肝硬化是一个可以根据显著的临床症状进行分期的一组全身性疾病，其病理生理的演变过程与门静脉高压的变化密切相关。门静脉血流动力学检测能较准确地定量诊断门静脉高压及肝纤维化的严重程度，为肝脏疾病的防治提供可靠依据。血管活性细胞因子介导或参与肝硬化血液动力学异常，血清锌指样转录因子2(KLF2)/肿瘤坏死因子超家族成员15(TNFSF15)等细胞因子表达变化对实验动物器官新生血管的生长有一定的影响[1-2]，但对人体门静脉血流动力学的相关研究尚鲜有报道。为此，我们进行了血清KLF2/TNFSF15等细胞因子表达变化与门静脉血流动力学变化相关性方面的研究，现报道如下。

资料和方法

一、一般资料

选取2017年1月至2017年12月，我院门诊和住院慢性乙型肝炎患者32例，其中男20例、女12例，年龄21～78岁；乙型肝炎肝硬化35例患者，其中男27例、女8例，年龄23～75岁。经病史分析及化验检查明确为感染HBV 6个月以上。排除甲、丙、丁、戊型肝炎病毒重叠感染，排除合并自身免疫性肝炎、脂肪肝、药物性肝损伤及酒精性肝病。慢性乙型肝炎和乙型肝炎肝硬化诊断符合2000年修订的《病毒性肝炎防治方案》的诊断标准[1]。正常对照组为健康体检者30名,其中男20名,女10名，均无肝炎及门静脉系统病史和临床证据。

二、实验仪器和试剂

肝功能试验使用西门子生化仪，试剂为西门子原装试剂；PT检测采用SYSMEX CA1500血凝仪，试剂SYSMEX原装试剂；细胞因子检测采用ELISA法检测; 门静脉血流动力学检测使用飞利浦超声诊断仪。

三、实验方法

实验室检测：禁食8 h后采空腹血标本，及时送检肝功能、血常规、凝血时间(PT)及肝纤维化指标(HA、LN、Ⅳ-C、PC-Ⅲ)等。细胞因子标本留取新鲜血清，-80摄氏度保存，标本收集结束后，统一进行ELISA法测定浓度。门静脉血流动力学: 分别测定脾静脉、门静脉的内径；脾静脉、门静脉的血流速度(PVV)；脾静脉、门静脉的血流量。运用彩色多普勒分别测量门静脉、脾静脉和肠系膜上静脉的内径(D)、最大血流速度(Vmax)、血流方向及门静脉侧枝循环情况。将测得的Vmax换算成平均血流速度(Vmean)(Vmean=0.57×Vmax)，再换算成每分钟血流量(F)(F=Q=π/4×D×Vmean×60)。

四、统计学方法

用SPSS 12.0软件进行统计分析。计量值采用±s来表示。计数资料用χ2检验，计量资料经方差齐性检验后使用t检验。双变量相关性分析采用Pearson相关分析法。P<0.05差异有统计学意义。

本研究样本收集于2018年9月27号至2018年10月7日，共11天。以江西省高校酒店管理专业学生为对象，共发放调查问卷350份，最终收集有效问卷293份。

表1 慢性乙型肝炎组、乙型肝炎肝硬化组、正常对照组实验室指标对比分析表

组别PVVTBilAlbPT(INR)HALNⅣ-CPC-ⅢKLF2TNFSF15TGF-β1eNOSVEGF正常对照组21.1±0.622.3±8.938±1.91.11±0.1375.20±33.1742.25±18.2433.15±25.3915.20±6.222.78±1.6522.50±5.181.07±0.25-1.15±0.112.23±1.13慢性乙型肝炎组15.6±0.424.45±9.4633.85±2.871.06±0.0885.20±53.7169.25±39.1354.09±29.5519.29±7.124.87±1.4612.03±3.211.49±0.62-1.49±0.155.08±1.71乙型肝炎肝硬化组10.5±0.132.10±11.6829.35±4.601.12±0.20286.15±160.69193.12±129.52116.45±63.0858.85±25.336.28±1.796.91±1.833.51±1.74-1.84±0.2224.70±17.78t0.176.449.6324.5421.2817.3617.2025.989.3022.4125.0637.2128.60P0.6800.0340.0030.0620.0000.0000.0000.0000.0030.0000.0000.0000.000

