在我国，恶性肿瘤已经成为严重威胁人类健康的疾病，而在女性患者当中，乳腺癌已不容忽视，而且发病患者的年龄有年轻化的趋势[1]。有相关数据[2，3]显示：全国肿瘤登记地区首居第1位的女性恶性肿瘤是乳腺癌，其发病率高达42.55/10万，而城市与农村发病率并不相同，前者为51.91/10万，后者为23.12/10万。虽然我国的乳腺癌发病相对于美国等发达国家相比率低，但现在仍然以3%的比例增高，尤其以沿海城市和一线城市明显[4，5]。在人体多组织中都有脂肪量和肥胖相关基因(FTO)的表达，而在下丘脑中高度表达程度明显高于其他组织[6]。下丘脑对调节人体能量均衡和控制食欲方面有重要的作用。 有研究表明FTO基因的变异与乳腺癌的发病风险度有相关性。激素受体阴性患者比阳性患者的乳腺癌发病风险度高[7]。EZH2是一种对恶性肿瘤转移抑制基具有极强抑制作用的基因。并且会加速肿瘤肿瘤组织的转移和浸润。本文探讨乳腺癌组织中FTO与EZH2的表达情况及其二者的相关性。

1　资料与方法

1.1　一般资料

选取2010～2015年期间在佳木斯大学附属第一医院肿瘤外科确诊为乳腺癌的女性患者100例为研究对象(临床资料完整，为为合并其他疾病的原发肿瘤，术前针对原发病未采取任何治疗措施)，组织学上乳腺癌分为浸润性乳腺癌、导管内原位癌，分别为 65例, 35例 。实验组和对照组随机分组，每组样本各50例，两组平均年龄分别为(37.2±15.3)岁、(36.5±14.3)岁。对比两组所得资料，差异在统计学上没有意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2　试剂

浓缩型鼠抗人EZH2单克隆抗体(Cell Signaling Tech-nology，USA)、FTO peptide、SP试剂盒及 DAB显色剂均购与福州迈新公司。

1.3　实验方法

FTO和EZH2的表达采用Envision免疫组织化学染色的方法，用甲醛溶液将病理标本固定后脱水包埋，每例标本连续切片5张，厚度均为4μm ,然后进行HE染色和SP染色。用PBS代替一抗作阴性对照，阳性对照用已知的阳性切片代替，详细的操作步骤按试剂盒进行。

1.4　免疫组织化学结果判定

结果判定:阳性结果判断: 我们将细胞膜、细胞浆呈棕黄色者判为阳性。首先在低倍镜下详细的对组织切片进行观察，而后在200倍的光镜下随机的观察5个视野。通过将细胞的阳性的强度评分和阳性细胞的百分比评分相加来综合判断染色结果[8]。

本实验试图通过免疫组织化学(SP)法来检测FTO、EZH2在乳腺癌组织中的表达情况,结果显示:FTO和EZH2均在癌旁组织中的表达较低,而在乳腺癌组织表达较高。两者相比差异在统计学方面有意义(P<0.05)。提示FTO和EZH2可能参与了乳腺癌发生的早期分子生物学事件,可能是肿瘤患者预后差的一个危险因素，临床分期为Ⅱ期和Ⅲ期乳腺癌中的FTO和EZH2阳性表达率明显高于0期和Ⅰ期(P<0.05)，在有淋巴结转移的乳腺癌患者FTO和EZH2显著高于没有淋巴结转移的乳腺癌患者(P<0.05)。提示二者可能会随着患者的临床分期的增加而增加，而随着淋巴结转移情况的增加，可能伴随着二者的表达增强，这表明二者可能与乳腺癌的侵袭和转移有着密不可分的关系。在乳腺癌中，FTO与 EZH2表达成正相关(Rs=0.46，P<0.05)。通过研究发现FTO和EZH2可能存在某些交叉点，并共同对机体恶性肿瘤细胞有一定的诱导作用。在恶性肿瘤的发生和发展过程中，FTO和EZH2占据了不可忽视的地位,但具体的作用机制尚不明确。本实验研究中阐明FTO和EZH2均对结乳腺癌的浸润转移有着密切关系,对明确与乳腺癌的发生、发展相关因素的研究有重要的意义。有望成为今后肿瘤治疗的靶点开展进一步研究,在乳腺癌的诊断和治疗上，二者有望为其寻求新的路径。

见表1。

“云石？挖掘云石，那可是我的使命呢。”丁达插话道，“不过，我好像要先处理眼前这堆麻烦。”他皱了皱眉头，冲壶天晓大喊道，“壶天晓，把我的腿还给我！”

2　结果

2.1　FTO和EZH2在乳腺癌和癌旁组织中的表达

FTO和EZH2呈棕黄色表达于细胞膜或者细胞浆，乳腺癌FTO的阳性表达率分别为(87%)87/100，癌旁组织FTO的阳性表达率为(13%)13/100，差异在统计学上有意义(P<0.05)，乳腺癌中EZH2的阳性表达率分别为(84%)84/100和癌旁组织中EZH2的阳性表达率分别为(21%)21/100，经统计学分析，差异有意义(P<0.05)。

