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肝再生过程中胆汁酸对Caveolin-1表达的影响①

更新时间:2009-03-28

肝再生指的是由于手术、感染、重度、创伤等情况后,由肝细胞活化、分裂及脂质代谢形成的细胞反应[1]选T诒狙芯慷浴XR能够依据胆汁酸等肝代谢产物的浓度调整肝脏的大小或肝细胞再生。相关研究表明[2]眩現XR的表达异常对肝细胞的增殖造成阻碍,且Caveolin-1又能够通过脂肪酸促进细胞增殖。所以本研究采用葡萄糖及胆酸喂养肝部分切除术后的大鼠,从而证明FXR与Caveolin-1在肝再生过程中表达的相关性。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

选取150只雄性Wistar大鼠,大鼠均为6周龄,平均体质量为(154.6±18.7)g。将所有大鼠根据切除肝脏的比例50%、70%、90%分为I组、Ⅱ组、Ⅲ组3个组,以及术后喂养方式(胆汁酸、葡萄糖)分为A、B两组。将所有大鼠称重,在麻醉满意后取仰卧位并固定于手术台上,采用经典术式进行手术,使用7号丝线在中叶蒂部及肝左叶进行结扎。以眼科剪切除肝中叶及左叶,切除比例根据事先确定的比例而定。在检查无出血后缝合腹壁,并关闭腹腔。术后将实施葡萄糖喂养的大鼠设为A组,将实施胆汁酸喂养的大鼠设为B组,在两组术后24h、48h及72h三个时间点进行断头取肝。

1.2 方法

1.2.1 肝细胞PCNA检测方法

肝细胞增殖细胞核抗原(PCNA)采用免疫组织化学染色检测,PCNA标记指数以随机取高倍镜视野中1000个以上细胞,PCNA阳性核的百分数=阳性核数/计数的肝细胞总数×100%。将已知阳性针刺肝组织为阳性的大鼠作为对照。

加强与其他国家之间救助演习的力度。这里的合作对象不应局限于周边国家,更应重视与已经或即将同我国缔结海上搜救协定的国家之间的合作。围绕着搜救国协调权的行使冲突,这样做的积极意义在于:

A组各组的各时间点PCNA均低于B组,差异显著(P<0.05)。见表2。

关于方程的教学,在20世纪90年代末,陈重穆先生就提出了一个观点:“淡化形式,注重实质”。对于方程而言,要淡化的是“含有未知数的等式”这一定义。他指出,“不必在文字叙述上下功夫,更不要把这些叙述当成方程的正式定义,予以拔高”[1]。张奠宙先生也多次撰文强调这一点,2011年,他对小学数学中的一些科学性问题进行了分析,其中就指出这一定义“只谈了方程的表面,实在不重要”。同时,他还指出方程的本质是为了求未知数,在已知数和未知数之间建立的一种等式关系[2]。2014年,他再次撰文强调了这一点[3]。

采用统计学软件SPSS19.0分析,两组治疗依从性用n(%)表示,行χ2检验,两组护理前后生命质量评分、SAS、SDS评分均用表示,行t检验,P<0.05为差异有统计学意义。

(三)属于港口作业危险货物范围的《危险化学品目录》中所列物质,不属于本规定第五十条第一款规定的船载危险货物范围的,船舶载运时仅需符合《危险化学品安全管理条例》的有关规定。

1.3 统计学方法

选取500mg样品于组织匀浆缓冲液中,1200r/min离心,时间为15min,然后取上清储备。蛋白浓度根据Bradford法以BSA为标准测定,算出蛋白浓度后取100mg总蛋白,沸水浴后实施10%SDS-PAGE。然后实施Western blotting,再进行吸光度定量分析,从而得出FXR和Caveolin-1表达的蛋白表达水平。

2 结果

2.1 6组存活率对比

A组各组的存活率相比于B组各时间段均较低,差异显著(P<0.05)。两组存活率随着肝切除的比例及时间的推移而逐渐降低。见表1。

 

1 6组存活率对比[n(%)]

  

组别术后24h术后48h术后72hA组(n=75)62(63.3)57(76.0)49(65.3) I组(n=25)24(96.0)22(88.0)20(80.0) Ⅱ组(n=25)22(88.0)19(76.0)16(65.0) Ⅲ组(n=25)16(65.0)16(65.0)13(52.0)B组(n=75)70(93.3)*63(84.0)*60(80.0)* I组(n=25)25(100.0)23(92.0)21(84.0) Ⅱ组(n=25)23(92.0)22(88.0)20(80.0) Ⅲ组(n=25)22(88.0)18(72.0)19(76.0)

注:与A组相比,*P<0.05。

2.2 6组PCNA比较

1.2.2 Western blotting 检测方法

该异常带北部延出界外,与迪彦钦阿木大型钼多金属矿相连,具备良好的成矿潜力。根据地物化综合剖面测量,选择较好的激电异常地段,在16线布设了激电测深(图3)。

 

2 6PCNA比较

  

