再生障碍性贫血 （AA）是由多种病因引起的一种骨髓造血功能衰竭症。目前认为AA主要的发病机制是异常免疫反应损伤造血干细胞，然而部分患者采用免疫抑制治疗的疗效较差。骨髓脂肪化是AA患者的主要病理改变，而导致骨髓脂肪细胞增多的原因不明。骨髓间充质干细胞 （BMSC）是造血微环境的重要组成部分，具有自我更新能力和分化成多种细胞的潜能，可分化为成骨细胞和成脂肪细胞 ［1］。AA患者BMSC成骨方向分化的能力逐渐减弱，而成脂方向分化能力增强 ［2］。增多的骨髓脂肪细胞分泌大量IL－2、IFN－γ等负性造血调控因子及脂联素等脂肪因子， 促进骨髓造血功能的衰竭 ［3］。 研究 ［4－5］显示AA患者的血浆瘦素、脂联素水平明显增高。AA患者瘦素水平升高而瘦素受体降低，二者结合后导致瘦素抑制成脂、促进成骨的作用减弱 ［4］。AA患者血浆脂联素水平与外周血三系细胞呈现负相关 ［5］。血浆中瘦素、脂联素水平升高预示骨髓造血功能下降。而有关AA患者骨髓中瘦素、脂联素的研究较少。本研究通过检测AA患者骨髓活检组织中瘦素和脂联素的表达，探讨二者在AA发病机制中的作用，现报道如下。

式中：c为氯化钠标准滴定溶液的浓度，mol/L；V为滴定所消耗的氯化钠标准滴定溶液体积，mL；V1为样品溶液定容体积，mL；M为银的摩尔质量，M=107.87g/mol；m为样品质量，g；V2为样品溶液分取体积，mL。

1 资料与方法

1．1 研究对象 AA组患者50例骨髓活检标本均选自2012年1月至2016年12月广州市第一人民医院南沙医院及广州市第一人民医院血液科住院首诊AA的患者，其中非重型再生障碍性贫血 （NSAA）34例，重型再生障碍性贫血 （SAA）16例，男28例、 女22例， 平均年龄 （29．3±8.0） 岁， 平均BMI（21．77±1．38）kg／m2。所有患者均进行血常规、骨髓象、骨髓活检、网织红细胞等检查，且符合 《血液病诊断及疗效标准》中AA的诊断标准 ［6］。对照组20例骨髓活检标本取自广州市第一人民医院南沙医院2013年1月至2015年12月疑似血液系统疾病但经骨髓涂片和活检等检查均正常的骨髓组织，其中男12例、女 8 例， 平均年龄 （33．4 ± 8．5） 岁， 平均 BMI （22．2 ± 1．48）kg／m2。 两组患者的一般资料比较无统计学差异 （P＞0．05）。

1．2 骨髓瘦素、脂联素的检测 采用PV－6000二步法免疫组化染色测定骨髓组织中瘦素、脂联素的表达。由广州创伟生物科技有限公司提供兔抗人瘦素多克隆抗体、鼠抗人脂联素多克隆抗体、PV－6000二步法免疫组化检测试剂盒。

1．3 免疫组织化学染色结果判断 采用半定量积分法，每张切片随机选取10个高倍视野，每个视野计数100个细胞。细胞质呈现棕黄色颗粒为瘦素表达阳性，细胞膜呈现浅黄色－棕黄色颗粒为脂联素表达阳性。①阳性细胞比例：<5%为0分，5%～24%为1分，25%～49%为2分，50%～74%为3分，>74%为4分。②染色强度：无色为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。最终评分 =阳性细胞百比例评分+染色强度评分。

The next lemma,due to X.C.Pang,which is a generalized version of the well-known Zalcman’s Lemma on normal families.