注：*P值为乙型肝炎肝硬化与慢性乙型肝炎组比较

表2 乙型肝炎肝硬化不同Child-Pugh分级间指标对比分析

肝硬化分期KLF2TNFSF15TGF-β1eNOSVEGFPVVChild-PughA5.78±1.4317.96±4.741.95±0.76-1.61±0.189.16±3.3612.5±0.2Child-PughB6.06±2.0411.53±3.983.91±1.84-1.89±0.2218.33±3.7810.1±0.1Child-PughC8.16±1.698.16±2.314.82±1.76-2.00±0.1944.3±17.898.3±0.1P0.0380.0000.0010.0000.0000.001

注：*P值为Child-Pugh C与 Child-Pugh A组比较

结 果

肝损伤导致肝细胞缺氧引起低氧诱导因子-1(HIF-1)活化,进一步诱导下游靶基因VEGF、结缔组织生长因子(CTGF)等表达上调,促进血管新生和纤维化[4-5]。KLF2是锌指蛋白超家族的成员之一,生理性血流刺激下,血管内皮可特异性表达KLF2[5]。本研究表明，过表达KLF2有可能诱导 eNOS 激活的作用，通过炎性因子的表达抑制VEGF激活内皮细胞。

讨 论

脑和脊髓同时受累的CNS结核1例报告 … ……………………………………… 陈黔妹，刘芳，盛灿，等 340

随着慢性乙型肝炎疾病逐渐进展到乙型肝炎肝硬化，患者血清KLF2、TGF-β1、血管内皮生长因子(VEGF)等细胞因子表达逐渐升高，与门静脉血流动力学呈负相关，而细胞因子TNFSF15和eNOS随疾病进展明显降低，与门静脉血流动力学呈正相关。具体见表1和表2。

图书馆阅读推广平台后台设计包括系统管理、用户管理、阅读推广服务、资源链接、读者积分管理、日志管理及其他管理模块。具体的设计如图2所示。

目前认为，肝纤维化发生和发展过程中，慢性炎症、细胞外基质(ECM)过度沉积和血管生成三种病理过程交织在一起，相互促进，最终演变为肝硬化[2-3]。近年来，许多临床及基础研究表明，肝脏血管新生影响着慢性肝脏疾病进展的各个环节，包括炎症、肝纤维化和门静脉高压，同时血管新生可促进肝纤维化进展，病理性血管新生可视作肝纤维化的形成与逆转的关键环节，在慢性肝损伤中，表达上调的许多细胞因子同时促进血管生成和肝星状细胞(HSC)活化。

TNFSF15是TNF家族亚型的细胞因子, 由于选择性剪接作用产生了不同的转录产物, 从而导致这种细胞因子是血管生成抑制剂及自身平衡的调节剂，促进内皮细胞中的mFlt1降解和sFlt1表达上调，从而破坏了基质中VEGF或血液动力障碍诱导的eNOS和MAPK p38激活。其表达降低促进VEGF驱动、内皮细胞支持的血管发生，诱导血管生成,加速组织血管重构，最终增加肝内血管阻力[6]。

因此，通过肝硬化患者外周血单个核细胞(PBMC)中KLF2/TNFSF15等表达变化及对门静脉血流动力学的影响，为阐明肝脏病理性血管新生、血液动力学对肝硬化门静脉高压症慢性进展提供进一步的研究方向。

参 考 文 献

[1] 中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会. 病毒性肝炎防治方案.中华肝脏病杂志，2001，19：56-62.

[2] Han KH，Yoon KT．New diagnostic method for liver fibrosis and cirrhosis. Intervirology, 2008, 51 Suppl 1: 11-16.

[3] Coulon S, Heindryckx F, Geerts A, et al. Angiogenesis in chronic liver disease and its complications. Liver Int，2011, 31: 146-162.

[4] Imhof BA, Aurrand-Lions M. Angiogenesis and inflammation face off. Nat Med， 2006, 12: 171-172.

[5] Bocca C, Novo E, Miglietta A, et al. Angiogenesis and fibrogenesis in chronic liver diseases. Cell Mol Gastroenterol Hepatol，2015，1: 477-488.

[6] Qi JW, Qin TT, Xu LX, et al. TNFSF15 inhibits vasculogenesis by regulating relative levels of membrane-bound and soluble isoforms of VEGF receptor 1. Proc Natl Acad Sci U S A，2013,110: 13863-13868.