低氧性肺动脉高压是慢性肺源性心脏病和慢性高原病的诱发因素[1]。急性、慢性缺氧可分别导致肺血管收缩和重塑，研究发现经高脂类食物喂养、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因、载脂蛋白E基因敲除的小鼠易发生肺动脉高压和右心室肥大，而使用相应高脂类抑制剂可降低肺动脉高压和改善肺血管重塑，说明脂质代谢对低氧性肺动脉高压有一定的影响[2]。在以往研究中，高脂类食物喂养和相关基因敲除的小鼠本身脂质代谢就会发生异常，而在低氧条件下的肺动脉高压小鼠脂质代谢是否异常尚鲜见报道。本研究对低氧性肺动脉高压小鼠和常氧饲养小鼠等相关指标进行对比，说明低氧性肺动脉高压的小鼠体内脂质含量异常与肺动脉高压有关，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 试验动物及试剂

互联网金融的日新月异给我们的生活带来了巨大的变化，现今货币紧跟互联网金融科技创新的脚步，移动支付逐渐普及，数字货币的出现成为大势所趋。2018年9月16日，清华大学计算机系联合阿尔山金融科技公司共同推出了法定数字货币应用试验，并在校园咖啡馆内进行了虚拟货币APP的实际应用。

选取SPF级雄性C57BL/6小鼠30只，体质量20～27 g；小鼠血浆总胆固醇酶联免疫吸附(ELISA)检测试剂盒；低密度脂蛋白酶联免疫吸附(ELISA)检测试剂盒；高密度脂蛋白酶联免疫吸附(ELISA)检测试剂盒,所有酶联免疫吸附(ELISA)检测试剂盒均购自江苏绿叶生物科技有限公司，MM-0655M1；Masson染色试剂盒(Solarbio ，G1120)。

1.2 试验方法

1.2.1 小鼠低氧性肺动脉高压模型制备 (1)常规组：小鼠置于常压饲养动物舱内，舱内充入循环空气23 h/d，舱内卫生清洁1次/d，光照12 h/d，常规饲养方式，连续3周[3]。(2)模型组：小鼠置于常压饲养动物饲养舱内，首先用氧浓度为14%的低氧气体进行1周的适应性训练，正式开始训练后，将舱内充入氮气使氧浓度维持在9%～11%，二氧化碳浓度<3%，连续3周，其余与常规组相同。在低氧环境下，小鼠的生存状态良好，无死亡发生。

模型组小鼠HDL-C为(262.0±37.3)mg/L，明显低于对照组(P<0.05)；模型组和对照组TC和LDL-C比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

1.2.3 血流动力学检测 小鼠在低氧环境下3周后，禁食禁水12 h，麻醉后取仰卧位，颈中部开口，钝性分离肌肉和组织，分离出右颈外静脉，做一切口，插入Millar导管，经右颈外静脉进入右心房，到达右心室后，利用右心导管法测量小鼠右心室收缩压[4]。右心室收缩压可间接反应小鼠肺动脉压。

放血处死小鼠后显微镜下取出心肺，分别取右心室和左心室加室间隔的重量，并计算出右心室重量/(左心室+室间隔重量)作为反映右室肥大的指标。

1.2.4 血浆脂质检测 清晨，取空腹小鼠肱静脉血，静置20 min后放入离心机中以3 000 r/min(离心半径r=6 cm)离心15 min，取上清液，利用ELISA法测定血浆TC、HDL-C、LDL-C含量[5-6]。试剂配制按试剂盒说明书。

在《教育部关于全面深化课程改革，落实立德树人根本任务的意见》中，明确界定了核心素养，即学生应具备的适应终身发展和社会发展需要的必备品格和关键能力.目前，教育部正在组织专家对高中课程标准进行修订，要求把学科核心素养作为修订课程标准的主线，围绕学科核心素养制订教学内容、评价标准和教材编制.在这样一个大环境下，对数学教学的评价提出了新的要求，不仅要考察学生的基本知识和基本技能，更重要的是要考察学生核心素养的发展.因此，中考试题不能仅仅以考察知识为目标，而应依赖数学知识和技能考察学生的数学核心素养水平.以考察数学抽象、逻辑思维、数学建模、数学运算、几何直观、数据分析为导向的评价，是一种必然的趋势.

