腹主动脉瘤临床上表现为腹主动脉进行性扩张，属于较为严重的血管疾病，具有不易发现、致死率高等特征[1,2]。随着老龄人口增加以及影像技术的迅猛发展，越来越多的腹主动脉瘤被发现，发病率逐年增加[3]。但目前尚未研究清楚了解腹主动脉瘤发病早期机制，阻碍对病情进行有效防止。目前研究较为清楚的是一致认为是动脉局部的慢性炎症及免疫反应为腹主动脉瘤发病的关键机制，因而，炎症细胞浸润的种类及其介导的免疫反应机制在腹主动脉瘤形成过程中的重要有必要深入了解[4,5]。白介素-6（IL-6）是一类同时兼具促炎和抗炎活性的细胞因子，IL-6一方面可在早期炎症阶段产生抗炎作用，另一方面若其持续表达会加速促进血管内膜损伤，在诸多肿瘤患者血清中浓度显著增加，被认为与肿瘤的发生和发展密切相关[6,7]。T细胞激活分泌调节因子（RANTES）可由炎性因子IL-1β或TNF-α刺激下释放，已有不少研究表明RANTES水平增加与多种炎性疾病和肿瘤有关[8,9]。而目前，有关IL-6和RANTES与腹主动脉瘤的关系尚未见报道，为此，我们自2016年5月—2017年12月间，研究IL-6和RANTES在腹主动脉瘤患者的表达情况，现报道如下。

提出问题的能力的培养，一方面需要教师为学生创设激发问题的学习情境，但更重要的是培养学生科学的怀疑精神。因为只有敢于怀疑，才有可能激发认知矛盾产生，也只有产生了认知矛盾，才有可能提出和明确存在的问题，因此，地理学史可以激发学生的学习动机，培养学生形成科学的怀疑和探究精神，使学生具有创新意识。例如，李四光不对“中国贫油论”产生怀疑，哪能为祖国找到大油田？魏格纳正是对“大陆固定说”产生怀疑，提出了著名的“大陆漂移说”，从而开辟了地球科学发展的新思路，这些事例不仅可使学生认识到“怀疑精神”在科学发现、创造中的重要作用，自觉养成科学的怀疑精神，还为学生如何质疑提供了方法论的指导[5]。

1 研究对象与方法

1.1 研究对象 随机抽取2016年5月—2017年12月门诊健康查体者40例作为对照组，腹主动脉瘤患者血清40例作为研究组；其中研究组男23例，女17例，年龄46～79岁，平均年龄（58.34±16.34）岁；对照组男性19例，女性21例，年龄40～76岁，平均年龄（58.34±16.34）岁。入选标准：（1）经病理证实为腹主动脉瘤。（2）自愿参加本研究者。排除标准：（1）有严重精神疾病，存在认知障碍。（2）有严重感染或自身免疫性疾病。（3）恶性肿瘤患者。所有标本取材均经过伦理委员会和患者的同意。

1.2 研究方法（1）标本收集：真空采集管采集研究对象清晨空腹血，2000 g/min，离心10 min，血清保存在-80℃冰箱备用。（2）血清 IL-6、RANTES 的浓度测定：采用酶联免疫吸附法(ELISA)(R＆D Systems，美国)，主要操作步骤为将待测血清和标准品加入到已包被鼠抗RANTES、IL-16单抗的微孔板内，室温放置2 h后用PBS洗涤3次，分别加入二抗和酶联物，室温放置1 h后，PBS洗涤3次，加TMB底物液避光显色15 min并用H2SO4终止反应，全自动酶标仪读取450 nm处吸光值，540 nm处校正。绘制标准曲线，根据标准曲线计算待测样本中RANTES和IL-16的浓度水平。（3）RT-qPCR 检测 IL-6、RANTES mRNA表达：根据Trizol法提取细胞总RNA。用反转录试剂盒逆转成cDNA,SYBR Premix Ex TaqTMⅡ试剂盒（大连宝生物）检测IL-6、RANTES mRNA表达，IL-6上游引物为 ATGAACTCCTTCTCCA⁃CAAGCGC，下游引物为GAAGAGCCCTCAGGCT⁃GGACTG、RANTES上游引物GCTGCTTTGCCTA⁃CATCTCC，下游引物AGAGGCCTGGGAACCTA⁃GA，β-actin上游引物为CAGCACAATGAAGAT⁃CAAGATCA，下 游 引 物 为 CGGACTCGT⁃CATACTCCTGC（上海生工生物），95℃预变性9 mins 45 s，95℃变性15 s，60℃退火15 s，72℃延伸1 min，40个循环，最后72℃延伸5 min，20 μL反应体系，每组设三个重复，根据△△CT法对结果进行相对定量分析，根据各样本的平均Ct值，以2-ΔΔCt表示mRNA相对表达水平，所有反应均在ABI7500实时定量PCR仪完成。

