急性肾损伤(acute kidney injury，AKI)是急危重症患者常见的合并症，有较高的死亡率和不良预后[1]。全世界范围内，每年约有2百万患者死于AKI，重症监护病房中死于AKI的患者比例高达50%～80%[2]，且存活AKI患者的预后也并不乐观，大约7.5%的AKI患者需要长期血液净化治疗[3]。而国内一项关于AKI的研究发现，约71.6%的AKI患者在诊断AKI当时或之前有肾毒性药物应用[4]，提示药物相关性AKI是亟需重点关注的临床问题。

目前关于中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的相关研究不仅聚焦于将其作为AKI早期诊断标记物，关于内源性及外源性NGAL在疾病发生发展以及干预治疗中作用的研究也逐年增多。近期有研究发现NGAL能够抑制心肌缺血后保护性的心肌自噬，从而加剧缺血诱导的细胞凋亡及心功能不全[5]，本课题组前期的研究发现，DDP致大鼠AKI病程早期即存在血、尿NGAL升高[6]，且肾小管上皮细胞凋亡与肾组织NGAL表达高度相关，而血、尿NGAL变化与肾小管上皮细胞凋亡是否存在相关性，尚未见报道。本研究通过建立DDP致大鼠AKI动物模型，探讨血、尿NGAL变化与肾小管上皮细胞凋亡的相关性。

从表2可知，处理2(4月25日移栽)与处理3(4月30日移栽)的产量之间无显著差异，但均显著高于处理1(4月20日移栽)；处理2的产值显著高于其余2个处理，而后两者之间无显著差异。3个处理之间在均价及上等烟比例均存在显著差异，均以处理1最高，处理2其次，处理3最低。总体上看，以处理2的经济效益最高。

1 材料与方法

1.1 实验动物 健康雄性Wistar大鼠36只，体质量200～220 g，由广西医科大学实验动物中心提供[动物许可证号SCXK(桂)2009-0002]。所有操作均遵循广西医科大学实验动物保护规范执行。

高校编辑出版学专业毕业生并不被市场编辑出版业所青睐和认可，两者之间的不兼容关系对创新人才的培养造成一定的难度，失衡的人才培养结构和单一陈旧的人才培养模式对于编辑出版业的发展产生了阻碍作用，这一问题已经引起编辑出版业的高度重视，多数人才培养模式都没有达成统一共识，对于创新型人才培养没有做出明确的回答。笔者从自身的角度来看，基于对社会编辑出版业发展形势的预测，应当从加强培养编辑出版人才的创新能力，已适应新时代下社会经济的发展，为促进编辑出版业的发展打下坚实的基础。

1.3.3 观察指标及方法 采用ELISA检测血清及尿液NGAL水平；行HE染色，光镜下观察肾脏病理组织形态学改变；应用TUNEL检测肾组织中细胞凋亡情况。

1.3 方法

2.3 六组血清及尿NGAL比较 与CN组相比，CP 12 h组尿NGAL升高，差异有统计学意义(P＜0.05)；CP 24 h组及CP 48 h组血、尿NGAL升高，与CN组相比，差异有统计学意义(P＜0.05)；CP 96 h组血、尿NGAL下降，同CN组相比，差异无统计学意义(P＞0.05)，见表2。

针对第一次全国水利普查的特殊性、重要性，黑龙江省勃利县地下水取水井专项普查组依据普查各项数据填报要求和清查成果，制定了普查工作静态和动态数据采集实施方案。地下水取水井专项普查工作各项数据能否真实、准确地获取，是决定普查成果填报质量的关键因素。

1.2 药品与试剂 顺铂注射液(江苏豪森药业，批号 120318)，TUNEL 试剂盒(美国 Roche)，大鼠 NGAL ELISA试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)。

2.2 六组肾组织细胞凋亡情况比较 应用TUNEL法检测细胞凋亡，每例标本随机挑选5个400×视野，计数深棕色细胞核，取平均数计为凋亡细胞数，见表1。

2 结果

药物相关AKI是临床上常见的AKI原因之一，约71.6%的AKI患者在诊断AKI当时或诊断之前有肾毒性药物应用[4]。2007-2012年日本肾脏病登记处(J-KDR)共登记231例药物相关肾损伤，占总病例数的1.42%，其中前四位致肾损伤的药物分别为非甾体抗炎药(25.1%)，抗癌药物(18%)，抗生素(17.5%)，造影剂(5.7%)[7]，可见药物相关性AKI已经成为亟需重点关注的临床问题。

1.4 统计学方法 应用SPSS23.0软件分析所有数据，计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用独立样本t检验，相关性分析采用Spearman分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

  

图1 各组大鼠肾组织病理HE染色

 

注：A、B，CN组，肾小球及肾小管形态正常；C，CP 24 h组，肾小管上皮细胞空泡变性；D，CP 48 h组，肾小管损伤进一步加重，刷状缘脱落，管腔内见少量蛋白管型；E，CP 144 h组，肾小管上皮细胞扁平，管腔扩张，片状核固缩，部分脱落于管腔内(A：HE×100；B～E：HE×200)。

1.3.1 动物模型建立 依随机数表法分为六组，每组各6只大鼠，分别为盐水对照组(CN组)、顺铂12 h组(CP 12 h组)、顺铂24 h组(CP 24 h组)、顺铂48 h组(CP 48 h组)、顺铂96 h组(CP 96 h组)、顺铂144 h组(CP 144 h组)。

1.3.2 标本处理 于各时间点取相应组别大鼠，采用乙醚吸入麻醉后，打开腹腔，门静脉穿刺取血离心，取血清-80℃冻存备检。双肾置于4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，切成3 μm组织切片，待行HE染色及TUNEL检测。

