所述，微课被应用进小学语文课堂中具有非常多的优势，微课的内容虽然短但却非常精。学生通过微课的学习会对所学知识更加容易掌握，使学习效率得以提升，但是现在的微课程还有许多的弊端存在，这就需要我们语文老师不断提升自我，根据学生的身心特点创设出更加符合当前学生所需要的微课，通过微课的学习充分调动学生的积极性与自主能动性，激发学生的学习兴趣，为培养综合性人才奠定夯实的基础。

黏蛋白是由黏膜上皮细胞产生、储存和分泌的相对分子质量较高的糖蛋白[9]，是胃肠道黏液保护层的主要部分。黏蛋白的保护作用主要通过将黏蛋白的长糖侧链连接到富含丝氨酸和苏氨酸残基的串联重复蛋白结构的氧键上来实现。这些键通过抑制蛋白酶活性阻碍黏蛋白降解，从而保持黏蛋白的黏度和密度。不同的黏蛋白由不同的MUC基因编码[10]。证据表明，MUC基因表达及其产物的分布在某些类型的结直肠癌和肿瘤中发生显著变化[11]。本研究旨在通过检测MUC1、MUC2、MUC5AC及MUC6黏蛋白在结肠息肉不同病理组织中的表达情况，探讨其在结肠息肉发展过程中的作用。

2.1 增生性息肉、管状腺瘤和绒毛状腺瘤中MUC1表达水平比较 正常结肠黏膜、增生性息肉、管状腺瘤和绒毛状腺瘤中MUC1的表达情况如表1所示。在正常结肠黏膜、增生性息肉中未观察到MUC1的阳性表达。4组总体MUC1的表达差异具有统计学意义(χ2=27.096，P=0.000)。两两比较，管状腺瘤MUC1阳性表达率显著高于正常结肠黏膜和增生性息肉(χ2=10.540，P=0.001)，且绒毛状腺瘤MUC1阳性表达率显著高于正常结肠黏膜和增生性息肉(χ2=17.578，P=0.000)，而管状腺瘤与绒毛状腺瘤中MUC1阳性表达率差异无统计学意义(χ2=0.894，P=0.344)。

2 结 果

1.5 统计学处理 本研究所有数据均采用统计学软件SPSS21.0进行分析。计量资料采用进行描述，组间比较行t检验；计数资料采用百分率来描述，组间比较行χ2检验。当P<0.05时，则差异具有统计学意义。

四是现有粮食管理系统仍然可以正常运行。当前，国家粮食局是负责全国粮食流通宏观调控具体业务、行业指导和中央储备粮行政管理的行政机构。如果将大豆(与薯类)从原口径中分列出来，可能会影响粮食局职能部门的一些业务调整，但并不会改变现有粮食局系统的职权范围。而且，统计口径调整将进一步明晰口粮、饲料用粮与油料概念，有助于精准调控全国口粮、饲料用粮与油料的生产与流通，实现全国的粮食管理从强调“粮食安全”向强调“食物安全”转变，拓宽解决粮食问题的思路。

 

表1 增生性息肉、管状腺瘤和绒毛状腺瘤中MUC1表达水平比较

  

项目nMUC1表达例数(n)-++++++阳性率(%)正常结肠黏膜20200000.0增生性息肉40400000.0管状腺瘤402992027.5绒毛状腺瘤4024310340.0

2.4 增生性息肉、管状腺瘤和绒毛状腺瘤中MUC6表达水平比较 如表4所示，正常结肠黏膜、增生性息肉、管状腺瘤和绒毛状腺瘤中MUC6的阳性表达率差异有统计学意义(χ2=24.892,P=0.000)。正常结肠黏膜和增生性息肉中未发现MUC6的阳性表达。两两比较时，管状腺瘤(χ2=8.013，P=0.005)和绒毛状腺瘤(χ2=16.082，P=0.000)中MUC6阳性表达率均显著高于增生性息肉，差异有统计学意义。而管状腺瘤与绒毛状腺瘤中MUC6的阳性表达率间差异无统计学意义(χ2=1.488，P=0.223)。

 

表2 增生性息肉、管状腺瘤和绒毛状腺瘤中MUC2表达水平比较

  

项目nMU2表达例数(n)-++++++阳性率(%)正常结肠黏膜2006104100.0增生性息肉40032413100.0管状腺瘤4061221185.0绒毛状腺瘤4092161377.5

2.3 增生性息肉、管状腺瘤和绒毛状腺瘤中MUC5AC表达水平比较 如表3所示，正常结肠黏膜、增生性息肉、管状腺瘤和绒毛状腺瘤中MUC5AC的表达阳性率差异有统计学意义(χ2=22.645，P=0.000)。正常结肠黏膜中未观察到MUC5AC的阳性表达。两两比较时，增生性息肉中MUC5AC阳性表达率虽增加，但与正常结肠黏膜中相比差异无统计学意义(χ2=1.336，P=0.248)，而管状腺瘤(χ2=11.794，P=0.001)和绒毛状腺瘤(χ2=8.960，P=0.003)中MUC5AC阳性表达率均显著高于正常结肠黏膜，差异均有统计学意义。增生性息肉MUC5AC阳性表达率低于管状腺瘤(χ2=10.060，P=0.002)和绒毛状腺瘤(χ2=6.457，P=0.011)，差异均有统计学意义。管状腺瘤中MUC5AC阳性表达率虽高于绒毛状腺瘤(χ2=0.203，P=0.652)，但差异无统计学意义。