有关马克思哲学终极关怀维度的深入探讨开展于本世纪。俞吾金在《人文关怀：马克思哲学的另一个维度》一文中，旗帜鲜明地提出了“人文关怀是马克思哲学的基本维度之一”的观点。由于对实践概念理解的差异，杨学功、陆剑杰、徐长福等学者分别就马克思哲学的终极关怀维度与之展开讨论，但对于马克思哲学的终极关怀维度的存有是没有分歧的。

1.3 统计学处理

2.5 相关性分析

2 结果

模型组小鼠右心室收缩压和右心室肥大指数分别为(40.12±8.22)mmHg(1 mmHg =0.133 kPa)、(0.352±0.050)，明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

2.1 模型组和对照组小鼠右心室收缩压和右心室肥大指数比较

光电提水亦称为光伏提水。利用太阳电池组件，通过控制器，直接(也可配置蓄电池)驱动潜水泵提水。牧区地下水埋深一般在10m以上，最为缺水的季节正是太阳能的峰值期，利用光伏提水非常适宜，随着光伏组件成本的不断下降和泵站关键技术的解决，在人畜饮水、灌溉人工草场和农田等领域具有广阔的前景[5]。

 

表1 模型组和对照组小鼠右心室收缩压和右心室肥大指数比较(x±s)

  

组别动物数右心室收缩压(mmHg)右心室肥大指数对照组1522.47±7.630.231±0.041模型组1540.12±8.220.352±0.050t值-6.095-7.248P值<0.05<0.05

注：右心室肥大指数=右心室重量/(左心室+室间隔重量)。1 mmHg=0.133 kPa

2.2 模型组和对照组小鼠肺组织小血管重塑

2组肺组织Masson染色显示，模型组小鼠肺小动脉血管壁明显较对照组增厚，肺内细小血管重塑明显。见图1。

  

图1 模型组和对照组小鼠肺组织Masson染色(×400)

2.3 模型组和对照组小鼠血浆血脂水平比较

1.2.2 Masson染色 先将小鼠肺组织取出灌注，将肺全部浸没在4%多聚甲醛的保存瓶中，4 ℃保存，标本经固定后，脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、摊片，然后将石蜡切片进行常规脱蜡，向切片滴加一滴Masson复合染色液，染色5 min，蒸馏水冲洗；滴加一滴磷钼酸染色10 min，甩去液体，不洗；滴加一滴苯胺蓝染色5 min，蒸馏水冲洗；滴加一滴分化液，分化30 s，脱水、透明、封片[4-5]。

1.2.5 实时定量PCR检测 Trizol一步法提取肝组织中的总RNA，Quant Reverse Transcriptase一步法逆转录成cDNA，TaqMan探针法进行定量PCR扩增。PCR扩增条件：95 ℃预变性15 min，95 ℃变性10 s，60 ℃退火20 s，进行40个循环。每个样本做3个复孔，以10倍稀释模板梯度样本进行实时定量PCR反应，目标基因与内参照基因扩增效率接近100%情况下，以内参照基因β-actin基因作为标准，结果采用△△CT法分析，计算HMGCR、LDLR及ABCA1等基因的相对表达水平。

 

表2 模型组和对照组小鼠血浆血脂水平比较(x±s)

  

组别动物数TC(mmol/L)LDL-C(mg/L)HDL-C(mg/L)对照组152.19±0.34428.1±79.5324.0±48.1模型组152.21±0.42474.3±88.2262.0±37.3t值-0.143-1.5073.945P值>0.05>0.05<0.05

注：TC：总胆固醇，LDL-C：低密度脂蛋白胆固醇，HDL-C：高密度脂蛋白胆固醇

2.4 模型组和对照组小鼠脂质代谢相关基因表达比较

将模型组和对照组小鼠右心室收缩压及右心室肥大指数与血浆LDL-C、HDL-C、TC及脂质代谢相关基因进行Pearson相关分析，结果显示：右心室收缩压与HDL-C、ABCA1和LDLR基因表达呈负相关(r=-0.571、-0.422和-0.317，P<0.05)，右心室肥大指数与LDL-C、HDL-C、TC及脂质代谢相关基因水平无相关性(P>0.05)。

 

表3 模型组和对照组小鼠肝组织脂质代谢相关基因表达比较(x±s)

  

组别动物数HMGCR基因表达ABCA1基因表达LDLR基因表达对照组150.932±0.3320.974±0.3011.038±0.322模型组150.895±0.4210.554±0.2110.611±0.178t值0.2674.3564.495P值>0.05<0.05<0.05

数据整理分析采用SPSS 19.0软件，计量资料采用均数±标准差(x±s)表示，组间比较使用t检验，相关性采用Pearson相关分析。P<0.05表示差异具有统计学意义。

模型组小鼠ABCA1基因和LDLR基因表达分别为0.974±0.301和1.038±0.322，明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；模型组和对照组HMGCR基因表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

将“被”视作副词既可以对“XX”成分多样性做出合理的解释，又可以避开将“被XX”结构视作是对典型“被”字结构的套用所带来的一系列问题，譬如“被”后施事论元的出现与否问题、“被XX”能否还原为主动形式等问题。

