随着免疫组化和分子病理学技术的迅猛发展，特殊染色技术在病理诊断工作中已被日渐忽略。然而在临床病理诊断工作中，经常遇到HE染色难以明确诊断情况，由于组织病变微小、组织本身微小或会诊白片数量有限，而又无有效组织或白片继续进一步染色来辅助病理诊断时，需将现有的HE切片褪色后再行其它染色以明确诊断，因此特殊染色便有了不可或缺的地位。幽门螺杆菌(helicobacter pylori, HP)是慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌和胃B细胞淋巴瘤重要的危险因子[1]。在多种HP检测方法中，胃黏膜活检组织切片经亚甲蓝染色HP检出率最高[2]。在实际工作中，我们发现改良美蓝染色法操作简便、时间短、结果稳定、实用性强。本文旨在探讨HE染色切片褪色后再行改良美蓝染色显示HP的可行性，以期能反复利用有效资源、重复染色，弥补样本的不足，满足临床病理诊断。

1 材料与方法

1.1 材料 选取海军军医大学附属长海医院病理科胃镜活检标本40例(据临床要求，申请HP检测)，常规取材，均经10%中性福尔马林固定，脱水，透明，浸蜡，包埋等。制成3 μm厚HE切片的实验组和对照组，其中实验组先行常规HE染色。

综上所述，现场施工管理是一项复杂而又细致的系统工作，涉及到诸多不同的学科。在实际工作中，应针对不同的管理难点，采取行之有效的应对措施，提高现场施工管理水平，使施工始终处在理想的可控状态。

1.2 方法

1.2.1 试剂配制 (1)美蓝染液：美蓝0.5 g，硼酸0.5 g，蒸馏水100 mL。(2)醋酸染液：醋酸0.1 mL，蒸馏水100 mL。(3)高锰酸钾硫酸染液：高锰酸钾0.5 g，蒸馏水100 mL，3%硫酸5 mL。(4)草酸染液：草酸2 g，蒸馏水100 mL[3]。

实验组切片和对照组切片比较，镜下均能清晰地辨认HP的形态。在胃小凹、胃腺腔内均可见HP呈弯曲状或逗点状。HP可散在分布，也可成团聚集出现(图1、2)。

综上所述，HE退行性染色及其在改良美蓝染色中显示HP的方法，更具实用性和可操作性，应在临床病理诊断中推广。

2 结果

1.2.2 操作步骤 (1)实验组去除盖玻片与对照组共同脱蜡至水：实验组切片平放于Leica烤片台(温度为75 ℃)上5 min或更长时间，待中性树胶软化，除去载玻片上的盖玻片。再与对照组切片，一同浸入加热至45 ℃的二甲苯Ⅰ和Ⅱ各5 min，梯度乙醇(100%、95%、85%、80%、75%)脱二甲苯，自来水洗净。(2)实验组切片褪色：先经0.5%高锰酸钾硫酸液氧化5 min后，自来水洗净，再用2%草酸染液漂白至白色即可，自来水洗净。(3)改良HP染色：褪色后实验组切片和对照组切片，一起浸入0.5%美蓝染液3 min，自来水洗净，浸入0.1%醋酸染液3 s，自来水洗1 min，直接滤纸吸干或冷风干燥，二甲苯透明，中性树胶封固。

 

图1 实验组切片HE褪色后行改良美蓝染色，胃小凹处HP呈弯曲状或逗点状，散在分布 图2 对照组切片直接行改良美蓝染色，胃腺腔内HP呈鱼群样分布，部分弥散，部分聚集

3 讨论

现代盖碗茶具，在原有的冲泡品饮相结合的功能基础上，延伸出一种将盖碗冲泡功能保留，品饮功能转移到茶杯茶碗的方式。也就是说，盖碗在茶席中与茶壶具有了同样的冲泡功能。仅用于冲泡茶叶的盖碗相比用于泡饮的盖碗，在形制上并无明显变化，但细微之处，口沿的撇口处理更为锋利，保证出汤顺畅收水利落；容量相对偏小（基本在200ml以下），保证盖碗尺寸适宜单手拿捏等。

3.3 高锰酸钾硫酸液-草酸法退HE染色和改良美蓝染色的结合 经临床实践显示两者结合既弥补组织样本资源不足的难题，又节省患者就医的时间，还解决医师临床病理诊断的问题。该法能较好且清晰地显现HP的形态，对于需要批量检测HP的基层医院和常规胃镜活检标本量剧增的医院而言，既经济适用、又快速准确。