组别术后24h术后48h术后72hA组(n=75)23.07±4.5916.28±2.5511.48±1.77 I组(n=25)24.32±4.9419.33±3.0713.25±1.96 Ⅱ组(n=25)22.31±4.5017.29±2.4712.00±1.82 Ⅲ组(n=25)20.87±4.2114.92±2.1010.82±1.63B组(n=75)42.06±4.71*30.24±4.29*21.54±4.26* I组(n=25)46.26±5.17*33.82±4.90*26.54±4.13* Ⅱ组(n=25)41.67±5.62*30.74±4.68*22.38±4.16* Ⅲ组(n=25)40.07±4.43*27.64±4.66*19.93±4.25*

注:与A组相比,*P<0.05。

2.3 6组FXR蛋白水平比较

A组各组的各时间点FXR蛋白水平均低于B组,差异显著(P<0.05)。见表3。

 

3 6FXR蛋白水平比较

  

组别术后24h术后48h术后72hA组(n=75)0.34±0.080.45±0.110.52±0.07 I组(n=25)0.50±0.110.55±0.140.66±0.14 Ⅱ组(n=25)0.37±0.050.48±0.070.52±0.07 Ⅲ组(n=25)0.31±0.070.36±0.060.41±0.05B组(n=75)0.45±0.05*0.65±0.14*0.75±0.14* I组(n=25)0.62±0.14*0.78±0.15*0.88±0.16* Ⅱ组(n=25)0.45±0.07*0.68±0.12*0.77±0.12* Ⅲ组(n=25)0.38±0.04*0.52±0.10*0.69±0.09*

注:与A组相比,*P<0.05。

2.4 6组Caveolin-1蛋白水平比较

A组各组的各时间点Caveolin-1蛋白水平均低于B组,差异显著(P<0.05)。见表4。

 

4 6Caveolin-1蛋白水平比较

  

组别术后24h术后48h术后72hA组(n=75)0.23±0.050.37±0.080.44±0.11 I组(n=25)0.37±0.130.58±0.150.61±0.13 Ⅱ组(n=25)0.28±0.060.38±0.090.42±0.09 Ⅲ组(n=25)0.21±0.040.32±0.070.36±0.04B组(n=75)0.37±0.08*0.49±0.11*0.74±0.19* I组(n=25)0.44±0.10*0.66±0.16*0.89±0.14* Ⅱ组(n=25)0.38±0.08*0.48±0.12*0.72±0.13* Ⅲ组(n=25)0.29±0.06*0.39±0.08*0.62±0.15*

注:与A组相比,*P<0.05。

3 讨论

健康机体肝细胞几乎不会出现分裂相,而在大部分肝切除后会,肝细胞会产生极强再生能力。有相关研究表明[3]眩珻aveolin-1蛋白是肝再生所必需的蛋白,其在新生肝细胞的产生及其产生过程中的能量供应中起到关键作用,但目前对其确切作用尚未明确。FXR具有抑制胆酸形成,提高胆酸排泄速度及调节胆酸转运的作用,其作为胆酸感受器,能够有效使肝细胞避免胆汁酸超负荷而产生的组织损伤[4]。本研究通过分别喂养大鼠胆酸、葡萄糖喂养,并分别切除50%、70%和90%的肝切除模型,从而分析大鼠肝再生在术后24h、48h、72h的表现。结果可见,A组各组的存活率相比于B组各时间段均较低,两组存活率随着肝切除的比例及时间的推移而逐渐降低。A组各组的各时间点PCNA、FXR蛋白水平及Caveolin-1蛋白水平均低于B组,差异显著(P<0.05)。表明胆汁酸通过FXR蛋白水平及Caveolin-1蛋白水平以促进肝再生的产生,且FXR与Caveolin-1蛋白水平在肝再生发生的表达中呈正相关关系。分析其原因可能为FXR能够根据肝内代谢产物的浓度调节肝脏大小,其能够有效降低机体内胆酸的产生量;而Caveolin-1在机体肝损伤后肝细胞再生中起到重要作用,两者对于促进肝细胞再生具有显著调控效果[5]

参考文献

[1]孙士全,仇毓东.胆汁酸与法尼酯X受体介导肝再生[J].中华肝脏外科手术学电子杂志,2017,6(2):147-149

[2]胡亿龙,周毅,袁晟光.胆汁酸在梗阻性黄疸小鼠肝部分切除术后肝再生中作用的研究[J].中国普通外科杂志,2015,24(7):975-982

[3]董秀山,贺杰峰,赵浩亮.肝再生过程中胆汁酸对肝细胞cyclin D1和NTCP蛋白表达的影响[J].山西医科大学学报,2015,46(12):1169-1171

[4]晁祥嵩,国麟祺,丁隆.肝再生过程中胆汁酸对FXR的影响[J].黑龙江医药科学,2014,37(3):23-25

[5]龚先锋,徐丽红,杨宏强,等.大鼠肝再生模型中上皮细胞黏附分子及转化生长因子-β的动态表达[J].中华实验外科杂志,2017,34(9):1502-1506

 
刘一丹,张立海,王娇,何其勇,吕鑫
《黑龙江医药科学》 2018年第02期
《黑龙江医药科学》2018年第02期文献

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