 

表3 增生性息肉、管状腺瘤和绒毛状腺瘤中MUC5AC表达水平比较

  

项目nMUC5AC表达例数(n)-++++++阳性率(%)正常结肠黏膜20200000.0增生性息肉403512212.5管状腺瘤4021211647.5绒毛状腺瘤4024115040.0

2.2 增生性息肉、管状腺瘤和绒毛状腺瘤中MUC2表达水平比较 如表2所示，正常结肠黏膜、增生性息肉、管状腺瘤和绒毛状腺瘤中MUC2的表达阳性率差异存在统计学意义(χ2=13.776，P=0.003)。两两比较，正常结肠黏膜、增生性息肉中MUC2阳性表达率显著高于管状腺瘤(χ2=4.505，P=0.034)和绒毛状腺瘤中的阳性表达率(χ2=8.013，P=0.005)，差异有统计学意义。而管状腺瘤与绒毛状腺瘤中MUC2的阳性表达率差异无统计学意义(χ2=0.328，P=0.567)。

 

表4 增生性息肉、管状腺瘤和绒毛状腺瘤中MUC6表达水平比较

  

项目nMUC6表达例数(n)-++++++阳性率(%)正常结肠黏膜20200000.0增生性息肉40400000.0管状腺瘤403171122.5绒毛状腺瘤4025103237.5

3 讨 论

MUC2基因在结肠、直肠高杯细胞中大量表达，主要编码分泌型糖蛋白。MUC2是肠型黏蛋白，正常情况下主要在肠道黏膜上皮中表达，而在结肠、直肠正常黏膜、腺瘤组织、腺癌组织中的表达逐渐降低。研究发现MUC2 mRNA在非黏液性结肠腺癌中的表达水平较低，且与肿瘤细胞转移潜能呈正相关关系，随转移潜能的降低而逐渐下调。研究表明，MUC2与黏液性结直肠癌肿瘤细胞的浸润和转移密切相关。本研究中，MUC2在正常结肠黏膜、增生性息肉、管状腺瘤、绒毛状腺瘤中的阳性表达率分别为100.0%、100.0%、85.0%、77.5%，呈逐渐下降趋势。在正常结肠黏膜和增生性息肉中的阳性表达率显著高于腺瘤性息肉，与文献报道相符[18]。本研究结果提示，MUC2蛋白表达水平的下调可能与结直肠癌的发生密切相关，因此推测结肠正常组织到结肠息肉、结肠腺瘤的发展过程中，MUC2逐渐向腺体腔内扩散，杯状细胞分泌的MUC2逐渐减少，致密的内层黏液层逐渐疏松，黏膜保护功能衰退，从而导致结肠组织恶性病变。

1.4 评分标准 由2名对临床和病理资料不知情的病理学家独立对标本进行观察并评分。通过测定每个高倍视野下免疫染色细胞的百分数来计算黏蛋白的染色水平：染色细胞百分数小于5%记为0分；5%～30%记为+；30～60%记为++；≥60%记为+++。

项目建成后应坚决贯彻落实国务院《关于实行最严格水资源管理制度的意见》，严格实施取水许可和水资源有偿使用制度，强化水资源统一调度和利用等。充分考虑水资源承载能力，对于项目区及影响范围内符合流域或区域水资源规划及水量分配的新增取水，坚持用水总量平衡，把水资源总量作为项目实施的控制条件，应通过建设项目水资源论证制度、取水许可审批及监督管理、计划用水管理和水资源论证后评估、加强取水计量和强化监督管理等管理措施和手段，科学核定工程规模，严格落实水资源论证及批复要求，纠正水资源论证审批阶段存在的隐患，切实做到以水定需、量水而行、因水制宜，将项目取水纳入区域用水总量控制目标。

结肠息肉是黏膜过度生长所导致的，该病的进展与结肠癌的发生、发展密切相关。结肠息肉-腺瘤-腺癌的演变学说已被公认，且结肠增生性息肉和腺瘤性息肉都有癌变的可能，其中腺瘤性息肉的癌变可能性极高。