2.4 肾组织病理损伤与血清及尿NGAL的相关性 Spearman相关分析提示肾组织细胞凋亡同血清及尿NGAL均呈显著相关，相关系数分别为r=0.655，P＜0.01；r=0.657，P＜0.01。

 

表1 肾组织细胞凋亡情况(±s)

  

注：与CN组比较，aP＜0.05。

 

CN组CP 12 h组CP 24 h组CP 48 h组CP 96 h组CP 144 h组6666660.67±0.8211.5±2.132.5±8.568.1±11.051.0±8.129.0±2.8-11.9117.0327.3915.1524.14-0.000a 0.000a 0.000a 0.000a 0.000a

 

表2 血、尿NGAL含量变化(±s)

  

注：与CN组比较，aP＜0.05。

 

CN组CP 12 h组CP 24 h组CP 48 h组CP 96 h组CP 144 h组6666661.8±0.42.5±0.53.1±0.66.2±1.22.1±0.51.9±0.6-3.375.6311.441.150.56-0.008a 0.000a 0.000a 0.2810.58617.2±5.222.8±6.738.5±10.165.1±6.018.8±9.318.1±8.7-2.155.6418.440.530.31-0.0580.001a 0.000a 0.6070.763

3 讨论

2.1 六组肾组织病理变化比较 同CN组比较，CP 12 h组及CP 24 h组肾小管上皮细胞有空泡变性及刷状缘脱落；CP 48 h组肾小管损伤进一步加重，有少量核固缩，管腔内见少量蛋白管型；CP 144 h组可见明显肾小管坏死，肾小管上皮细胞扁平，刷状缘脱落，管腔扩张，片状核固缩，部分脱落于管腔内，见图1。

顺铂肾毒性是许多肾毒性药物作用机制的组合，涉及例如药物转运、多种信号途径活化、触发炎症反应等；另外，顺铂可以直接诱导近端及远端小管上皮细胞的损伤，因此是研究AKI的理想模型[8]。目前认为DNA加合物的形成、线粒体功能障碍、氧化应激、炎症反应、自噬、细胞凋亡、坏死等均参与顺铂致AKI的发病[9]。

已有较多关于NGAL作为AKI早期生物学标记物的临床和基础研究，然而NGAL本身是否参与AKI的发病机制，相关研究报道较少，有研究在脂多糖致大鼠AKI的动物模型中观察到，应用脂多糖后3～12 h肾小管上皮细胞NGAL的mRNA水平明显升高，且肾小管上皮细胞NGAL mRNA升高的过程与肾损伤相平行[10]。NGAL为有抑菌特性的载铁糖蛋白，近年来，越来越多的证据表明NGAL可能涉及到细胞的存活、炎症、基质降解和氧化应激等病理生理过程[11-15]。本课题利用腹腔注射DDP建立大鼠AKI的动物模型，初步探讨血、尿NGAL表达与肾脏病理损伤的相关性。

学习电解原理和解决电解相关的问题时,每一届都会有较多同学产生畏难心理,觉得课本上电解原理的内容不多、容易理解,但课外相应习题不好做,考试试题难度更大。造成这种情况的原因有:第一,虽然课本中相关内容多,但由于电解原理在生产、生活中有广泛应用,所以相应习题、试题往往有联系生产和生活的实际情境,涉及较多的拓展性内容;第二(也是主要原因),对电解原理的认识还不全面,有认识误区,遇到电解问题时这些认识误区会影响同学们的思考角度、思维路径和认识深度,导致产生错误。解决的方法就是要突破认识误区,重视从各个方面收集证据,提高基于证据(而不是基于记忆)作出推理判断的能力。

本研究结果发现，同CN组相比，应用DDP 12 h后肾组织凋亡细胞增加，48 h显著增加；而应用DDP后144 h，肾组织病理HE染色显示肾小管上皮细胞坏死。提示DDP致大鼠AKI病程中的不同阶段，组织损伤方式可能不同：在病程早期阶段，肾损伤形式表现为细胞凋亡；在病程中后期，肾损伤形式表现为肾小管坏死。同CN组相比，应用DDP后12 h尿NGAL即显著升高；应用DDP后48 h，血、尿NGAL水平均显著升高；肾组织细胞凋亡同血、尿NGAL表达显著相关，提示NGAL可能参与了AKI病程中的细胞凋亡。而血、尿NGAL与AKI发病的机制研究值得进一步探讨。

建筑物最重要的就是地基，只有良好的地基才能为建筑物的质量安全提供强有力的保障，所以在进行房屋地基建设之前一定要做好勘探工作，选择最为合适的地点建造建筑物，并且要对场地的土体情况、土质及当地的自然气候等进行深入的研究，因地制宜地采用合适的地基处理技术，要充分确保地基施工的质量。只有做好地基处理，才能够为更多、更好的建筑物提供更优秀的支撑作用，从而提升建筑行业的安全性，在确保经济效益的同时保障社会效益，促进我国建筑行业的发展。

综上所述，本研究发现DDP致AKI动物模型中，肾组织细胞凋亡同血、尿NGAL变化显著相关，提示需重视NGAL在AKI发病机制中的作用。本研究未深入探讨NGAL参与AKI的具体分子机制，未观察NGAL是否同AKI远期预后相关，以上均有待于我们进一步的研究及临床验证。

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[6] 孟晓燕,郑妮,张敏,等.顺铂致大鼠急性肾损伤血、尿NGAL变化及还原型谷胱甘肽干预的研究[J].中国现代医学杂志,2014,24(33):15-18.

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