麦草浆制浆造纸废水污染物成分复杂[1- 2]，主要污染物包括悬浮物、易生物降解有机物、难生物降解有机物、酸碱物质和毒性物质[3- 4]，可生化性差[5]。随着废水排放限值要求的提高，很多制浆造纸废水处理厂面临提标改造的问题，河南一林造纸厂麦草浆制浆造纸废水采用混凝-加核絮凝[6- 8]组合工艺处理后，出水CODCr仍有残留。目前，对造成制浆造纸废水处理后的出水CODCr痕量成分分析较少。

3 讨论

肺动脉高压是以肺血管收缩、微血栓形成、内膜重塑为特征的一类进行性疾病，可引起右心功能障碍或衰竭，严重时可导致患者死亡[7]。肺动脉高压发病机制复杂，根据其发病原因的不同，临床上主要分为5种类型。低氧性肺动脉高压是其中的一种，严重影响慢性阻塞性肺疾病(COPD)、慢性支气管炎、肺气肿、睡眠呼吸暂停综合症等患者的预后[8-9]。脂质代谢异常可由遗传、激素、酶、神经体液等因素造成，当发生脂质代谢异常时，血液及其他组织器官中脂质和代谢产物将会发生异常变化。

临床和动物试验表明，肥胖、高脂血症、胰岛素抵抗与肺动脉高压、肺血管重塑的发生发展密切相关[10]。以往的研究中大多以高脂类食物喂养和相关脂质代谢基因敲除的小鼠为研究对象，从而说明脂质代谢异常参与了小鼠肺动脉高压的形成，但并未对低氧条件下肺动脉高压小鼠脂质代谢是否异常加以说明[11-12]。本研究将低氧性肺动脉高压小鼠和常规氧小鼠之间的指标进行对比，探究低氧条件下肺动脉高压小鼠体内脂质代谢情况。载脂蛋白E在脂蛋白的转化和代谢中发挥着重要作用，他可抑制血小板生长因子对平滑肌细胞的增殖、迁移作用。本试验发现，低氧性肺动脉高压小鼠体内载脂蛋白E数量较少，小鼠更容易发生动脉粥样硬化，因此低氧可导致脂质代谢异常[13-14]。

本研究在小鼠低氧3周后，利用Millar导管进行右心导管术，通过测量小鼠右心室收缩压来间接反映肺动脉压。称取LV+S和RV的重量，计算右心肥大指数RV/(LV+S)。由试验结果可知：模型组右心室收缩压和右心室肥大指数高于对照组，说明小鼠低氧性肺动脉高压模型制备成功。通过观察2组肺组织小血管发现模型组的血管管壁明显增厚，说明低氧性肺动脉高压可引起肺血管的重塑。HDL是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，血浆中HDL的含量与冠心病的发生呈负相关，HDL具有逆转运胆固醇、抗氧化、促纤溶、抗血栓等作用[15]。在本试验中模型组HDL的含量明显低于对照组，说明HDL的降低可能是影响小鼠低氧性肺动脉高压发生和发展的重要因素，而模型组TC和LDL-C与对照组相比虽有少量升高，但总体差异不明显，可能是因为TC的来源较为广泛，既能体外摄取，又能体内合成，所以与对照组相比低氧环境对其影响较小，而低氧又能将LDL氧化为ox-LDL，所以TC、LDL的含量上升不明显。血浆胆固醇主要由食物中摄取的外源性胆固醇和肝脏中合成的内源性胆固醇组成。其中HMGCR作为内源性胆固醇合成过程中的关键酶，影响内源性胆固醇的生成，成为抗动脉粥样硬化的主要靶点。HMGCR基因上调，转录合成的HMGCR蛋白增多，内源性胆固醇合成增加。参与内源性胆固醇摄取和消除过程的主要物质是一种膜镶嵌式蛋白-LDLR。其介导和调控LDL的胞吞过程。上调LDLR基因表达可使血中LDL水平降低。本研究结果显示低氧肺动脉高压模型组小鼠LDLR基因表达下调，提示可清除胆固醇的LDL生成减少。本试验在低氧条件下研究肺动脉高压小鼠体内脂质代谢的变化过程，比以往研究方向更详细。本试验中小鼠低氧性肺动脉高压模型制备采用23 h/d、连续低氧3周，操作更简单、方便，有利于小鼠的长期观察。不足点：未对模型组和对照组小鼠肝组织脂质代谢相关基因表达的变化做进一步探究，可在今后的研究中加以描述。

冷却后调整齿圈2位置，然后进行第二次淬火，淬火感应圈1的短直角边8到齿圈2的非倒角端面7的落差为2mm，加热时间设定为5.7s，冷却时间设定为10s，同样，冷却时间和喷水压力参考第一次淬火。

综上所述，低氧性肺动脉高压小鼠体内脂质代谢可能参与了小鼠低氧性肺动脉高压的发生发展。

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