1．4 统计学分析 采用SPSS 13．0统计软件，计量资料以±s表示，采用t检验。P＜0．05表示差异有统计学意义。

2 结果

AA组的骨髓瘦素、脂联素水平均显著高于对照组 （P＜0．01）。SAA组和NSAA组的骨髓瘦素、脂联素水平均高于对照组 （P＜0．01）。SAA组与NSAA组的骨髓瘦素、脂联素水平比较差异无统计学意义 （P＞0．05）。 见表1。

 

表1 骨髓瘦素、脂联素评分结果比较 （±s，分）

  

注： 与对照组比较， ＃P＜0．01。

 

组别 n 瘦素 脂联素AA 组 50 3．52±1．42＃ 4．24±1．43＃SAA 组 16 3．81±1．47＃ 4．13±1．45＃NSAA 组 34 3．38±1．39＃ 3．44±1．52＃对照组 20 2．25±1．16 2．05±1．09

3 讨论

研究 ［7］发现，瘦素在造血、炎症中有广泛的生物学效应，特别是在免疫调节中起到重要作用。瘦素主要对机体的食物摄入、能量消耗、脂肪储存等进行中枢性调节 ［8］。瘦素参与调控T细胞产生的细胞因子，增加IL－2和IFN－γ，而降低IL－4在混合淋巴细胞反应过程中的作用，且瘦素上调T细胞的活化，促进Th1辅助细胞反应，导致Th1／Th2比例失调 ［7,9］。另一方面，瘦素通过与人BMSC上的痩素受体结合，可促进BMSC增殖及向成骨细胞分化，增加矿化结节数量，同时抑制其向脂肪细胞分化 ［10］。本研究中的AA患者骨髓瘦素表达升高，而相关研究 ［4］发现AA骨髓瘦素受体表达降低，升高的瘦素与减少的瘦素受体结合，从而间接导致瘦素促进成骨、抑制成脂的作用减弱，而瘦素还可增加IL－2和IFN－γ，负性造血调控因子和脂肪细胞的增多，最终可导致造血干细胞增殖和分化受抑。

脂联素也是由脂肪组织分泌的细胞因子，参与机体的糖脂和能量代谢，还具有增加胰岛素敏感性、抗炎和抗动脉粥样硬化等生物学作用 ［11］。 体外实验 ［12］ 证实脂联素有抑制巨噬细胞的吞噬活性以及抑制脂多糖诱导的肿瘤坏死因子产生的作用，进而抑制炎症过程。此外，脂联素能够抑制粒－巨噬细胞集落形成，并激活这些细胞的AMPK信号途径。在基质细胞和B淋巴前体细胞存在时，脂联素能够通过激活环前列腺素抑制B淋巴细胞的增殖 ［13］。因此，脂联素是免疫及造血系统中一个重要的负性调节因子。本研究中，AA患者的骨髓脂联素表达升高，与相关研究 ［5］结果一致。而未见有文献报道AA患者体内脂联素受体水平变化。本研究也检测了AA患者和对照组骨髓的脂联素受体1表达水平，但两组脂联素受体1的表达都很低，有待深入研究。AA患者体内骨髓过度脂肪化导致脂联素分泌增加，升高的脂联素通过抑制骨髓造血干细胞增殖和分化，加重了骨髓造血衰竭。SAA组与NSAA组的骨髓瘦素、脂联素水平比较差异均无统计学意义 （P>0．05），可能与SAA组样本例数较少有关，可增加样本量进一步研究。

本设计横移机构的驱动装置不与托盘固定，将驱动装置安装在地面和框架上，这样的优点可以防止动力源与托盘固定时对电机的供电和控制都不方便，同时可以提高安全系数也可以保证整体美观。

综上所述，AA患者体内瘦素升高可导致骨髓脂肪细胞增多和免疫调节紊乱，而骨髓脂肪细胞的增多会分泌过多的瘦素、脂联素，从而抑制骨髓正常造血功能。瘦素和脂联素参与了AA骨髓造血衰竭的病理过程。目前，虽然免疫抑制剂在AA治疗中占据主要地位，但治疗周期长，部分患者在治疗过程中可能因出现肝、肾功能损害而中断治疗。而瘦素、脂联素及上游调控脂肪形成因子将有可能成为治疗AA新的靶点。

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