2.2　FTO和EZH2的表达和乳腺癌的临床病理因素的相关性

采用SPSS17.0软件，阳性结果进行χ2检验, FTO和EZH2之间的相互关系用Spearman等级相关进行分析 ,取双侧，α=0.05，P<0.05时有统计学意义。

 

表1　FTO和EZH2的表达和乳腺癌的临床病理因素的相关性

  

临床病理特征nFTO阳性表达阳性数阳性率(%)χ2值 PEZH2阳性表达阳性数阳性率(%)χ2值 P年龄(岁) <45423685.70.106 >0.053890.50.654>0.05 ≥45585187.94679.3临床分期 0期+Ⅰ期473778.75.371 <0.054595.79.101<0.05 Ⅱ期+Ⅲ期535094.33973.6淋巴结转移 (+)443579.55.318 <0.053375.04.735<0.05 (-)565294.65191.1

2.3　乳腺癌中FTO的表达和EZH2的表达的相关性分析

最近发现的FTO 被许多学者认可为一种与肥胖有着密切关系基因,有研究表明，超重和肥胖在增加糖尿病、高血脂、冠心病等疾病发病率的同时也能增加某些癌症的发病率、病死率。并且肥胖妇女绝经后发生乳腺癌的概率比非肥胖妇女增加，这可能是因为血清二轻基雌激素酮浓度增高所致。也有部分学者研究证实，绝经后女性患乳腺癌的风险与体重有一定的正相关性。国内的李泓澜等[9]的研究表明，绝经后女性患乳腺癌的风险性与体重、体重指数、腰臀比等有正相关性。也有研究表明患者疾病诊断前的 BMI水平与乳腺癌的复发与死亡相关，BMI的增加比率与乳腺癌的死亡风险率的增加呈正相关。EZH2(Enhancer of zeste homolog 2)基因是PcG家族的一个重要的组成部分，可形成多蛋白复合体,经过对染色体的修饰作用从而维持同源盒基因的沉默状态,最终导致肿瘤产生[10]。基因的过度激活或抑制，即基因的转录系统的调节失衡,都可能会导致肿瘤的发生。

 

表2　FTO与EZH2蛋白表达之间的关系

  

组织FTO阳性阴性Rs值PEZH2阳性7860.46<0.05阴性97

3　讨论

在乳腺癌中，FTO与 EZH2表达成正相关(Rs=0.46，P<0.05) ，见表 2。

1. 5　统计学方法

为此，笔者结合当前水稻高速插秧机的工作特点，开发了基于插秧机插植部倾角检测的可横向仿形的秧苗插深自适应调节系统，并在虚拟仿真实验平台上开展了该系统静态和动态实验研究，力图解决插秧盘随水田表面横向起伏引起的秧苗插植深度不一致现象，确保机插质量稳定，实现浅栽、稳定、高产。

参考文献：

[1]李壮，田寅，苏俊强，等．GRP94、Caspase-9在乳腺癌中的表达及意义[J]．黑龙江医药科学，2015，38(4): 89-91

[2]李健,李庆章.小鼠乳腺发育、泌乳和退化的组织形态学[J].东北农业大学学报,2007,38(2):196-201

[3]孙艳霞.新乡市城镇妇女乳腺癌筛查临床分析[J].当代医学, 2013,(23):107-108

[4]Fan L,Strasser-Weippl K, Li JJ，et al. Breast cancer in China[J].Lancet Oncol，2014,15:279-289

[5]Song F, He M,Li H，et al.A cancer incidence survey in Tianjinrthird largest city in China-between 1981 and 2000[J].Cancer Causes Control，2008,19:443-450

[6]Fredriksson R, Hagglund M,Olszewski PK，et al. The obesity gene, FTO, is of ancient origin, up-regulated during food deprivation and expressed in neurons of feeding-related nuclei of the brain[J]. Endocrinology，2008,149(5):2062-2071

[7]Michailidou K,Hall P,Gonzalez-Neira A，et al.Large-scale genotyping identifies 41 new loci associated with breast cancer risk[J]. Nature Genetics，2013,45:353-361

[8]侯艳妮，李义强，周昱，等.LGR5、Nodal蛋白在乳腺癌浸润过程中的表达及与血管生成的关系[J].黑龙江医药科学，2016,39(4):31-33

[9]李泓澜，高玉堂，李奇，等.身体测量指标与女性乳腺癌关系的前瞻性队列研究[J].中国流行病学杂志，2006，27(6)：488-493

[10]包合新,李建国,邢桂滨.EZH2和Bmi-1基因在结直肠癌组织中的表达及其意义[J].黑龙江医药科学，2016,39(1):10-12