MUC1基因位于1q21-24染色体上，编码跨膜黏蛋白。MUC1也被称为上皮膜抗原，在整个胃肠道分泌上皮细胞的顶端表达。其在胃组织中的表达最强，在正常结肠、直肠黏膜中的表达较弱或不表达，而在包括结直肠癌在内的许多肿瘤组织或细胞中过表达[12-13]。之前的研究表明，MUC1的表达在结肠、直肠癌中显著上调，与肿瘤的发生、浸润、淋巴结转移、Duke分期及预后密切相关。且研究发现MUC1在结直肠正常黏膜、腺瘤性组织、腺癌组织中的表达逐渐增加[14]。本研究发现，正常结肠黏膜和增生性息肉中未观察到MUC1阳性表达，而在腺瘤性息肉中MUC1表达上调，提示MUC1的表达上调可能参与了结直肠癌的发生。过往研究表明，MUC1在胰腺癌、乳腺癌、肺癌、结直肠癌中的阳性表达通常显示出多种关键信号通路的激活[15-17]。本研究中，MUC1在腺瘤性息肉中阳性表达的上调说明，在结肠息肉恶性病变过程中，MUC1糖基化发生改变，这种变化改变其配体状态，随后激活下游细胞信号通路，如MAPK、PI3K/Akt及Wnt等途径，进而调控肿瘤细胞的侵袭、转移。

当前，我们正处于只争朝夕的新时代，没有时间让我们等待三五年再开展工作，需要我们马上就做。怎么办？经过调研分析，我认为最有效的就是自身努力了。比如说新疆监狱的警囚比十分低，是个很大的问题，怎么解决这个问题呢？有人说，申请中央编制？从申请，到批复，到招录，到培训，到上岗，到能真正发挥作用，这是一个漫长的过程，哪一个监狱的民警没有个三五年能真正成熟起来？可是，当前监狱存在的问题需要马上解决。我们就得顾全大局、上下齐心、内部挖潜调剂解决。司法所的建设也得这么干，需要上下同心、刀刃向内。

MUC5AC基因在具有MUC2基因的11p15.5染色体上形成簇，并在胃中编码分泌型黏蛋白。正常情况下，MUC5AC主要在正常胃黏膜上皮和窦腺中表达，在肠道中的表达较少或者不表达，而在绒毛和管状结肠直肠腺瘤中出现不同程度的表达。研究发现，MUC5AC在绒毛状腺瘤及管状腺瘤中均有表达，且在腺瘤和癌旁黏膜中，MUC5AC编码的抗原表型存在差异，与之前的研究一致[19]。本研究中发现，MUC5AC在正常结肠黏膜中未表达，而在增生性息肉和腺瘤性息肉中均有表达，且增生性息肉中MUC5AC阳性表达率显著低于腺瘤性息肉。提示MUC5AC在结肠息肉中的异常表达与增生性息肉向腺癌发展过程相关。在结肠息肉恶性病变过程中，随着腺瘤中分泌细胞异型增生程度的增加，细胞分泌MUC5AC发生变化，导致结肠黏膜性状发生改变，从而在结肠息肉恶性病变过程中发挥一定作用。

同样，MUC6基因通常在胃黏膜中表达。MUC6作为一种分泌型糖蛋白，在直肠黏膜中不存在，而只在绒毛和管状结肠直肠腺瘤中表达。与此一致，本研究中在正常结肠黏膜中未观察到MUC6阳性表达。OWENS等[20]评估了94例息肉中MUC6的免疫组织化学表达发现，所有腺瘤性息肉中均观察到MUC6的表达，而增生性息肉中未观察到MUC6表达，因此MUC6表达对腺瘤性息肉具有高度的特异性，可用作腺瘤内息肉评估的形态辅助。而本研究增生性息肉临床病例中未发现MUC6的阳性表达，与之前的研究一致。但在管状腺瘤和绒毛状腺瘤中MUC6的阳性表达率虽显著增加，分别为22.5%和37.5%，但未表现出对腺瘤性息肉类似的高度特异性。这可能是由于染色的程度和强度不一致，导致MUC6在个别情况下区分腺瘤性息肉和增生性息肉的特异性不可靠。

综上所述，在正常结肠黏膜中，MUC1、MUC5AC、MUC6均未观察到阳性表达，而MUC2均表现出阳性表达，与之前的研究结果一致。另外，虽然在管状腺瘤和绒毛状腺瘤中观察到MUC1和MUC6的高表达阳性率，但它们在增生性息肉中完全不存在，相比之下，MUC2在增生性息肉和腺瘤性息肉中均表现出较高的阳性表达率，且其在增生性息肉和腺瘤性息肉中的阳性表达率呈逐渐下降趋势。而MUC5AC虽在增生性息肉和腺瘤性息肉中均有表达，但在增生性息肉中的表达显著低于腺瘤性息肉。MUC1、MUC2、MUC5AC、MUC6在增生性息肉与腺瘤性息肉中阳性表达的差异性与增加的结肠息肉中黏膜或肌层黏膜侵袭风险相关，可作为临床诊断结肠息肉恶性发展过程的生物标志物，辅助临床诊断与治疗。但黏蛋白在结肠息肉向结直肠癌恶性病变发展过程中所涉及的相关作用机制尚不十分明确，有待深入研究。

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