3.2 改良美蓝染色 美蓝是一种醌亚胺染料类，是溶于水的碱性染料，一般含有2个发色团：胺基和醌型苯环，染色能力强，电离成有色的阳离子，与带阴离子的HP结合使该菌着蓝色。硼酸美蓝染液性质稳定，价廉，可保存较久，溶液配制时间越久，染色时间稍微延长。染色后切片如经自来水洗时间过长和经乙醇脱水，切片将褪色和着色不均。与丁伟等[4]报道的HP亚甲蓝染色法相比：改良美蓝染色法美蓝的剂量为0.5 g，较原始剂量1 g浓度降低，这样组织将不至于过度快速蓝染和背景过深着色；0.1%醋酸染液分化时间为3 s，既可洗去组织过深的着色，又可使已着色的组织不至于过度脱色。改良美蓝染色法：在常温下即可进行，成本低廉，操作简便、快速准确，批量切片可同时染色，染色阳性率高[2]。

[1] Genta R M. The immunobiology of helicobacter pylori gastritis[J]. Semin Gastrointest Dis, 1997,8(1):2-11.

综上所述，笔者结合江苏宁靖盐高速公路有限公司开展基层思想政治工作的实际，从教育引导、督促推动等方面，深入探讨发挥高速公路公司站区长在思想政治工作中的作用的措施，为基层思想政治工作“鼓与呼”、“唱与和”提供参考。

参考文献：

3.1 HE退行性染色 HE染色后的切片，经加热至75 ℃的烤台和加热至45 ℃的2缸二甲苯：首先是可以更快速地让盖玻片和载玻片分离，便于脱掉盖玻片，尤其是对于切片存档久远和盖玻片难以剥离的HE切片；其次是便于洗去载玻片及组织上附有的中性树胶。梯度乙醇(100%、95%、85%、80%、75%)浓度依次下降，既保证二甲苯的彻底洗脱，也利于HE切片已有伊红颜色的洗脱。褪色时先用高锰酸钾硫酸液，利用它的强氧化性将HE切片中的色素氧化，再经草酸的漂白作用还原为溶于水的物质，自来水洗便可去除。高锰酸钾硫酸液-草酸法退HE染色，方法简便、易行，尤其是在组织切片、诊断组织和原有病变匮乏的情况下，能够通过已有组织切片褪色后再行其它染色来辅助临床病理诊断。褪色后切片行改良美蓝染色过程：需注意自来水洗次数和时间，清洗程度不够，易导致非特异性染色，使背景着色过深；清洗时间过长，导致组织脱片。临床实践中发现，HE退行性染色后的切片也可用于常规HE染色、其它特殊染色、免疫组化染色、分子病理检测等。值得注意的是，整个过程需注意动作轻柔，避免造成切片整体脱落或者残缺不全，影响最终临床病理诊断。

从我国乡村闲置宅旅游开发历程和模式可看出，村干部是闲置宅旅游开发的关键。目前，参与闲置农宅旅游开发的相关方有：村民、以村委会带领的村合作社、旅游开发企业、市（区）农委、市（区）财政局、市（区）旅游局、街道政府，在这些相关方中，村干部是至关重要的一环，我们必须要加强村干部的培训和学习。这是因为：

[2] 徐东娟, 李国富，张红梅，等. 不同方法检测胃黏膜活检标本中幽门螺杆菌感染状况的价值[J]. 临床与实验病理学杂志, 2014,30(6):622.

[3] 龚志锦，詹镕洲. 病理组织制片和染色技术[M]．上海: 上海科学技术出版社, 1994:73.

[4] 丁 伟, 王德田. 简明病理学技术[M]. 杭州：浙江科学技术出版社, 2014:96-97.

把李长吉与华君武拉在一起，似乎有点“关公战秦琼”，但又不能不拉在一起，因为在艺术创造的某一环节上有着惊人的一致，表明了诗、画同体。关连到“迁想妙得”，固然“妙得”必须基于“迁想”，但“迁想”未必都能“妙得”。因为从“迁想”到“妙得”正如钱锺书说的“自眼中至腕下，自腕下至毫颠，距离甚远，沿途走漏不少”。岂止“走漏不少”，更且歧路交错。再有对“似与不似”的把握，“不似”，其谬易见，然而为求似，极意形状之，不亦如《庄子》说浑沌，“日凿一窍，七日而浑沌死”。