1.3 统计学处理 应用SPSSl9.0软件，所获数据采用方差分析和t检验。

2 结果

腹主动脉瘤的发病过程非常复杂，迄今为止，具体发病机制仍不可知。目前研究确认的是腹主动脉瘤组织学变化为腹主动脉壁中膜弹力蛋白及胶原降解，淋巴细胞及巨噬细胞浸润，平滑肌细胞凋亡及血管新生[10]，同时，炎症细胞浸润和过度表达可导致腹主动脉瘤进行性扩张[11]，RANTES为T细胞、单核细胞的特异性趋化因子，具有促进炎症作用，研究发现，其不仅对单核细胞、T细胞有较强的趋化作用，同时可活化IL-6等炎症因子，参与免疫应答[12,13]。目前已证实，IL-6参与了多种自身免疫性疾病及炎症性疾病的发生、发展[14]。

其中，令：fR:U→F(V),u1→fR(Ui)=(ri1,ri2,…rim)∈F(V),rij=R(Ui,Uj),i=1,2,…,n，j=1,2,…m,则fR就是U到V的模糊影射。

2.2 IL-6、RANTES与腹主动脉瘤临床病理特征的相关性 见表2。

2.4 腹主动脉瘤IL-6与RANTES相关性 RANTES mRNA与IL-6表达水平、RANTES mRNA与IL-6浓度 呈 正 相 关 (r=0.5216，P＜0.005，r=0.6021，P＜0.005)。

 

表1 两组血清 IL-6、RANTES水平（±s）

  

两组IL-6、RANTES水平比较，t=62.0288、25.7383，P均＜0.05。

 

组别 例数 IL-6(pg/ml) RANTES(ng/ml)对照组 40 22.98±1.42 33.98±3.51观察组 40 51.52±2.54 58.41±4.87

 

表2 IL-6、RANTES与腹主动脉瘤临床病理特征的相关性（±s）

  

IL-6与性别、年龄、吸烟史和高血压的相关性，r=0.145、0.121、0.181、0.174，P均 ＞0.05；IL-6与瘤体大小、心血管病史相关性，r=0.712、0.765，P均＜0.01。RANTES与性别、年龄、吸烟史和高血压的相关性，r=0.145、0.121、0.181、0.174，P均 ＞0.05；RANTES与瘤体大小、心血管病史相关性，r=0.712、0.765，P均＜0.01。

 

临床病理参数 IL-6(pg/ml) RANTES(ng/ml)性别 男 53.49±2.71 60.56±5.02女50.18±2.28 56.72±4.73年龄(岁) ≥60 54.45±2.53 56.59 ±4.69＜60 49.52±2.54 59.41±4.79瘤体大小（cm） ≥5 61.53±2.07 70.41±5.72＜5 43.02±2.76 49.18±4.25吸烟史 有 50.41±2.49 55.54±4.63无53.54±2.41 59.08±4.90高血压 有 54.64±2.28 56.71±4.82无51.05±2.76 58.72±4.54心血管疾病史 有 58.62±2.54 65.54±5.12无45.93±2.91 52.64±4.53

  

图1

 

两组IL-6、RANTES mRNA表达比较，t=2.003，P＜0.05；t=1.992，P＜0.05。

2.3 两组人群IL-6、RANTES mRNA表达 见图1。

3 讨论

2.1 两组人群血清IL-6、RANTES水平 见表1。

IL-6与RANTES在腹主动脉瘤发病机制中的作用尚未见报道，本研究表明，与健康对照组人群相比，腹主动脉瘤患者血清IL-6与RANTES水平明显增加，差异具有统计学意义（P＜0.05），本研究还发现腹主动脉瘤中动脉瘤直径≥5.0 cm和有心血管疾病史患者IL-6、RANTES的表达高于动脉瘤直径＜5.0 cm和无心血管疾病者，提示说明腹主动脉瘤患者IL-6、RANTES的表达受瘤体直径和心脑血管疾病这两类因素的影响，在临床上应重视这两种危险因素。同时，RANTES和IL-6水平呈正相关，说明联合检测两者水平对了解腹主动脉瘤病情存在一定价值。

综上所述，IL-6、RANTES的水平升高，有助于腹主动脉瘤的诊断。

三维激光扫描技术在桥梁工程领域的应用与挑战 …李东栋（6-263）… 浅析地理信息与位置大数据在地图编制中的应用余磊（6-265）

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